摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
略缩词表 | 第9-10页 |
第一章 前言 | 第10-20页 |
·马铃薯晚疫病概述 | 第10页 |
·马铃薯晚疫病抗性的分子机制 | 第10-13页 |
·垂直抗性 | 第11-12页 |
·水平抗性 | 第12-13页 |
·植物胞质类受体激酶 | 第13-17页 |
·植物胞质类受体激酶的结构 | 第14页 |
·植物胞质类受体激酶的功能 | 第14-17页 |
·RLCK的抗病反应 | 第14-15页 |
·RLCK参与植物生长发育过程 | 第15-16页 |
·RLCK的抗逆反应 | 第16页 |
·RLCK的其它作用 | 第16-17页 |
·植物蛋白激酶的磷酸化及其调节 | 第17-18页 |
·蛋白激酶的自我磷酸化 | 第18页 |
·激酶域 | 第18-19页 |
·课题的研究目的及意义 | 第19-20页 |
第二章 StPK1转基因株系检测及晚疫病抗病性鉴定 | 第20-29页 |
·材料与方法 | 第20-23页 |
·植物材料 | 第20页 |
·晚疫病原菌及扩繁 | 第20页 |
·转基因株系的RNA抽提(沉淀法) | 第20-21页 |
·RNA的纯化及反转录 | 第21-22页 |
·Realtime-PCR检测转基因株系中目标基因的表达量 | 第22页 |
·离体叶片晚疫病原菌的接种 | 第22页 |
·接种晚疫病叶片DNA的抽提及PCR检测 | 第22-23页 |
·荧光实时定量PCR检测病斑菌丝生长量 | 第23页 |
·结果与分析 | 第23-29页 |
·超量和干涉转基因株系中目标基因表达量检测 | 第23-26页 |
·StPK1转基因株系晚疫病抗性鉴定 | 第26-29页 |
第三章 蛋白激酶基因StPK1的定位、原核表达、纯化及 #24活性测定 | 第29-43页 |
·材料与方法 | 第29-36页 |
·载体、菌株和试剂 | 第29页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备(热击)及转化 | 第29-30页 |
·质粒DNA小量抽提 | 第30页 |
·StPK1绿色荧光表达载体的构建 | 第30-31页 |
·基因枪法转化洋葱表皮细胞 | 第31页 |
·StPK1基因稀有密码子分析 | 第31-32页 |
·StPK1原核表达载体构建 | 第32-33页 |
·融合蛋白的诱导表达及检测 | 第33-35页 |
·GST融合蛋白的柱式纯化 | 第35页 |
·蛋白激酶的活性测定 | 第35-36页 |
·结果与分析 | 第36-43页 |
·StPK1基因荧光亚细胞定位GFP表达载体的构建 | 第36页 |
·基因StPK1的亚细胞定位 | 第36-37页 |
·StPK1基因的原核表达载体的构建 | 第37-39页 |
·GST融合蛋白的表达 | 第39-40页 |
·GST融合蛋白的纯化 | 第40-41页 |
·StPK1蛋白激酶磷酸化活性测定 | 第41-43页 |
第四章 讨论 | 第43-48页 |
·StPK1在抗晚疫病中的作用及亚细胞定位 | 第43-44页 |
·蛋白激酶StPK1的活性分析 | 第44-46页 |
·展望 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-55页 |
致谢 | 第55页 |