| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-21页 |
| 引言 | 第12页 |
| ·丹参水溶性化合物研究进展 | 第12-16页 |
| ·丹参水溶性次生代谢物的研究进展 | 第12-14页 |
| ·丹参迷迭香酸代谢途径的研究进展 | 第14-16页 |
| ·肉桂酸-4-羟化酶（C4H）的研究进展 | 第16-17页 |
| ·C4H 的分布 | 第16页 |
| ·C4H 基因的研究 | 第16-17页 |
| ·丹参C4H 基因的研究现状 | 第17页 |
| ·原核表达载体的选择 | 第17-20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 丹参C4H 基因的克隆及序列测定 | 第21-30页 |
| ·材料与试剂 | 第21-22页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·主要试剂的配置 | 第21-22页 |
| ·主要仪器及设备 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-26页 |
| ·丹参毛状根总RNA 的提取（Trizol 法） | 第22-23页 |
| ·检测抽提RNA 质量 | 第23页 |
| ·引物设计与合成 | 第23页 |
| ·从总RNA 合成cDNA 第一条链 | 第23-24页 |
| ·目的基因的PCR 扩增 | 第24页 |
| ·目的基因的回收纯化 | 第24-25页 |
| ·目的基因的连接 | 第25页 |
| ·转化 | 第25页 |
| ·质粒的抽提 | 第25-26页 |
| ·质粒的酶切鉴定 | 第26页 |
| ·结果与分析 | 第26-29页 |
| ·丹参毛状根总RNA 的提取 | 第26页 |
| ·丹参C4H 基因CDs 区的克隆 | 第26-27页 |
| ·目的片段的纯化及T 克隆载体的构建 | 第27-28页 |
| ·丹参C4H 基因CDs 区克隆片段的测序结果 | 第28-29页 |
| ·讨论 | 第29页 |
| ·小结 | 第29-30页 |
| 第三章 丹参C4H 基因原核表达载体的构建与初步表达 | 第30-41页 |
| ·材料与试剂 | 第30-31页 |
| ·材料 | 第30页 |
| ·主要试剂的配置 | 第30-31页 |
| ·试验方法 | 第31-37页 |
| ·SmC4H 基因的获得 | 第31-32页 |
| ·目的基因与克隆载体的连接与转化 | 第32-33页 |
| ·感受态细胞DH5α的制备（CaC12 法） | 第33-34页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第34-35页 |
| ·目的基因的初步诱导表达 | 第35页 |
| ·重组蛋白质的SDS-PAGE 检测 | 第35-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-39页 |
| ·目的基因的PCR 扩增 | 第37页 |
| ·pGEM-T-SmC4H 载体的构建及鉴定 | 第37页 |
| ·pET32a-SmC4H 原核表达载体的构建 | 第37-38页 |
| ·重组蛋白的初步诱导表达及SDS-PAGE 电泳检测 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 第四章 目的蛋白SmC4H 表达条件的优化及纯化 | 第41-48页 |
| ·材料及试剂 | 第41页 |
| ·试剂 | 第41页 |
| ·主要溶液的配制 | 第41页 |
| ·试验方法 | 第41-43页 |
| ·融合蛋白诱导表达条件的优化 | 第41-42页 |
| ·融合蛋白的大量表达及纯化 | 第42-43页 |
| ·结果与分析 | 第43-45页 |
| ·融合蛋白诱导表达条件的优化 | 第43-45页 |
| ·融合蛋白的大量表达及纯化 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| ·小结 | 第46-48页 |
| 第五章 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简介 | 第54页 |