| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第10-19页 |
| ·类胡萝卜素的生物学功能 | 第10-12页 |
| ·植物类胡萝卜素的合成途径 | 第12-13页 |
| ·植物类胡萝卜素生物合成途径中的主要酶及其基因 | 第13-16页 |
| ·植物类胡萝卜素生物合成相关基因在基因工程中的应用 | 第16-17页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第17-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-36页 |
| ·试验材料 | 第19-21页 |
| ·植物材料与处理 | 第19页 |
| ·菌株与质粒 | 第19页 |
| ·试剂盒、酶、生化试剂及实验仪器 | 第19页 |
| ·PCR 引物 | 第19页 |
| ·培养基 | 第19-21页 |
| ·试验方法 | 第21-36页 |
| ·RNA 的提取 | 第21-22页 |
| ·反转录 cDNA 模板 | 第22-23页 |
| ·甜瓜果实 Lcyb 基因的克隆 | 第23-28页 |
| ·甜瓜果实不同发育时期 Lcyb 基因相对表达量的测定 | 第28-29页 |
| ·HPLC 法测不同基因型甜瓜果实发育时期类胡萝卜素含量 | 第29-30页 |
| ·甜瓜果实番茄红素β -环化酶基因正义表达载体的构建 | 第30-31页 |
| ·甜瓜果实番茄红素β -环化酶基因反义义表达载体的构建 | 第31-33页 |
| ·Lcyb 正反义表达载体对甜瓜的遗传转化 | 第33-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-46页 |
| ·甜瓜果实总 RNA 的提取 | 第36页 |
| ·Lcyb 基因的克隆及序列分析 | 第36-40页 |
| ·Lcyb 基因中间片段的克隆 | 第36-37页 |
| ·Lcyb 基因 3，端的克隆 | 第37页 |
| ·Lcyb 基因 5，端的克隆 | 第37-38页 |
| ·Lcyb 基因全长的克隆及序列分析 | 第38-40页 |
| ·甜瓜不同器官及果实不同发育时期 L cy b 基因的表达分析 | 第40-41页 |
| ·不同品种甜瓜果实发育时期β -胡萝卜素的含量 | 第41-42页 |
| ·甜瓜果实 Lcyb 基因正、反义植物表达载体的构建 | 第42-43页 |
| ·农杆菌介导法进行 Lcyb 基因对甜瓜的转化 | 第43-46页 |
| 4 讨论 | 第46-50页 |
| ·关于甜瓜总 RNA 的提取 | 第46页 |
| ·RT-PCR 常见问题 | 第46-47页 |
| ·RACE 技术在基因克隆中的作用 | 第47页 |
| ·有关荧光定量 PCR 的问题 | 第47-48页 |
| ·关于表达载体构建的有关问题 | 第48页 |
| ·关于甜瓜农杆菌介导的遗传转化 | 第48-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第59页 |
