| 致谢 | 第1-12页 |
| 中文摘要 | 第12-16页 |
| Abstract | 第16-22页 |
| 前言 | 第22-24页 |
| 第一部分 文献综述 | 第24-60页 |
| 第一章 昆虫卵黄蛋白与卵黄发生 | 第24-48页 |
| 1 卵黄蛋白前体的性质与合成部位 | 第24-30页 |
| ·脂肪体合成的卵黄蛋白 | 第24-29页 |
| ·卵巢滤泡细胞合成的卵黄蛋白 | 第29-30页 |
| 2 卵黄蛋白合成 | 第30-39页 |
| ·不完全变态昆虫和鞘翅目昆虫 | 第30-33页 |
| ·鳞翅目昆虫 | 第33-35页 |
| ·双翅目昆虫 | 第35-38页 |
| ·膜翅目昆虫 | 第38-39页 |
| 3 卵黄蛋白摄取 | 第39-45页 |
| ·卵黄蛋白受体 | 第40-43页 |
| ·受体调节的内吞通道(RME) | 第43-44页 |
| ·内吞作用的内分泌调控 | 第44页 |
| ·滤泡开放的内分泌调控 | 第44-45页 |
| 4 昆虫卵黄蛋白的分子进化 | 第45-48页 |
| 第二章 昆虫卵子发生及其影响因子 | 第48-60页 |
| 1 昆虫卵巢管类型 | 第48-49页 |
| 2 果蝇的卵子发生 | 第49-54页 |
| ·生殖干细胞和干细胞小生境 | 第49-50页 |
| ·体干细胞 | 第50页 |
| ·滤泡细胞 | 第50-51页 |
| ·生殖细胞囊(cyst)的形成 | 第51-53页 |
| ·滋养细胞和卵母细胞间胞质转移 | 第53-54页 |
| 3 营养对卵子发生的影响 | 第54-60页 |
| ·直翅目和蜚蠊目昆虫 | 第54页 |
| ·鳞翅目昆虫 | 第54-55页 |
| ·双翅目昆虫 | 第55-58页 |
| ·膜翅目昆虫 | 第58-60页 |
| 第二部分 试验研究 | 第60-172页 |
| 第三章 蝶蛹金小蜂 Vt的纯化与生化特性 | 第60-70页 |
| 1 材料与方法 | 第60-64页 |
| ·供试昆虫 | 第60页 |
| ·样品制备 | 第60-61页 |
| ·Vt的分离纯化 | 第61页 |
| ·梯度非变性PAGE电泳 | 第61页 |
| ·SDS-PAGE | 第61-62页 |
| ·2-D电泳 | 第62-63页 |
| ·脂蛋白染色 | 第63页 |
| ·糖蛋白染色 | 第63-64页 |
| ·磷酸化蛋白染色 | 第64页 |
| 2 结果与分析 | 第64-68页 |
| ·Vg/Vt的鉴定及其生化特性分析 | 第64-66页 |
| ·Vt的纯化 | 第66页 |
| ·蝶蛹金小蜂卵内可溶性蛋白的双向电泳 | 第66-68页 |
| 3 讨论 | 第68-70页 |
| 第四章 蝶蛹金小蜂 Vt单克隆抗体的制备与应用方法的建立 | 第70-80页 |
| 1 材料与方法 | 第70-73页 |
| ·供试昆虫 | 第70页 |
| ·抗原的制备 | 第70-71页 |
| ·单克隆单体的制备 | 第71页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第71页 |
| ·IgG亚类的决定及其酶标抗体的制备 | 第71页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第71-72页 |
| ·SDS-PAGE和 Western blot | 第72页 |
| ·几种 ELISA方法的比较 | 第72-73页 |
| 2 结果与分析 | 第73-78页 |
| ·分泌抗蝶蛹金小蜂卵黄蛋白单克隆抗体细胞株的建立 | 第73-74页 |
| ·单克隆抗体的纯度 | 第74页 |
| ·抗Vt单克隆抗体的特性 | 第74-75页 |
| ·抗Vt单克隆抗体的应用 | 第75-78页 |
| 3 讨论 | 第78-80页 |
| 第五章 蝶蛹金小蜂卵巢发育与卵黄发生 | 第80-88页 |
| 1 材料与方法 | 第80-81页 |
| ·供试昆虫 | 第80页 |
| ·卵巢形态的观察 | 第80页 |
| ·样品制备 | 第80-81页 |
| ·SDS-PAGE和 Western blot | 第81页 |
| ·异源双抗夹心ELISA | 第81页 |
| ·数据分析 | 第81页 |
| 2 结果与分析 | 第81-85页 |
| ·发育过程中卵巢的形态变化 | 第81-82页 |
| ·血淋巴中Vg合成的时间动态 | 第82-84页 |
| ·Vg摄取时间动态及与卵巢发育的关系 | 第84-85页 |
| 3 讨论 | 第85-88页 |
| 第六章 蝶蛹金小蜂的卵子发生及其细胞凋亡 | 第88-102页 |
| 1 材料与方法 | 第89-91页 |
| ·供试昆虫 | 第89页 |
| ·卵巢内Vt的免疫定位 | 第89-90页 |
| ·卵母细胞冰冻切片的制备和荧光观察 | 第90页 |
| ·TUNEL和 PI双染色 | 第90-91页 |
| ·激光共聚焦 | 第91页 |
| ·透射电镜 | 第91页 |
| 2 结果与分析 | 第91-99页 |
| ·卵子发生的形态变化 | 第91-95页 |
