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瓜类细菌性果腐病病原菌鉴定和生物学特性的研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
1.前言第11-22页
   ·病害认识的历史第11-12页
   ·病害症状第12页
   ·侵染循环第12-13页
   ·病原菌第13-14页
     ·分类地位第13页
     ·寄主范围第13页
     ·形态及生理生化特征第13页
     ·亚种间的分化现象第13-14页
   ·病原菌的检测与鉴定第14-18页
     ·传统的细菌鉴定检测方法第14-15页
     ·利用BIOLOG鉴定检测系统第15-16页
     ·血清学第16页
       ·免疫分离法第16页
       ·酶联免疫法第16页
     ·PCR技术第16-18页
       ·IMS-PCR第17页
       ·实时荧光PCR第17-18页
   ·瓜类细菌性果腐病的防治第18-22页
     ·抗病品种第18-19页
     ·种子处理第19页
     ·农业防治第19-20页
     ·化学防治第20-21页
     ·生物防治第21-22页
2 材料和方法第22-34页
   ·西瓜细菌性果腐病病原菌的鉴定第22-24页
     ·病原菌的分离和纯化第22-23页
       ·培养基的制备第22页
       ·从病株上分离病原菌第22-23页
       ·从种子上分离病原菌第23页
       ·从病瓜表面和内部分离病原菌第23页
     ·菌株的活化、培养及保存第23页
     ·革兰氏染色第23-24页
     ·细菌形状和培养性状第24页
     ·透射电镜观察细菌形态第24页
   ·病原菌的致病性和寄主范围测定第24-25页
     ·供试材料第24-25页
     ·试验方法第25页
   ·西瓜细菌性果腐病病菌的血清学检测第25-26页
     ·试验材料第25页
     ·溶液的配制第25-26页
     ·西瓜细菌性果腐病病菌PCR鉴定第26-31页
     ·参试菌株:第26页
     ·主要分子生物学试剂及仪器第26-27页
     ·DNA的提取第27-28页
       ·煮沸法第27页
       ·CTAB法第27-28页
       ·SDS法第28页
     ·WFB引物扩增第28-29页
     ·Acidovorax avenae subsp.citrulli特异性引物的扩增第29页
     ·16S-23S rDNA ITS全序列分析第29-31页
       ·参试菌株第30页
       ·引物合成第30页
       ·扩增程序第30页
       ·PCR产物的回收第30-31页
   ·菌液浸种时间对病害发生的影响第31页
     ·供试材料第31页
     ·试验方法第31页
   ·温度对病原菌侵入的影响第31-32页
     ·供试材料第31-32页
     ·试验方法第32页
   ·西瓜种子表面带菌量对病害发生的影响第32页
     ·供试材料第32页
     ·试验方法第32页
   ·病原菌的田间接种试验第32页
     ·花期幼果期接种试验第32页
     ·种子带菌测定第32页
   ·病害发生与幼苗生长期的关系第32-34页
     ·供试材料第32页
     ·试验方法第32-34页
3、结果与分析第34-45页
   ·病原菌的分离和纯化第34页
   ·细菌形状和培养性状第34页
   ·病原菌的致病性和寄主范围测定第34-36页
     ·病原菌的致病性测定第34-35页
     ·病原菌的寄主范围测定第35-36页
   ·酶联免疫反应测定第36页
   ·煮沸法、CTAB法和SDS法提取DNA的比较第36-37页
   ·WFB引物PCR扩增结果第37-38页
   ·ACIDOVORAX AVENAE SUBSP.CITRULLI特异性引物的PCR扩增结果第38页
   ·ITS全序列分析第38-39页
   ·菌液浸种时间对病害发生的影响第39页
   ·温度对病原菌侵入的影响第39-40页
   ·西瓜种子表面带菌量对病害发生的影响第40页
   ·病原菌的田间接种试验第40-42页
     ·花期接种试验第40-41页
     ·幼果期接种试验第41-42页
   ·种子带菌测定第42-43页
   ·病害发生与幼苗生长期的关系第43-45页
4 讨论第45-49页
   ·病原菌的分离和纯化第45页
   ·致病力及寄主范围测定第45-46页
   ·田间接种试验第46页
   ·烘干温度对种子发病的影响第46-47页
   ·PCR检测第47-48页
   ·种子带菌的机理第48页
   ·发病机理及综合防治第48-49页
5 小结第49-50页
参考文献第50-55页
附录第55-59页
致谢第59页

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