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家蚕核型多角体病毒(BmNPV)Bm5的基因分析及利用基因芯片筛选抗BmNPV相关基因

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-15页
第一章 文献综述第15-59页
   ·杆状病毒概述第15-31页
     ·杆状病毒的分类第15页
     ·杆状病毒的形态和结构第15-17页
     ·杆状病毒的生活周期第17-18页
     ·杆状病毒基因组研究进展第18-31页
   ·昆虫和杆状病毒的相互关系第31-42页
     ·昆虫抗病毒研究第31页
     ·对病毒的遗传抗性第31-32页
     ·对病毒感染的物理和生理屏障第32-34页
     ·细胞免疫第34-36页
     ·细胞凋亡第36-38页
     ·体液免疫第38-42页
   ·家蚕抗NPV的研究第42-50页
     ·杆状病毒侵染昆虫的机理第42-43页
     ·BmNPV的增殖曲线及病毒增殖与蚕体生理代谢的变化第43-45页
     ·家蚕对BmNPV抵抗性的遗传规律研究第45页
     ·家蚕中肠在抗NPV的作用第45-46页
     ·家蚕抗BmNPV的相关基因第46-50页
   ·基因芯片研究进展及应用第50-54页
     ·芯片的发展及研究步骤第50-51页
     ·芯片分类第51-53页
     ·芯片的应用领域第53页
     ·基因芯片技术在家蚕中的应用第53-54页
   ·本研究的目的和意义第54-55页
   ·主要研究内容和研究路线第55-59页
     ·研究内容第55页
     ·研究路线第55-59页
第二章 Bm5基因序列分析、原核表达和多克隆抗体制备第59-73页
   ·材料与方法第59-64页
     ·材料第59-61页
     ·方法第61-64页
   ·结果与分析第64-70页
     ·Bm5的核苷酸和其编码的氨基酸的序列特征第64-65页
     ·BM5的氨基酸同源性分析第65-67页
     ·Bm5的克隆第67-69页
     ·Bm5基因的原核表达及检测第69页
     ·BM5蛋白的纯化第69页
     ·融合蛋白6×His接头的鉴定第69-70页
   ·讨论第70-71页
   ·小结第71-73页
第三章 Bm5基因的转录、表达研究及表达产物的定位第73-81页
   ·材料与方法第73-76页
     ·材料第73-74页
     ·方法第74-76页
   ·结果第76-80页
     ·Bm5的转录时相第76-77页
     ·Bm5的表达时相第77-78页
     ·BM5的亚细胞定位第78页
     ·BM5蛋白在病毒结构中的定位第78-80页
   ·讨论第80页
   ·小结第80-81页
第四章 家蚕核型多角体病毒Bm5的缺失和拯救第81-93页
   ·材料和方法第81-87页
     ·材料第81-82页
     ·方法第82-87页
   ·结果第87-92页
     ·大肠杆菌菌株BW25113-Bac的获得第87页
     ·Bm5基因打靶线性化片断的鉴定第87页
     ·重组质粒pUC-US-Cm-DS的酶切鉴定第87-88页
     ·Bm5缺失重组Bacmid的构建和验证第88-89页
     ·vBm-wt、vBm5-ko和vBm5-re三种Bacmid的获得第89-92页
   ·讨论第92页
   ·小结第92-93页
第五章 基因芯片的筛选抗BmNPV相关基因第93-111页
   ·材料和方法第93-96页
     ·材料第93页
     ·试验方法第93-96页
   ·结果第96-108页
     ·RNA提取的浓度和纯度鉴定第96页
     ·高密度家蚕Oligo芯片杂交结果第96页
     ·芯片的图像处理及数据采集结果第96-99页
     ·筛选差异基因第99-102页
     ·GO分析结果第102-107页
     ·Pathway分析第107-108页
   ·讨论第108-109页
   ·结论第109-111页
第六章 部分差异基因的验证第111-129页
   ·材料与方法第111-113页
     ·实验材料第111-113页
     ·实验方法第113页
   ·结果与分析第113-122页
     ·RT-PCR检测抗性相关基因第113-114页
     ·QRT-PCR检测相关抗性基因第114-122页
   ·讨论第122-128页
     ·实时相对定量荧光RT-PCR技术第122-123页
     ·验证材料的特异性第123页
     ·验证差异基因的时间、空间特异性第123-124页
     ·验证方法的特异性第124-125页
     ·鉴定的基因功能分析第125-128页
   ·结论第128-129页
总结和展望第129-131页
 总结第129页
 展望第129-131页
本研究创新点第131-133页
参考文献第133-154页
博士期间发表的研究论文和参加的课题第154-155页
致谢第155页

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