鸡白痢沙门氏菌部分生命必需基因的鉴定
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-33页 |
| 1. 沙门氏菌概论 | 第12-18页 |
| ·生物学特性 | 第12-15页 |
| ·致病性与免疫性 | 第15-16页 |
| ·微生物学诊断 | 第16-17页 |
| ·畜禽常见的沙门氏菌 | 第17-18页 |
| 2. 我国鸡白痢沙门氏菌病诊断与防治概况 | 第18-26页 |
| ·鸡白痢的临床病症 | 第19页 |
| ·鸡白痢诊断检疫方法 | 第19-22页 |
| ·鸡白痢沙门氏菌毒力质粒研究 | 第22页 |
| ·鸡白痢沙门氏菌耐药性变化趋势 | 第22-23页 |
| ·鸡白痢沙门氏菌病对生产性能的影响 | 第23页 |
| ·鸡白痢的防治 | 第23-26页 |
| 3. 基因文库 | 第26-30页 |
| ·基因文库概述 | 第26-27页 |
| ·基因文库的代表性与随机性 | 第27-28页 |
| ·亚基因组克隆 | 第28页 |
| ·用于构建基因组DNA文库的载体 | 第28-30页 |
| 4. 必需基因研究 | 第30-33页 |
| ·必需基因概念 | 第30-31页 |
| ·必需基因的研究方法 | 第31-33页 |
| 第二章 鸡白痢沙门氏菌温度敏感质粒文库的构建 | 第33-50页 |
| 摘要 | 第33-34页 |
| 1. 材料 | 第34-35页 |
| ·质粒与菌株 | 第34页 |
| ·工具酶和试剂 | 第34页 |
| ·LB培养基 | 第34页 |
| ·抗生素 | 第34页 |
| ·主要溶液 | 第34-35页 |
| ·主要仪器 | 第35页 |
| 2. 方法 | 第35-45页 |
| ·质粒的提取与纯化 | 第35-37页 |
| ·感受态细胞的制备和转化 | 第37-38页 |
| ·鸡白痢沙门氏菌基因组DNA的抽提 | 第38-39页 |
| ·rPCR模板条件的优化 | 第39-40页 |
| ·基因组随机片段的rPCR扩增 | 第40-41页 |
| ·rPCR产物的回收 | 第41页 |
| ·rPCR产物的酶切 | 第41页 |
| ·酶切产物的纯化 | 第41-42页 |
| ·载体的制备 | 第42-44页 |
| ·基因文库的制备 | 第44-45页 |
| ·文库质量的鉴定 | 第45页 |
| 3. 结果 | 第45-48页 |
| ·鸡白痢沙门氏菌基因组DNA | 第45-46页 |
| ·rPCR条件的优化 | 第46-47页 |
| ·鸡白痢沙门氏菌基因组随机片段的扩增 | 第47页 |
| ·载体的制备及检查 | 第47页 |
| ·基因文库的构建 | 第47-48页 |
| ·文库插入率的检测 | 第48页 |
| 4. 讨论 | 第48-50页 |
| 第三章 鸡白痢沙门氏菌必需基因片段的初步鉴定 | 第50-59页 |
| 摘要 | 第50页 |
| 引言 | 第50-51页 |
| 1. 材料 | 第51页 |
| ·质粒与菌株 | 第51页 |
| ·工具酶和试剂 | 第51页 |
| ·LB培养基 | 第51页 |
| ·抗生素 | 第51页 |
| ·主要仪器 | 第51页 |
| 2. 方法 | 第51-55页 |
| ·鸡白痢沙门氏菌为宿主菌的基因文库的转化 | 第51-53页 |
| ·沙门氏宿主菌转化文库的质量鉴定 | 第53-54页 |
| ·鸡白痢沙门氏菌必需基因的鉴定 | 第54-55页 |
| 3. 结果 | 第55-57页 |
| ·鸡白痢沙门氏宿主菌中转化文库质量的鉴定 | 第56页 |
| ·必需基因片段的PCR扩增结果 | 第56-57页 |
| ·测序结果及BlsatN分析 | 第57页 |
| 4. 讨论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 附录 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
