| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 1 前言 | 第13-39页 |
| ·盐胁迫对植物的危害 | 第13-14页 |
| ·盐胁迫及植物对盐胁迫响应的可能机理 | 第14-38页 |
| ·小分子渗透调节物质 | 第14-16页 |
| ·钙离子 | 第16-17页 |
| ·活性氧 | 第17-19页 |
| ·盐胁迫对光合作用的影响 | 第19-20页 |
| ·多胺等小分子 | 第20页 |
| ·植物激素与盐胁迫抗性 | 第20-23页 |
| ·脱落酸与盐胁迫抗性 | 第21-22页 |
| ·赤霉素与盐胁迫抗性 | 第22页 |
| ·激动素对盐胁迫抗性的影响 | 第22-23页 |
| ·生长素与盐胁迫抗性 | 第23页 |
| ·转录因子在盐胁迫抗性中的作用 | 第23-25页 |
| ·b-ZIP转录因子 | 第23-24页 |
| ·DREB转录因子 | 第24-25页 |
| ·NAC转录因子 | 第25页 |
| ·蛋白激酶与盐胁迫抗性 | 第25-27页 |
| ·MAPK | 第26页 |
| ·CDPK | 第26页 |
| ·RLK | 第26-27页 |
| ·蛋白质降解与盐胁迫 | 第27-31页 |
| ·泛素与泛素系统 | 第27-29页 |
| ·SUMO化 | 第29-30页 |
| ·泛素化体系参与植物的胁迫响应 | 第30-31页 |
| ·高通量方法广泛用于盐胁迫相关基因的检出 | 第31-32页 |
| ·小RNA与盐胁迫 | 第32-38页 |
| ·microRNA的形成过程 | 第33-35页 |
| ·microRNA以转录后抑制的方式影响靶基因的表达 | 第35页 |
| ·microRNA与发育 | 第35-36页 |
| ·玉米microRNA的研究情况 | 第36-37页 |
| ·microRNA与逆境响应 | 第37-38页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第38-39页 |
| 2 材料与方法 | 第39-45页 |
| ·植株和菌株材料 | 第39页 |
| ·植株生长条件和处理条件 | 第39-40页 |
| ·盐胁迫响应ESTs的获得 | 第40-42页 |
| ·玉米总RNA提取及mRNA分离 | 第40页 |
| ·抑制消减杂交文库构建 | 第40-41页 |
| ·消减文库的macroarray杂交 | 第41页 |
| ·cDNA芯片杂交 | 第41-42页 |
| ·消减文库获得片段的启动子区域的预测 | 第42页 |
| ·耐盐microRNA的获得 | 第42-45页 |
| ·microRNA芯片杂交 | 第42-43页 |
| ·microRNA基因启动子区域cis元件预测 | 第43页 |
| ·microRNA靶基因预测 | 第43-44页 |
| ·microRNA表达分析 | 第44页 |
| ·microRNA靶基因的表达分析 | 第44-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-66页 |
| ·玉米两个自交系的盐抗性比较 | 第45-46页 |
| ·SSH文库构建及筛选 | 第46-48页 |
| ·cDNA文库杂交 | 第48-49页 |
| ·玉米的盐胁迫抗性是一种多基因控制的复杂性状,存在分子调控网络。 | 第49-54页 |
| ·盐胁迫影响转录和翻译相关因子转录本的表达 | 第50页 |
| ·盐胁迫响应的蛋白激酶编码基因受到不同调节,而蛋白磷酸酯酶编码基因被诱导 | 第50页 |
| ·盐胁迫条件下,Ub/26S蛋白酶体系的作用加强 | 第50-51页 |
| ·盐胁迫抑制光合作用 | 第51页 |
| ·盐胁迫条件下,核糖体蛋白质编码基因倾向于被抑制表达 | 第51页 |
| ·盐胁迫下,细胞骨架成分蛋白质的编码基因倾向于受到抑制 | 第51页 |
| ·与膜上物质转运相关的蛋白质编码基因被盐胁迫条件诱导 | 第51页 |
| ·盐胁迫与其它胁迫具有共同响应因子 | 第51-52页 |
| ·盐响应EST的RT-PCR分析 | 第52-54页 |
| ·盐胁迫响应ESTs的电子定位和promoter分析 | 第54页 |
| ·microRNA芯片杂交结果 | 第54-66页 |
| ·玉米根系盐胁迫响应miRNA | 第54-57页 |
| ·两系中差异的microRNA比较 | 第57页 |
| ·盐胁迫响应的miRNA在胁迫条件下的可能功能 | 第57-60页 |
| ·盐胁迫响应microRNA靶基因预测,启动子区域cis位点预测 | 第60-62页 |
| ·stem-loop RT-PCR验证microRNA的表达 | 第62页 |
| ·microRNA靶基因的RT-PCR分析 | 第62-66页 |
| 4 讨论 | 第66-73页 |
| ·耐盐表型筛选标准选择 | 第66-67页 |
| ·其它胁迫条件的响应基因在盐胁迫下的玉米细胞中也被检测到 | 第67-68页 |
| ·盐胁迫响应信号系统的编码基因在两自交系中的表达受到微调 | 第68-69页 |
| ·microRNA介导的转录后调控在玉米的盐胁迫响应中起到很大作用 | 第69-70页 |
| ·玉米盐胁迫响应基因的其它调节机制 | 第70-72页 |
| ·转录水平:RNA合成与RNA降解的动态平衡 | 第70-71页 |
| ·翻译水平:蛋白质正确折叠、调控、与降解的动态平衡 | 第71页 |
| ·翻译后水平调节 | 第71-72页 |
| ·两自交系中差异表达的盐胁迫响应ESTs和miRNAs可解释两系的表型差异 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-82页 |
| 附录附表和附图 | 第82-107页 |
| 附录1 玉米自交系水培培养液配方(改良1×Hoagland's培养液) | 第82页 |
| 附录2 玉米组织总RNA的提取 | 第82-83页 |
| 附录3 玉米mRNA的分离 | 第83-84页 |
| 附录4 抑制消减杂交(SSH)文库构建 | 第84-85页 |
| 附录5 显影液、定影液配方 | 第85-86页 |
| 附录6 cDNA芯片杂交流程 | 第86-87页 |
| 附录7 Stem-loop RT-PCR流程(据Varkonyi-Gasic等2007) | 第87-89页 |
| 附录8:玉米盐胁迫响应ESTs的电子定位 | 第89-90页 |
| 附录9-A:PCR primers for microRNA promoter amplify | 第90页 |
| 附录9-B:5 of the maize micorRNA promoter sequences obtained by PCR amplifying and sequencing | 第90-91页 |
| 附表1:RT-PCR及Real-time RT-PCR引物序列 | 第91-92页 |
| 附表2:Stem-loop RT引物及随后的PCR引物 | 第92-93页 |
| 附表3:预测的micriRNA靶基因及相应RT-PCR引物 | 第93-94页 |
| 附表4:用SSH技术和芯片技术检测到的玉米盐胁迫响应EST的同源比较及功能注释 | 第94-101页 |
| 附表5:盐胁迫响应ESTs对应基因启动子区域的关键胁迫响应cis位点预测 | 第101-105页 |
| 附表6:玉米盐胁迫响应zma-miRNA基因启动子区关键的胁迫响应cis元件 | 第105-107页 |
| 简历 | 第107-108页 |
| 致谢 | 第108页 |
