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牛脂肪代谢相关基因遗传分析及其与秦川牛经济性状关联分析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-15页
第一章 文献综述第15-32页
   ·引言第15页
   ·牛脂肪代谢相关基因研究进展第15-21页
     ·过氧化物酶体增殖物激活受体基因第15-17页
     ·肪酸结合蛋白基因第17-18页
     ·脂联素基因第18-19页
     ·解偶联蛋白基因第19-20页
     ·脂肪分化相关蛋白基因第20-21页
   ·本试验研究基因的概况第21-25页
     ·Leptin 基因的研究概况第21-23页
     ·黒素皮质素受体4 基因第23-24页
     ·载脂蛋白第24-25页
   ·候选基因分析方法第25-27页
     ·候选基因的选择第26页
     ·获得用于扩增基因的引物序列第26页
     ·揭示候选基因内的多态性第26页
     ·选择用于进行候选基因分析的群体第26-27页
     ·候选基因与表型性状间的连锁分析第27页
     ·连锁关系的验证第27页
   ·家畜分子遗传标记技术第27-29页
     ·直接测序第28页
     ·单链构象多态性第28页
     ·变性高压液相色谱检测第28-29页
     ·SNP 芯片第29页
   ·生物信息学第29-32页
     ·基因的电子克隆第29-30页
     ·基因功能预测第30页
     ·蛋白质结构与功能预测第30-32页
第二章 牛LEPTIN 基因遗传变异及其与秦川牛经济性状的相关分析第32-54页
   ·试验材料第32-35页
     ·试验动物第32页
     ·牛主要经济性状指标第32页
     ·主要试剂第32-33页
     ·主要仪器设备第33页
     ·主要试剂和溶液的配制第33-35页
   ·试验方法第35-40页
     ·血液DNA 提取第35-36页
     ·DNA 质量检测第36页
     ·DNA 浓度检测及稀释第36页
     ·牛leptin 基因引物设计第36-37页
     ·PCR 反应第37-38页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第38-39页
     ·PCR 扩增产物的回收纯化第39-40页
   ·统计分析第40-41页
     ·基因频率和基因型频率的计算第40页
     ·多态信息含量第40页
     ·纯合度和杂合度第40页
     ·Hardy-Weinberg 平衡检测第40-41页
     ·统计分析模型第41页
     ·生物信息学分析第41页
   ·结果与分析第41-50页
     ·DNA 提取结果第41页
     ·Leptin 基因LP1 引物扩增及SSCP 结果第41-43页
     ·Leptin 基因第二外显子73 C>T 多态位点遗传分析第43页
     ·Leptin 基因第二外显子73 C>T 多态位点与秦川牛经济形状的关联分析第43-44页
     ·Leptin 基因第二外显子73 C>T 位点突变的生物信息学分析第44-47页
     ·Leptin 基因LP2 引物扩增及SSCP 结果第47页
     ·Leptin 基因LP2 扩增片段多态位点遗传分析第47-49页
     ·Leptin 基因 LP2 扩增片段多态位点与经济形状的关联分析第49页
     ·Leptin 基因LP3 引物扩增及SSCP 结果第49-50页
   ·讨论第50-53页
     ·PCR-SSCP 反应及测序第50-51页
     ·Leptin 基因的多态性第51-52页
     ·Leptin 基因多态位点与性状的关联分析第52页
     ·73 C>T 位点突变的生物信息学分析第52-53页
   ·小结第53-54页
第三章 牛MC4R 基因遗传变异及其与秦川牛经济性状的相关分析第54-68页
   ·试验材料与方法第54页
   ·试验方法第54-55页
     ·基因组DNA 的分离与质量检测、纯化及浓度计算第54页
     ·DNA 池制备第54页
     ·生物信息学分析第54页
     ·牛MC4R 基因的引物设计及PCR 反应第54-55页
     ·PCR 扩增产物的回收纯化及测序第55页
     ·酶切反应第55页
   ·统计分析第55页
   ·结果与分析第55-66页
     ·牛MC4R 基因的生物信息学分析第55-57页
     ·PCR 扩增及测序结果第57-59页
