| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-23页 |
| ·植物病毒抑制剂的研究体系 | 第11-13页 |
| ·病毒—寄主—抑制剂的相互关系 | 第11页 |
| ·植物病毒抑制剂筛选 | 第11-12页 |
| ·病毒—细胞—药剂筛选体系 | 第12-13页 |
| ·病毒抑制剂对病毒的作用方式及机制 | 第13-16页 |
| ·抑制病毒侵染 | 第13-14页 |
| ·抑制病毒增殖 | 第14页 |
| ·诱导寄主产生抗性 | 第14-15页 |
| ·类似激素的作用机制 | 第15页 |
| ·作用于传毒介体 | 第15-16页 |
| ·多方面协调作用 | 第16页 |
| ·水稻条纹叶枯病的流行与发生 | 第16-18页 |
| ·水稻条纹叶枯病的损失 | 第18页 |
| ·水稻条纹叶枯病的防治 | 第18-20页 |
| ·病害控制的分子生物学策略 | 第18-19页 |
| ·生产中病害的控制 | 第19-20页 |
| ·水稻条纹叶枯病毒病防治存在的问题 | 第20-21页 |
| ·本研究的意义 | 第21-23页 |
| 2 抗RSV药剂的筛选 | 第23-32页 |
| ·材料和方法 | 第23-27页 |
| ·材料 | 第23页 |
| ·供试毒源 | 第23页 |
| ·供试水稻品种 | 第23页 |
| ·供试药剂 | 第23页 |
| ·抗血清 | 第23页 |
| ·试剂及仪器 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-27页 |
| ·病毒提取 | 第23-24页 |
| ·毒源繁殖 | 第23页 |
| ·病毒提纯 | 第23-24页 |
| ·提纯病毒的紫外吸收测定 | 第24页 |
| ·水稻愈伤组织的培养 | 第24-25页 |
| ·成熟胚诱导 | 第24-25页 |
| ·未成熟胚诱导 | 第25页 |
| ·水稻悬浮细胞体系的建立 | 第25页 |
| ·水稻悬浮细胞活力测定 | 第25页 |
| ·RSV接种水稻悬浮细胞 | 第25-26页 |
| ·荧光抗体染色统计病毒侵染悬浮细胞的百分比 | 第26页 |
| ·ELISA检测RSV侵染水稻悬浮细胞后CP在细胞体内的表达周期 | 第26-27页 |
| ·抗病毒药剂的筛选 | 第27页 |
| ·病毒浓度标准曲线的制作 | 第27页 |
| ·抗病毒增殖作用的测定 | 第27页 |
| ·结果与分析 | 第27-31页 |
| ·病毒的提纯与鉴定 | 第27-28页 |
| ·愈伤组织的获得 | 第28页 |
| ·水稻悬浮细胞的获得 | 第28-29页 |
| ·水稻悬浮细胞活性测定 | 第29页 |
| ·荧光抗体染色统计病毒侵染悬浮细胞的百分比 | 第29-30页 |
| ·RSV侵染水稻悬浮细胞后CP在细胞体内的表达周期 | 第30页 |
| ·抗病毒药剂的筛选 | 第30-31页 |
| ·结论与讨论 | 第31-32页 |
| ·RSV在悬浮细胞中的表达 | 第31页 |
| ·筛选体系的建立及药剂的筛选 | 第31-32页 |
| 3 臭椿粗提物对RSV的抑制效果 | 第32-54页 |
| ·材料 | 第32-33页 |
| ·供试病毒、细胞、药剂及质粒 | 第32页 |
| ·试剂及仪器 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-41页 |
| ·臭椿粗提物对RSV在水稻悬浮细胞内的影响 | 第33页 |
| ·臭椿粗提物不同浓度对RSV的抑制作用 | 第33页 |
| ·臭椿粗提物对RSV侵染水稻悬浮细胞后不同时间的影响 | 第33页 |
| ·臭椿粗提物对RSV的作用机制 | 第33-34页 |
| ·ELISA检测臭椿粗提物对RSV的作用机制 | 第33页 |
| ·western-blot检测臭椿粗提物对CP在悬浮细胞体内的影响 | 第33-34页 |
| ·SDS-PAGE检测 | 第33-34页 |
| ·western-blot检测 | 第34页 |
| ·SDS-PAGE检测臭椿粗提物对CP的直接影响 | 第34-35页 |
| ·点杂交检测臭椿粗提物对病毒RNA在悬浮细胞体内的影响 | 第35-38页 |
| ·CP、SP基因DIG标记DNA探针 | 第35-36页 |
| ·含CP、SP质粒PCR扩增目的片段 | 第35页 |
| ·CP、SP目的基因片段的回收 | 第35-36页 |
| ·探针标记 | 第36页 |
| ·探针标记效果的测定 | 第36页 |
| ·细胞总RNA提取 | 第36-37页 |
| ·点杂交检测 | 第37-38页 |
| ·Real-time PCR检测臭椿粗提物对病毒RNA的影响 | 第38-39页 |
| ·引物设计和合成 | 第38页 |
| ·细胞总RNA提取 | 第38页 |
| ·CP、SP基因的cDNA第一条链合成 | 第38-39页 |
| ·普通PCR扩增检测样品质量以及引物的特异性 | 第39页 |
| ·Real-time PCR检测样品 | 第39页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第39页 |
| ·臭椿粗提物、RSV对水稻悬浮细胞主要防御酶的诱导作用 | 第39-41页 |
| ·过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)活性测定 | 第39-40页 |
| ·苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性测定 | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-52页 |
| ·臭椿粗提物不同浓度对RSV在水稻悬浮细胞中的抑制作用 | 第41页 |
| ·臭椿粗提物对RSV侵染水稻悬浮细胞后不同时间的影响 | 第41-42页 |
| ·臭椿粗提物对RSV蛋白的作用机制 | 第42-44页 |
| ·ELISA结果 | 第42页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第42-43页 |
| ·western-blot结果分析 | 第43-44页 |
| ·臭椿粗提物对CP的直接影响 | 第44页 |
| ·臭椿粗提物对RSV核酸的作用机制 | 第44-50页 |
| ·CP、SP目的片段的扩增 | 第44-45页 |
| ·探针标记结果检测 | 第45-46页 |
| ·点杂交检测臭椿粗提物对CP，SP转录mRNA的影响 | 第46页 |
| ·引物的特异性检测结果 | 第46-47页 |
| ·Real-Time PCR扩增曲线、融解曲线及标准曲线图 | 第47-49页 |
| ·分析臭椿粗提物对CP，SP转录mRNA的影响 | 第49-50页 |
| ·臭椿粗提物、RSV对水稻悬浮细胞主要防御酶的影响 | 第50-52页 |
| ·过氧化物酶(POD)活性的变化 | 第50页 |
| ·多酚氧化酶(PPO)活性的变化 | 第50-51页 |
| ·苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的变化 | 第51-52页 |
| ·结论与讨论 | 第52-54页 |
| 小结 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 附录一 | 第62-67页 |
| 附录二 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
