| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-19页 |
| ·亲免素的发现 | 第11页 |
| ·亲免素的研究现状 | 第11-13页 |
| ·植物亲免素 | 第11-12页 |
| ·动物亲免素 | 第12-13页 |
| ·亲免素的分类及结构特点 | 第13页 |
| ·FKBPs的结构 | 第13-14页 |
| ·FKBPs的生物学性质及其与免疫抑制剂的作用机制 | 第14-17页 |
| ·PPIase活性 | 第14-15页 |
| ·分子伴侣 | 第15-16页 |
| ·与免疫抑制剂的相互作用 | 第16-17页 |
| ·FKBPs临床研究现状及前景 | 第17-19页 |
| ·FKBPs与神经退行性疾病 | 第17-19页 |
| 第2章 引言 | 第19-21页 |
| 第3章 蜡梅CpFKBP基因的克隆及序列分析 | 第21-37页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·蜡梅花cDNA文库 | 第21页 |
| ·菌株和载体 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要实验设备 | 第21页 |
| ·常用自配试剂 | 第21-22页 |
| ·基本培养基 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-27页 |
| ·EST序列特征分析 | 第22-23页 |
| ·蜡梅CpFKBP cDNA的获得 | 第23-27页 |
| ·结果与分析 | 第27-34页 |
| ·CpFKBP的cDNA全长获得 | 第27页 |
| ·CpFKBP cDNA的序列特征 | 第27页 |
| ·CpFKBP的Blast分析和的蛋白同源性分析 | 第27-29页 |
| ·CpFKBP编码蛋白的信号肽分析 | 第29-30页 |
| ·CpFKBP编码蛋白的二级结构预测 | 第30-31页 |
| ·CpFKBP编码蛋白3D模型预测 | 第31页 |
| ·CpFKBP编码蛋白的卷曲螺旋预测 | 第31-32页 |
| ·CpFKBP编码蛋白的跨膜结构分析 | 第32-33页 |
| ·CpFKBP编码蛋白的疏水性区域分析 | 第33页 |
| ·CpFKBP编码蛋白的磷酸化位点分析 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-37页 |
| 第4章 蜡梅CpFKBP基因的原核表达载体构建及融合蛋白表达 | 第37-53页 |
| ·试验材料和试剂 | 第37-40页 |
| ·试验材料 | 第37-38页 |
| ·试验主要试剂 | 第38页 |
| ·主要实验设备 | 第38页 |
| ·自配试剂 | 第38-40页 |
| ·试验方法 | 第40-45页 |
| ·蜡梅FKBP基因表达载体的构建 | 第40-43页 |
| ·CpFKBP融合蛋白的表达 | 第43页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳检测融合蛋白表达情况 | 第43页 |
| ·表达体系的优化 | 第43-44页 |
| ·重组蛋白分离纯化 | 第44-45页 |
| ·重组蛋白浓度测定 | 第45页 |
| ·重组蛋白的PPlase活性检测 | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-52页 |
| ·蜡梅CpFKBP基因原核表达载体的构建 | 第45-46页 |
| ·pET-32a/CpFKBP重组蛋白的表达 | 第46-48页 |
| ·表达体系优化 | 第48-50页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第50页 |
| ·重组蛋白浓度测定 | 第50-51页 |
| ·重组蛋白酶活性测定 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| 第5章 植物表达载体的构建以及转化烟草 | 第53-63页 |
| ·实验材料 | 第53-55页 |
| ·转化植物材料 | 第53页 |
| ·菌株与载体 | 第53页 |
| ·主要试剂 | 第53页 |
| ·自配试剂 | 第53-54页 |
| ·基本培养基配方 | 第54-55页 |
| ·实验方法 | 第55-59页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA2301g-CpFKBP的构建 | 第55-58页 |
| ·目的基因导入烟草及转化植株的获得 | 第58-59页 |
| ·检测转基因烟草 | 第59页 |
| ·结果与分析 | 第59-62页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第59-60页 |
| ·CpFKBP基因转化烟草 | 第60-62页 |
| ·讨论 | 第62-63页 |
| 第6章 总结 | 第63-65页 |
| ·结论 | 第63页 |
| ·后续研究工作 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 缩略词表 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
| 发表论文与参加的研究课题 | 第75页 |
| 发表文章 | 第75页 |
| 参加的研究课题 | 第75页 |