| ·基于 F-actin细胞骨架的观察与分析 | 第95页 |
| ·Vt在卵母细胞中的免疫定位 | 第95-97页 |
| ·滋养细胞和滤泡细胞凋亡的观察 | 第97-99页 |
| 3 讨论 | 第99-102页 |
| 第七章 蝶蛹金小蜂的胚胎发育与卵黄蛋白的降解 | 第102-108页 |
| 1 材料与方法 | 第103页 |
| ·供试昆虫 | 第103页 |
| ·胚胎的观察 | 第103页 |
| ·SDS-PAGE和 Western blot | 第103页 |
| ·异源双抗夹心ELISA | 第103页 |
| 2 结果与分析 | 第103-106页 |
| ·胚胎发育过程中的形态观察 | 第103-104页 |
| ·胚胎发育过程中Vt降解的时间动态 | 第104-106页 |
| 3 讨论 | 第106-108页 |
| 第八章 蝶蛹金小蜂卵黄发生的内分泌调控 | 第108-124页 |
| 1 材料与方法 | 第108-111页 |
| ·供试昆虫 | 第108页 |
| ·激素的提取和测定 | 第108-110页 |
| ·激素处理 | 第110页 |
| ·去头实验 | 第110页 |
| ·异源双抗夹心 ELISA | 第110页 |
| ·荧光定量 PCR | 第110页 |
| ·数据分析 | 第110-111页 |
| 2 结果与分析 | 第111-117页 |
| ·保幼激素滴度的时间动态 | 第111-112页 |
| ·蜕皮激素滴度的时间动态 | 第112-113页 |
| ·保幼激素对卵黄发生的影响 | 第113-115页 |
| ·蜕皮激素对卵黄发生的影响 | 第115-116页 |
| ·去头雌蜂体内Vg/Vt的变化及其激素的影响 | 第116-117页 |
| 3 讨论 | 第117-124页 |
| ·蝶蛹金小蜂体内激素的变化与其生长的关系 | 第117-118页 |
| ·保幼激素与蝶蛹金小蜂卵黄发生的关系 | 第118-120页 |
| ·蜕皮激素与蝶蛹金小蜂卵黄发生的关系 | 第120-122页 |
| ·蝶蛹金小蜂的生殖模式及其内分泌调控机制 | 第122-124页 |
| 第九章 成虫营养和交配对蝶蛹金小蜂卵黄发生与卵成熟的影响 | 第124-132页 |
| 1 材料与方法 | 第125页 |
| ·供试虫源 | 第125页 |
| ·不同营养和交配对蝶蛹金小蜂卵黄发生影响的测定 | 第125页 |
| ·喂食对蝶蛹金小蜂生殖力影响的测定 | 第125页 |
| ·异源双抗夹心ELISA | 第125页 |
| ·总蛋白含量的测定 | 第125页 |
| ·数据分析 | 第125页 |
| 2 结果与分析 | 第125-129页 |
| ·取食对Vg合成与摄取的影响 | 第125-128页 |
| ·交配对Vg合成与摄取的影响 | 第128-129页 |
| ·取食对蝶蛹金小蜂生殖力的影响 | 第129页 |
| 3 讨论 | 第129-132页 |
| 第十章 蝶蛹金小蜂脂肪体cDNA表达文库的构建与分析 | 第132-148页 |
| 1 材料与方法 | 第132-140页 |
| ·供试昆虫 | 第132页 |
| ·脂肪体的提取 | 第132页 |
| ·总RNA的提取 | 第132-133页 |
| ·mRNA的纯化 | 第133-134页 |
| ·cDNA表达文库的构建 | 第134-138页 |
| ·噬菌体文库转噬粒 | 第138-139页 |
| ·cDNA插入片段的PCR扩增 | 第139页 |
| ·DNA测序 | 第139-140页 |
| 2 结果与分析 | 第140-141页 |
| ·脂肪体总RNA的提取以及mRNA的纯化 | 第140页 |
| ·文库质量的鉴定 | 第140-141页 |
| ·插入序列的分析 | 第141页 |
| 3 讨论 | 第141-148页 |
| 第十一章 蝶蛹金小蜂 Vg基因的克隆及其体内表达的分析 | 第148-172页 |
| 1 材料与方法 | 第149-159页 |
| ·供试昆虫 | 第149页 |
| ·免疫筛选 | 第149-151页 |
| ·阳性克隆的PCR分析 | 第151页 |
| ·DNA测序 | 第151页 |
| ·插入片断的BLAST分析 | 第151页 |
| ·SRACE | 第151-156页 |
| ·荧光定量PCR | 第156-157页 |
| ·N-末端测序 | 第157-158页 |
| ·系统树构建及其氨基酸序列的比较 | 第158-159页 |
| 2 结果与分析 | 第159-169页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第159页 |
| ·阳性克隆的PCR检验以及序列分析 | 第159-160页 |
| ·Vg全序列的分析 | 第160-164页 |
| ·Vg mRNA在不同发育时期表达差异性的分析 | 第164-166页 |
| ·Vg进化的分析 | 第166-169页 |
| 3 讨论 | 第169-172页 |
| 第三部分 总讨论 | 第172-178页 |
| 附录:已经接受和待发表的论文 | 第178-180页 |
| 参考文献 | 第180-200页 |
