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马铃薯晚疫病抗性相关胞质类受体蛋白激酶基因StPK1的功能研究

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
略缩词表第9-10页
第一章 前言第10-20页
   ·马铃薯晚疫病概述第10页
   ·马铃薯晚疫病抗性的分子机制第10-13页
     ·垂直抗性第11-12页
     ·水平抗性第12-13页
   ·植物胞质类受体激酶第13-17页
     ·植物胞质类受体激酶的结构第14页
     ·植物胞质类受体激酶的功能第14-17页
       ·RLCK的抗病反应第14-15页
       ·RLCK参与植物生长发育过程第15-16页
       ·RLCK的抗逆反应第16页
       ·RLCK的其它作用第16-17页
   ·植物蛋白激酶的磷酸化及其调节第17-18页
   ·蛋白激酶的自我磷酸化第18页
   ·激酶域第18-19页
   ·课题的研究目的及意义第19-20页
第二章 StPK1转基因株系检测及晚疫病抗病性鉴定第20-29页
   ·材料与方法第20-23页
     ·植物材料第20页
     ·晚疫病原菌及扩繁第20页
     ·转基因株系的RNA抽提(沉淀法)第20-21页
     ·RNA的纯化及反转录第21-22页
     ·Realtime-PCR检测转基因株系中目标基因的表达量第22页
     ·离体叶片晚疫病原菌的接种第22页
     ·接种晚疫病叶片DNA的抽提及PCR检测第22-23页
     ·荧光实时定量PCR检测病斑菌丝生长量第23页
   ·结果与分析第23-29页
     ·超量和干涉转基因株系中目标基因表达量检测第23-26页
     ·StPK1转基因株系晚疫病抗性鉴定第26-29页
第三章 蛋白激酶基因StPK1的定位、原核表达、纯化及 #24活性测定第29-43页
   ·材料与方法第29-36页
     ·载体、菌株和试剂第29页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备(热击)及转化第29-30页
     ·质粒DNA小量抽提第30页
     ·StPK1绿色荧光表达载体的构建第30-31页
     ·基因枪法转化洋葱表皮细胞第31页
     ·StPK1基因稀有密码子分析第31-32页
     ·StPK1原核表达载体构建第32-33页
     ·融合蛋白的诱导表达及检测第33-35页
     ·GST融合蛋白的柱式纯化第35页
     ·蛋白激酶的活性测定第35-36页
   ·结果与分析第36-43页
     ·StPK1基因荧光亚细胞定位GFP表达载体的构建第36页
     ·基因StPK1的亚细胞定位第36-37页
     ·StPK1基因的原核表达载体的构建第37-39页
     ·GST融合蛋白的表达第39-40页
     ·GST融合蛋白的纯化第40-41页
     ·StPK1蛋白激酶磷酸化活性测定第41-43页
第四章 讨论第43-48页
   ·StPK1在抗晚疫病中的作用及亚细胞定位第43-44页
   ·蛋白激酶StPK1的活性分析第44-46页
   ·展望第46-48页
参考文献第48-55页
致谢第55页

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