| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-42页 |
| ·植物—病原细菌的相互作用 | 第15-22页 |
| ·致病因子 | 第15-19页 |
| ·植物病原细菌的早期侵染事件 | 第19-20页 |
| ·植物病原细菌致病因子的调控机制 | 第20-22页 |
| ·致病相关基因的突变方法 | 第22-24页 |
| ·诱变 | 第22-23页 |
| ·标记置换(Marker Exchange) | 第23-24页 |
| ·基因的转移 | 第24页 |
| ·酵母双杂交系统的发展及应用 | 第24-26页 |
| ·水稻白叶枯病菌致病性的分子机理 | 第26-36页 |
| ·Xoo基因组的总体特征 | 第27-28页 |
| ·Xoo与Xac和Xcc的全基因组序列比较 | 第28页 |
| ·活动组分 | 第28-29页 |
| ·代谢特征和RM系统 | 第29页 |
| ·致病相关基因 | 第29-36页 |
| ·GacS/GacA双组分调控系统及其调控机理 | 第36-41页 |
| ·GacS/GacA双组分调控系统的定义 | 第37页 |
| ·GacS/GacA双组分调控系统的结构特征 | 第37-38页 |
| ·GacS/GacA同源物中的保守结构域 | 第38-39页 |
| ·GacS/GacA双组分调控系统模型及其相关联因子的研究 | 第39页 |
| ·GacS/GacA双组分调控系统在植物—病原物互作中的调控研究 | 第39-41页 |
| ·本研究的目的意义和技术路线 | 第41-42页 |
| ·研究目的和意义 | 第41页 |
| ·技术路线 | 第41-42页 |
| 第二章 水稻白叶枯病菌gacAxoo基因的功能分析 | 第42-62页 |
| ·实验材料 | 第43-44页 |
| ·菌株和质粒 | 第43页 |
| ·生化试剂 | 第43页 |
| ·培养基和菌株培养条件 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-51页 |
| ·Xoo基因组DNA的制备 | 第44-45页 |
| ·gacAxoo基因的扩增 | 第45-46页 |
| ·gacAxoo基因纯化 | 第46页 |
| ·gacAxoo基因的连接与转化 | 第46-48页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第48页 |
| ·标记置换法构建△gacAxoo突变体 | 第48-49页 |
| ·构建gacAxoo突变体的互补菌株 | 第49-50页 |
| ·△gacAxoo突变体致病性测试和过敏性反应(HR)分析 | 第50页 |
| ·△gacAxoo突变体运动性(motility)检测 | 第50页 |
| ·△gacAxoo突变体胞外酶活性的检测 | 第50页 |
| ·gacAxoo序列的生物信息学分析 | 第50-51页 |
| ·结果与分析 | 第51-59页 |
| ·gacAxoo基因克隆 | 第51页 |
| ·gacAxoo生物信息学分析 | 第51-55页 |
| ·构建△gacAxoo突变体菌株 | 第55-56页 |
| ·△gacAxoo基因突变体的互补分析 | 第56-57页 |
| ·△gacAxoo突变体HR诱导能力和致病性测试 | 第57-58页 |
| ·△gacAxoo突变体运动性分析 | 第58-59页 |
| ·△gacAxoo突变体胞外酶活性分析 | 第59页 |
| ·讨论 | 第59-62页 |
| 第三章 酵母双杂交系统分析与GacAXoo互作的相关蛋白 | 第62-77页 |
| ·实验材料 | 第63-65页 |
| ·菌株和质粒 | 第63-64页 |
| ·生化试剂 | 第64页 |
| ·培养基和培养条件 | 第64页 |
| ·酵母菌株的活化 | 第64-65页 |
| ·实验方法 | 第65-71页 |
| ·制备双酶切诱饵载体pGBKT7 | 第65页 |
| ·制备gacAxoo诱饵质粒 | 第65-66页 |
| ·Xoo总RNA提取 | 第66页 |
| ·RNA样品中残余DNA去除 | 第66-67页 |
| ·cDNA文库的构建 | 第67-68页 |
| ·酵母菌株感受态细胞的制备 | 第68-69页 |
| ·诱饵载体和捕获文库共转化酵母 | 第69页 |
| ·超声波法提取质粒DNA | 第69-70页 |
| ·质粒DNA的扩增 | 第70页 |
| ·互作蛋白的再次验证 | 第70-71页 |
| ·阳性克隆质粒DNA序列分析 | 第71页 |
| ·结果与分析 | 第71-74页 |
| ·gacAxoo诱饵载体的制备 | 第71-72页 |
| ·提取和纯化Xoo总RNA | 第72页 |
| ·合成和纯化双链cDNA | 第72页 |
| ·诱饵载体pGBKT7-gacAxoo和Xoo捕获文库的互作分析 | 第72-74页 |
| ·GacAxoo与Tdrxoo互作的再验证 | 第74页 |
| ·讨论 | 第74-77页 |
| 第四章 水稻白叶枯病菌tdrxoo基因的功能分析 | 第77-95页 |
| ·实验材料 | 第77-78页 |
| ·菌株和质粒 | 第77-78页 |
| ·生化试剂 | 第78页 |
| ·培养基和菌株培养条件 | 第78页 |
| ·实验方法 | 第78-81页 |
| ·△tdrxoo突变体质粒制备 | 第78页 |
| ·△tdrxoo基因突变体构建 | 第78-79页 |
| ·△tdrxoo突变体的互补菌株构建 | 第79页 |
| ·△gacAxoo/△tdrxoo双基因突变菌株构建 | 第79页 |
| ·致病性和HR反应测定 | 第79页 |
| ·运动性测定 | 第79页 |
| ·胞外多糖分泌检测 | 第79页 |
| ·胞外酶类活性测定 | 第79-80页 |
| ·生长曲线测定 | 第80页 |
| ·嗜铁素(siderophore)产生的检测 | 第80页 |
| ·△tdrxoo和△gacAxoo/△tdrxoo鞭毛电镜观察 | 第80页 |
| ·生物被膜(Biofilm)的定性检测 | 第80页 |
| ·tdrxoo基因的生物信息学分析 | 第80页 |
| ·革兰氏阴性细菌中TDR类基因分析 | 第80-81页 |
| ·结果与分析 | 第81-91页 |
| ·△tdrxoo的制备 | 第81-82页 |
| ·△tdrxoo互补菌株的制备 | 第82页 |
| ·△gacAxoo/△tdrxoo双基因突变菌株的构建 | 第82-83页 |
| ·突变体致病性和HR反应分析 | 第83-84页 |
| ·胞外多糖分泌检测 | 第84页 |
| ·突变体菌株运动性分析和鞭毛的电镜观察 | 第84-85页 |
| ·突变体菌株胞外酶分析 | 第85页 |
| ·嗜铁素产生的检测 | 第85页 |
| ·生长曲线的测定 | 第85-86页 |
| ·Biofilm形成分析 | 第86页 |
| ·tdrxoo基因的生物信息学分析 | 第86-90页 |
| ·tdr基因分析 | 第90-91页 |
| ·讨论 | 第91-95页 |
| 第五章 全文结论 | 第95-97页 |
| 参考文献 | 第97-116页 |
| 附录 | 第116-117页 |
| 致谢 | 第117-118页 |
| 作者简历 | 第118页 |
