| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 绪论 | 第15-34页 |
| 1 Bt杀虫晶体蛋白 | 第15-17页 |
| ·Bt杀虫晶体蛋白基因 | 第15-16页 |
| ·杀虫晶体蛋白基因的表达调控 | 第16-17页 |
| 2 芽胞 | 第17-24页 |
| ·芽胞形成的起始 | 第18-19页 |
| ·细胞不对称分裂和前芽胞的形成 | 第19页 |
| ·基因的区室化表达和芽胞内吞 | 第19-22页 |
| ·芽 胞的成熟 | 第22页 |
| ·芽胞的萌发 | 第22-23页 |
| ·研究前景 | 第23-24页 |
| 3 芽胞杆菌功能基因组学的研究方法 | 第24-33页 |
| ·模式基因组 | 第24-25页 |
| ·基因表达 | 第25-27页 |
| ·转座子插入突变 | 第27-29页 |
| ·同源重组敲除技术 | 第29-30页 |
| ·生物信息学 | 第30-33页 |
| 4 本研究的立题依据 | 第33页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第33-34页 |
| 第一章 转座子突变体库的构建和筛选 | 第34-44页 |
| 1 材料与方法 | 第34-39页 |
| ·实验材料 | 第34-36页 |
| ·研究方法 | 第36-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-42页 |
| ·G03菌株突变体库的构建与鉴定 | 第39-41页 |
| ·突变株芽胞和晶体的观察 | 第41页 |
| ·突变株cry基因型的鉴定 | 第41-42页 |
| 3 讨论 | 第42-43页 |
| ·转座子及突变技术 | 第42-43页 |
| ·无芽胞和无晶体突变株的筛选 | 第43页 |
| 4 小结 | 第43-44页 |
| 第二章 突变株G03(spoⅢAE)∷Mini-Tn10的研究 | 第44-60页 |
| 1 材料和方法 | 第44-49页 |
| ·实验材料 | 第44-45页 |
| ·研究方法 | 第45-49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-58页 |
| ·Mini-Tn10转座子在突变株染色体DNA上的拷贝数分析 | 第49页 |
| ·重组质粒pIZL的鉴定 | 第49-50页 |
| ·Mini-Tn10转座子侧翼序列分析 | 第50-51页 |
| ·spoⅢAE基因的序列分析 | 第51-52页 |
| ·SpoⅢAE蛋白的生物信息学分析 | 第52-55页 |
| ·SpoⅢAE蛋白在Bacilli内的同源性比较与系统进化分析 | 第55-57页 |
| ·突变株形成芽胞和晶体能力的检测 | 第57-58页 |
| ·突变株杀虫晶体蛋白的分析 | 第58页 |
| 3 讨论 | 第58-59页 |
| ·突变位点的确定和目的基因的克隆 | 第58-59页 |
| ·SpoⅢAE蛋白的特点和可能的生物学功能 | 第59页 |
| 4 小结 | 第59-60页 |
| 第三章 敲除spoⅢAE基因影响杀虫蛋白表达的机制初探 | 第60-78页 |
| 1 材料与方法 | 第60-68页 |
| ·实验材料 | 第60-61页 |
| ·研究方法 | 第61-68页 |
| 2 结果与分析 | 第68-76页 |
| ·敲除载体pRAE的构建与鉴定 | 第68-70页 |
| ·突变株的获得 | 第70页 |
| ·突变株的生长特性 | 第70-71页 |
| ·突变株产生芽胞和晶体能力的检测 | 第71页 |
| ·突变株产杀虫蛋白能力的分析 | 第71-72页 |
| ·spoⅢAE基因失活影响cry1Aa基因转录的分析 | 第72-73页 |
| ·突变株中sigmaE因子的活性分析 | 第73-76页 |
| ·spoⅢAE基因突变株杀虫能力的生物测定 | 第76页 |
| 3 讨论 | 第76-77页 |
| ·基因敲除技术 | 第76页 |
| ·基因互作的研究 | 第76-77页 |
| ·SpoⅢAE蛋白在调控中可能扮演的角色 | 第77页 |
| 4 小结 | 第77-78页 |
| 第四章 spoⅣF操纵子缺失对芽胞形成和杀虫蛋白表达的影响 | 第78-93页 |
| 1 材料和方法 | 第78-82页 |
| ·实验材料 | 第78-79页 |
| ·研究方法 | 第79-82页 |
| 2 结果与分析 | 第82-91页 |
| ·spoⅣF操纵子的克隆与序列分析 | 第82-85页 |
| ·敲除载体pRⅣF的构建与鉴定 | 第85-86页 |
| ·突变株的获得 | 第86页 |
| ·突变株产生芽胞和晶体能力的检测 | 第86-87页 |
| ·突变株G03(spoⅣF△)的功能恢复 | 第87-88页 |
| ·突变株产杀虫蛋白能力的分析 | 第88页 |
| ·突变株G03(spoⅣF△)中cry1Aa基因转录的分析 | 第88-90页 |
| ·Bt中部分依赖于sigmaE转录的启动子序列分析 | 第90页 |
| ·突变株G03(spoⅣF△)杀虫能力的生物测定 | 第90页 |
| ·spoⅢAE基因与spoⅣF操纵子影响杀虫蛋白表达的比较 | 第90-91页 |
| 3 讨论 | 第91-92页 |
| ·sigmaE因子下游基因对其活性的影响 | 第91-92页 |
| ·苏云金芽胞杆菌中的sigmaE调节子 | 第92页 |
| 4 小结 | 第92-93页 |
| 第五章 结论 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 作者简历 | 第108页 |
