| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 、前言 | 第8-16页 |
| ·MICRORNA研究进展 | 第8-11页 |
| ·microRNA生成过程 | 第8-9页 |
| ·miRNA的结构与生物学特性 | 第9页 |
| ·miRNA的作用方式 | 第9-10页 |
| ·miRNA与动物发育和人类疾病的关系 | 第10-11页 |
| ·MICRORNA200S家族基因研究进展 | 第11-13页 |
| ·miR-200s基因簇基因组构成 | 第11-12页 |
| ·miR-200家族表达、靶标验证及功能研究进展 | 第12-13页 |
| ·miR-200家族与体型控制的关系 | 第13页 |
| ·动物体型控制机理研究进展 | 第13-15页 |
| ·研究的目的和意义 | 第15-16页 |
| 第二章 小鼠MIR-200S基因分离、表达谱分析及靶基因预测与鉴定 | 第16-23页 |
| ·材料和方法 | 第16-19页 |
| ·序列查找和引物设计 | 第16页 |
| ·miR-200靶基因的预测和验证 | 第16-17页 |
| ·组织表达谱分析 | 第17-18页 |
| ·miRNA前体真核表达载体构建 | 第18-19页 |
| ·重组质粒转染Hepa1-6细胞 | 第19页 |
| ·实验结果 | 第19-22页 |
| ·mmu-miR-200s家族基因分子特征 | 第19页 |
| ·mmu-miR-200a/200b前体及侧翼序列获得 | 第19-20页 |
| ·miR-200s在成年鼠各组织中的表达情况 | 第20-21页 |
| ·小鼠miR-200基因家族靶标预测与验证 | 第21-22页 |
| ·讨论 | 第22-23页 |
| 第三章 脂肪组织特异性敲除MIR-200基因簇的小鼠模型建立 | 第23-30页 |
| ·材料与方法 | 第23-25页 |
| ·基因敲除载体构建 | 第23-24页 |
| ·ES细胞同源重组 | 第24页 |
| ·重组ES细胞的囊胚腔注射 | 第24页 |
| ·Loxp-floxed小鼠基因型鉴定 | 第24页 |
| ·miR-200s脂肪特异敲除小鼠制备 | 第24-25页 |
| ·结果 | 第25-30页 |
| ·脂肪组织特异性miR-429/200a/200b基因簇敲除策略 | 第25-26页 |
| ·敲除载体构建 | 第26页 |
| ·中靶ES细胞的筛选 | 第26-28页 |
| ·loxp-floxed(fln)小鼠基因型检测 | 第28页 |
| ·脂肪组织中特异敲除miR-200a/200b/429小鼠制备与鉴定 | 第28-30页 |
| 第四章 脂肪组织特异性MIR-200基因簇敲除小鼠表型分析 | 第30-40页 |
| ·材料与方法 | 第30-33页 |
| ·实验动物 | 第30页 |
| ·葡萄糖耐受性检测 | 第30-31页 |
| ·胰岛素抵抗性检测 | 第31页 |
| ·小鼠机体脂肪含量分析 | 第31-32页 |
| ·小鼠血清IGF1、脂联素的测定(ELISA法) | 第32页 |
| ·小鼠的组织学分析 | 第32-33页 |
| ·结果 | 第33-40页 |
| ·敲除小鼠脂肪组织中miR-200s表达量检测结果 | 第33页 |
| ·miR200s-/+敲除小鼠生长情况 | 第33-34页 |
| ·miR200s-/+敲除小鼠器官称重及骨密度分析结果 | 第34-35页 |
| ·miR200s~(-/+)敲除小鼠代谢指标检测 | 第35-36页 |
| ·miR200s~(-/+)敲除小鼠血液生化指标检测 | 第36-37页 |
| ·miR200s~(-/+)敲除小鼠组织形态学分析 | 第37-38页 |
| ·miR200s靶基因检测及通路分析 | 第38-40页 |
| 讨论 | 第40-43页 |
| 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-48页 |
| 个人简历 | 第48-49页 |
