中文摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
缩略词表 | 第8-9页 |
实验技术路线图 | 第9-12页 |
第一章 前言 | 第12-17页 |
·泛素-蛋白酶体降解途径 | 第12-13页 |
·HECT类泛素连接酶 | 第13-14页 |
·HECT类连接酶Smurf1 | 第14-17页 |
第二章 实验材料与方法 | 第17-24页 |
·试剂 | 第17页 |
·细胞 | 第17页 |
·质粒 | 第17页 |
·仪器 | 第17-18页 |
·方法 | 第18-23页 |
·聚合酶链反应 | 第18-19页 |
·DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第19页 |
·从琼脂糖凝胶上回收DNA片段 | 第19页 |
·双酶切反应 | 第19-20页 |
·DNA片段的连接反应 | 第20页 |
·大肠杆菌感受态DH5a细菌转化 | 第20页 |
·大肠杆菌质粒DNA提取 | 第20页 |
·细胞复苏 | 第20-21页 |
·细胞转染 | 第21页 |
·Western blotting | 第21页 |
·间接免疫荧光实验 | 第21-22页 |
·免疫共沉淀实验 | 第22页 |
·体内泛素化实验 | 第22-23页 |
·试剂配方 | 第23-24页 |
·Western blotting相关试剂 | 第23页 |
·细胞裂解相关溶液 | 第23-24页 |
第三章 结果 | 第24-34页 |
·不同异构体的Smurf1在组织中的表达分布情况 | 第24-28页 |
·抗体的检验 | 第24-25页 |
·不同异构体的Smurf1在小鼠组织中的表达 | 第25页 |
·不同异构体的Smurf1在不同细胞系中表达 | 第25-26页 |
·不同异构体的Smurf1在人体组织分布 | 第26-28页 |
·不同异构体的Smurf1在细胞中的定位 | 第28-29页 |
·不同异构体的Smurf1在细胞中的定位 | 第28-29页 |
·不同异构体的Smurf1在细胞有丝分裂期的定位 | 第29页 |
·Smurf1 S与Smurf1 L自身泛素化能力的变化 | 第29-30页 |
·Smurf1 S与Smurf1 L对底物降解能力的差异 | 第30-31页 |
·Smurf1 S和Smurf1 L与底物蛋白和调控蛋白的相互作用 | 第31-34页 |
·Smurf1 S和Smurf1 L与Smad5的相互作用 | 第31-32页 |
·Smurf1 S和Smurf1 L与CKIP-1的相互作用 | 第32-34页 |
第四章 讨论 | 第34-36页 |
第五章 结论 | 第36-37页 |
附录Ⅰ | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-43页 |
综述 | 第43-54页 |
参考文献 | 第48-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
攻读学位期间主要研究成果 | 第55页 |