新生猪肌组织成纤维细胞系和耳部皮肤成纤维细胞系的建立
| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-23页 |
| ·细胞培养的背景 | 第11-12页 |
| ·培养细胞的生物学概述 | 第12-16页 |
| ·培养细胞的环境 | 第12页 |
| ·细胞黏附 | 第12-14页 |
| ·细胞增殖 | 第14-15页 |
| ·能量代谢 | 第15页 |
| ·培养细胞的起源 | 第15-16页 |
| ·动物细胞体外培养技术 | 第16-17页 |
| ·细胞系建立的技术路线 | 第17-20页 |
| ·原代细胞的获得 | 第17-18页 |
| ·细胞的传代培养 | 第18页 |
| ·细胞的冷冻保存和复苏 | 第18-19页 |
| ·细胞系的鉴定 | 第19-20页 |
| ·猪成纤维细胞体外培养的意义 | 第20-23页 |
| 2 研究目的和意义 | 第23-24页 |
| 3. 细胞系的建立 | 第24-37页 |
| ·实验材料 | 第24-26页 |
| ·实验动物 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·实验用具的清洗和消毒 | 第24-25页 |
| ·玻璃器皿的清洗和消毒 | 第24页 |
| ·金属器械的清洗和消毒 | 第24-25页 |
| ·橡胶和塑料用品的清洗和消毒 | 第25页 |
| ·主要溶液的配制 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-30页 |
| ·原代细胞的培养 | 第26-27页 |
| ·培养皿的包被 | 第26页 |
| ·肌组织成纤维细胞的原代培养 | 第26-27页 |
| ·耳部皮肤成纤维细胞的培养 | 第27页 |
| ·细胞的传代培养 | 第27页 |
| ·培养细胞的纯化 | 第27-28页 |
| ·细胞的冻存 | 第28页 |
| ·细胞的复苏 | 第28-29页 |
| ·最佳胰蛋白酶浓度的确定 | 第29页 |
| ·胰蛋白酶最佳消化时间的确定 | 第29-30页 |
| ·消化时加入胰蛋白酶后是否需要在温箱中预热 | 第30页 |
| ·最佳血清浓度的确定 | 第30页 |
| ·实验结果 | 第30-34页 |
| ·原代细胞生长情况 | 第30-31页 |
| ·传代细胞生长情况 | 第31-32页 |
| ·细胞的冻存和复苏 | 第32页 |
| ·最佳胰蛋白酶浓度的确定 | 第32-33页 |
| ·最佳胰蛋白酶消化时间的确定 | 第33页 |
| ·消化时加入胰蛋白酶后需要在温箱中预热 | 第33-34页 |
| ·最佳血清浓度的确定 | 第34页 |
| ·讨论 | 第34-37页 |
| ·实验动物的获取 | 第34页 |
| ·细胞的体外培养和生长特性 | 第34-35页 |
| ·细胞的传代培养 | 第35页 |
| ·细胞的冻存和复苏 | 第35-37页 |
| 4. 细胞系的鉴定 | 第37-51页 |
| ·实验材料 | 第37-38页 |
| ·实验用细胞 | 第37页 |
| ·主要器具和试剂 | 第37页 |
| ·试剂的配制 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-43页 |
| ·培养细胞的形态学观察 | 第38-39页 |
| ·细胞的生长动力学检查 | 第39页 |
| ·培养细胞微生物污染检测 | 第39-40页 |
| ·逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测 | 第40-41页 |
| ·免疫细胞化学染色鉴定 | 第41-42页 |
| ·细胞转染效率的检测 | 第42页 |
| ·核型分析 | 第42-43页 |
| ·实验结果 | 第43-49页 |
| ·培养细胞的形态 | 第43-44页 |
| ·细胞生长曲线 | 第44-45页 |
| ·培养细胞微生物污染检测结果 | 第45页 |
| ·逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测结果 | 第45-46页 |
| ·免疫细胞化学染色结果 | 第46-47页 |
| ·细胞转染效率的检测结果 | 第47-48页 |
| ·核型分析的结果 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| ·培养细胞的形态 | 第49页 |
| ·培养细胞的生长情况的讨论 | 第49页 |
| ·培养细胞微生物污染检测结果 | 第49-50页 |
| ·基因表达分析 | 第50页 |
| ·免疫细胞化学染色结果分析 | 第50页 |
| ·细胞转染效率分析 | 第50页 |
| ·核型分析 | 第50-51页 |
| 小结 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 论文发表情况 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