     ·MC4R 基因-129 位A>G 的Tai I 酶切结果第59页
     ·MC4R 基因-129 A>G 多态位点遗传分析第59-60页
     ·MC4R 基因-129A>G 多态位点与秦川牛经济形状的关联分析第60-61页
     ·MC4R 基因1069 C>G 的Tai I 酶切结果第61页
     ·MC4R 基因1069 C>G 多态位点遗传分析第61-63页
     ·MC4R 基因1069 C>G 多态位点与秦川牛经济形状的关联分析第63页
     ·MC4R 基因1069 C>G 位点突变的生物信息学分析第63-66页
   ·讨论第66-67页
     ·SNPs 的筛查与鉴定第66页
     ·MC4R 基因多态性及性状的关联分析第66-67页
     ·MC4R 基因的生物信息学分析第67页
   ·小结第67-68页
第四章 牛APOA1 基因遗传变异及其与秦川牛经济性状的相关分析第68-84页
   ·试验材料第68页
   ·试验方法第68-69页
     ·基因组DNA 的分离与质量检测、纯化及浓度计算第68页
     ·生物信息学分析第68页
     ·牛 APOA1 基因的引物设计及 PCR 扩增第68-69页
     ·PCR 扩增产物的回收纯化及测序第69页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳及酶切反应第69页
   ·统计分析第69页
   ·结果与分析第69-81页
     ·牛ApoA1 基因的生物信息学分析第69-70页
     ·PCR 扩增及测序第70-72页
     ·ApoA1 基因A11 引物扩增及SSCP 结果第72页
     ·ApoA1 基因A12 引物扩增、SSCP 及测序结果第72-73页
     ·ApoA1 基因411 C>G 多态位点遗传分析第73-75页
     ·ApoA1 基因411 C>G 多态位点与秦川牛经济形状的关联分析第75页
     ·ApoA1 基因A13 引物扩增及突变位点寻找第75-77页
     ·ApoA1 基因1523 T>G 的Msp A1 I 酶切结果第77页
     ·ApoA1 基因1523 T>G 多态位点遗传分析第77-78页
     ·ApoA1 基因1523 T>G 多态位点与秦川牛经济形状的关联分析第78-79页
     ·ApoA1 基因1572 C>A 的Dde I 酶切结果第79页
     ·ApoA1 基因1572 C>A 多态位点遗传分析第79-81页
     ·ApoA1 基因1572 C>A 多态位点与秦川牛经济形状的关联分析第81页
   ·讨论第81-83页
     ·SNP 筛查方法第81-82页
     ·ApoA1 基因的多态性及性状关联分析第82-83页
   ·小结第83-84页
第五章 牛 APOA4 基因克隆及遗传变异分析第84-97页
   ·试验材料第84页
     ·组织样品第84页
     ·血样第84页
   ·试验方法第84-87页
     ·总RNA 的提取第84页
     ·总RNA 的纯化第84-85页
     ·总RNA 检测第85页
     ·ApoA4 基因cDNA 克隆的引物设计第85-86页
     ·PCR 反应第86-87页
     ·PCR 反应产物的回收及测序第87页
     ·ApoA4 基因的生物信息学分析第87页
     ·牛ApoA4 基因SNPs 筛查第87页
   ·结果与分析第87-94页
     ·组织中总RNA 的提取及检测第87-88页
     ·牛ApoA4 基因克隆第88-89页
     ·牛ApoA4 基因的同源性分析第89-90页
     ·牛 ApoA4 的疏水性分析第90页
     ·牛 ApoA4 的跨膜结构分析第90-91页
     ·牛 ApoA4 的信号肽预测第91页
     ·牛ApoA4 蛋白二级结构预测第91-92页
     ·牛ApoA4 蛋白三级结构预测第92页
     ·牛ApoA4 基因SNP 筛查第92-94页
   ·讨论第94-96页
     ·组织中RNA 的提取第94页
     ·ApoA4 基因的克隆第94-95页
     ·基因的生物信息学分析第95-96页
   ·小结第96-97页
第六章 总结第97-100页
   ·主要的研究结果第97-98页
   ·创新点第98页
   ·值得进一步研究的问题第98-100页
参考文献第100-113页
致谢第113-114页
作者简介第114页

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