| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 第一章 肝癌的现状和靶向基因--病毒治疗的概述 | 第12-23页 |
| ·肝癌的现状 | 第12-13页 |
| ·肿瘤的生物治疗 | 第13-23页 |
| ·肿瘤的基因治疗 | 第14-17页 |
| ·肿瘤的病毒治疗 | 第17-21页 |
| ·病毒载体的构建 | 第19页 |
| ·病毒靶向性的改造策略 | 第19-21页 |
| ·靶向基因-病毒治疗 | 第21-22页 |
| ·本课题的研究目的和意义 | 第22-23页 |
| 缩略词 | 第23-24页 |
| 第二章 AFP 调控的携带 Mn-SOD 的腺病毒对肝癌细胞的杀伤作用的研究 | 第24-62页 |
| ·实验材料 | 第24-29页 |
| ·菌株与质粒 | 第24页 |
| ·腺病毒 | 第24页 |
| ·工具酶及生化试剂 | 第24-25页 |
| ·主要溶液的配制 | 第25-26页 |
| ·细胞株 | 第26-27页 |
| ·抗体 | 第27页 |
| ·实验主要仪器 | 第27-28页 |
| ·合成引物序列 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-50页 |
| ·重组质粒 pAd.enAFP-E1A-△E1B55Kd-MnSOD 的构建 | 第29-36页 |
| ·基因MnSOD 表达框的获取和鉴定 | 第32-34页 |
| ·质粒 pAd.enAFP--E1A-△E1B55Kd-MnSOD 的获取 | 第34-36页 |
| ·重组腺病毒的包装、鉴定、扩增、纯化和滴度的测定 | 第36-43页 |
| ·重组腺病毒的包装 | 第36-38页 |
| ·病毒的鉴定 | 第38-40页 |
| ·病毒的扩增 | 第40-41页 |
| ·CsCl 梯度离心纯化病毒 | 第41页 |
| ·重组病毒的滴度测定 | 第41-43页 |
| ·病毒的体外杀伤效果的检测 | 第43-45页 |
| ·MTT 检测细胞存活率 | 第43页 |
| ·Hoechst33342 染色观察细胞凋亡 | 第43-44页 |
| ·结晶紫实验观察细胞毒性 | 第44-45页 |
| ·Western blot 检测蛋白表达 | 第45-50页 |
| ·结果和分析 | 第50-60页 |
| ·病毒的鉴定 | 第50-53页 |
| ·MTT 法证明病毒对肝癌细胞有杀伤作用 | 第53-55页 |
| ·光学显微镜下观察到细胞形态的改变 | 第55页 |
| ·Hoechst33342 染色检测到细胞发生凋亡 | 第55-57页 |
| ·结晶紫染色定性检测到病毒对肝癌细胞有杀伤作用 | 第57-58页 |
| ·Western blot 证实病毒通过线粒体途径诱导细胞凋亡 | 第58-60页 |
| ·实验结论 | 第60页 |
| ·讨论和展望 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
