| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 论文综述 | 第13-26页 |
| 第一章 哺乳动物P58~(IPK)基因的研究进展 | 第13-26页 |
| ·DnaJ 基因家族研究进展 | 第13-14页 |
| ·DnaJ 基因家族的成员及命名 | 第13页 |
| ·DnaJ 基因家族的功能和作用机制 | 第13-14页 |
| ·DnaJ 家族蛋白P58~(IPK)研究进展 | 第14-17页 |
| ·DnaJ 家族蛋白P58~(IPK)的发现与结构特点 | 第14页 |
| ·DnaJ 家族蛋白P58~(IPK)的TPR 结构 | 第14-16页 |
| ·DnaJ 家族蛋白P58~(IPK)的DnaJ domain | 第16-17页 |
| ·P58~(IPK)——病毒感染过程中宿主防御的细胞抑制剂“Cellular Inhibitors of the Host Defense”（CIHDs） | 第17-19页 |
| ·P58~(IPK)对病毒复制的贡献 | 第17-18页 |
| ·P58~(IPK)在病毒感染过程中对宿主的贡献 | 第18-19页 |
| ·P58~(IPK)抑制PKR 介导的细胞凋亡 | 第19-20页 |
| ·P58~(IPK)基因在内质网应激反应中下调eIF-2α | 第20-21页 |
| ·P58~(IPK)基因在内质网应激中抑制PERK | 第21页 |
| ·P58~(IPK)基因调控未折叠蛋白应答（UPR） | 第21-22页 |
| ·P58~(IPK)在内质网应激中发挥保护作用 | 第22-23页 |
| ·P58~(IPK)在柯萨基病毒（CV83）感染后UPR 作用网络中下调 | 第23-24页 |
| ·P58~(IPK)基因在植物中存在同源物 | 第24页 |
| ·P58~(IPK)蛋白的广泛表达 | 第24-26页 |
| 研究内容 | 第26-67页 |
| 第二章 猪P58~(IPK)基因的克隆与序列分析 | 第26-38页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·样品来源 | 第26-27页 |
| ·工程菌种和质粒来源 | 第27页 |
| ·试剂和设备 | 第27页 |
| ·分子生物学分析软件和数据库 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-32页 |
| ·电子克隆猪P58~(IPK) | 第27-28页 |
| ·分子克隆猪P58~(IPK) | 第28-30页 |
| ·阳性重组质粒菌液PCR 鉴定和测序 | 第30-32页 |
| ·结果与分析 | 第32-37页 |
| ·电子克隆猪P58~(IPK)结果 | 第32页 |
| ·PCR 产物P58~(IPK)电泳结果 | 第32页 |
| ·重组质粒pMD-P58~(IPK)菌液PCR 电泳结果 | 第32-33页 |
| ·pMD-P58~(IPK)测序结果与序列分析 | 第33-34页 |
| ·猪源P58~(IPK)外显子软件预测结果 | 第34页 |
| ·猪P58~(IPK)蛋白三级结构预测 | 第34-35页 |
| ·P58~(IPK)进化分析 | 第35-36页 |
| ·猪P58~(IPK)蛋白与其它物种蛋白的相似性分析结果 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 第三章 猪P58~(IPK)基因的原核表达、蛋白纯化与多抗制备 | 第38-50页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·试剂和酶 | 第38页 |
| ·工程菌和质粒 | 第38页 |
| ·仪器设备 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-44页 |
| ·pET-P58~(IPK)重组载体的构建与鉴定 | 第39-40页 |
| ·pET-P58~(IPK)重组质粒转化表达菌 BL21 及鉴定 | 第40页 |
| ·pET-P58~(IPK)重组质粒阳性菌BL21 诱导表达 | 第40页 |
| ·SDS-PAGE 检测融合蛋白His-P58~(IPK)表达 | 第40-41页 |
| ·His-P58~(IPK)融合蛋白的纯化 | 第41-42页 |
| ·P58~(IPK)融合蛋白抗血清制备 | 第42页 |
| ·P58~(IPK)多抗效价检测 | 第42-43页 |
| ·Western Blotting 检测His-P58~(IPK)融合蛋白的表达 | 第43页 |
| ·免疫荧光检测P58~(IPK)多抗对天然抗原的识别 | 第43-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-48页 |
| ·重组质粒pET-P58~(IPK)酶切鉴定结果 | 第44页 |
| ·IPTG 诱导His-P58~(IPK)融合蛋白表达SDS-PAGE 分析结果 | 第44-45页 |
| ·His-P58~(IPK)重组蛋白纯化后SDS-PAGE 分析结果 | 第45-46页 |
| ·多抗效价检测结果 | 第46-47页 |
| ·Western Blotting 检测His-P58~(IPK)融合蛋白表达的结果 | 第47页 |
| ·免疫荧光检测P58~(IPK)多抗对天然抗原的识别结果 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48页 |
| ·小结 | 第48-50页 |
| 第四章 猪P58~(IPK)基因在SUVEC 细胞中表达 | 第50-58页 |
| ·材料 | 第50页 |
| ·载体、细胞和菌种 | 第50页 |
| ·酶和试剂 | 第50页 |
| ·主要仪器 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-54页 |
| ·构建P58~(IPK)-pEGFP-C1 和pEGFP-P58~(IPK)-N1 重组真核表达载体 | 第50-53页 |
| ·细胞培养和质粒转染 | 第53页 |
| ·Western blotting 检测过表达和内源性P58~(IPK)蛋白 | 第53-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-57页 |
| ·重组质粒pEGFP-P58~(IPK)-C1、P58~(IPK)-pEGFP-N1 双酶切鉴定和测序结果 | 第54-55页 |
| ·重组质粒浓度检测结果 | 第55页 |
| ·猪脐静脉血管内皮细胞形态观察 | 第55页 |
| ·重组质粒转染猪脐静脉血管内皮细胞形态观察 | 第55-56页 |
| ·Western blotting 检测结果 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 第五章 甲型H1N1 和H3N2 流感病毒株感染猪后对P58~(IPK)基因表达的影响 | 第58-67页 |
| ·材料 | 第58-59页 |
| ·实验动物 | 第58页 |
| ·主要试剂 | 第58-59页 |
| ·试验仪器 | 第59页 |
| ·方法 | 第59-62页 |
| ·取材与固定 | 第59页 |
| ·HE 病理切片的制备 | 第59-60页 |
| ·qRT-PCR 检测染毒后猪肺脏中P58~(IPK)的mRNA 变化 | 第60-61页 |
| ·P58~(IPK)免疫组织化学 | 第61-62页 |
| ·结果 | 第62-65页 |
| ·猪感染流感病毒肺部病理切片的HE 染色结果 | 第62页 |
| ·qRT-PCR 检测结果 | 第62-64页 |
| ·猪感染流感病毒肺部病理切片P58~(IPK)免疫组化结果 | 第64页 |
| ·猪感染流感病毒后肺部组织P58~(IPK)免疫组化相对表达量差异分析结果.. | 第64-65页 |
| ·讨论 | 第65页 |
| ·小结 | 第65-67页 |
| 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 附录1 | 第76-78页 |
| 附录2 | 第78-81页 |
| 缩略词 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 个人简介 | 第83页 |
