| 中文摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-24页 |
| 实验材料 | 第24-26页 |
| 实验方法 | 第26-32页 |
| 1.菌体培养方法 | 第26页 |
| 2.微生物静息细胞的制备 | 第26页 |
| 3.发酵过程参数的测定 | 第26页 |
| ·生物量的测定 | 第26页 |
| ·发酵液pH值的测定 | 第26页 |
| ·菌种形态的观察 | 第26页 |
| 4.产物、前体检测方法 | 第26-28页 |
| ·薄层色谱法 | 第26-27页 |
| ·HPLC法 | 第27页 |
| ·变色酸法 | 第27页 |
| ·微孔快速筛选法 | 第27-28页 |
| 5.生物转化的流程 | 第28页 |
| ·菌悬液的制备 | 第28页 |
| ·DL-对羟基苯海因溶液的制备 | 第28页 |
| ·转化 | 第28页 |
| 6.菌体酶活的测定 | 第28页 |
| 7.菌体的诱变及筛选 | 第28-31页 |
| ·出发菌株的选育 | 第28页 |
| ·诱变方法 | 第28-31页 |
| ·筛选方法 | 第31页 |
| 8.培养基的优化 | 第31-32页 |
| 结果与讨论 | 第32-50页 |
| 第一部分 产物、前体检测方法的建立 | 第32-38页 |
| ·薄层色谱法(TLC) | 第32页 |
| ·高效液相法(HPLC) | 第32-34页 |
| ·检测波长的选择 | 第33页 |
| ·流动相的选择 | 第33-34页 |
| ·流量的影响 | 第34页 |
| ·温度的影响 | 第34页 |
| ·方法线性范围 | 第34页 |
| ·变色酸法 | 第34-37页 |
| ·对羟基苯甘氨酸标准曲线的绘制 | 第34-35页 |
| ·对羟基苯海因标准曲线的绘制 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| ·微孔快速筛选法 | 第37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| 第二部分 生物转化条件的优化 | 第38-43页 |
| ·菌种转化能力的考察 | 第38页 |
| ·菌种生长曲线的测定 | 第38-39页 |
| ·酶活的测定 | 第39页 |
| ·生物转化条件的初步优化 | 第39-43页 |
| ·转化液pH值 | 第39-40页 |
| ·菌体和前体量的比例 | 第40-41页 |
| ·氮气对转化体系的影响 | 第41页 |
| ·有机溶剂在转化反应中的应用 | 第41页 |
| ·转化时间、底物质量浓度及静息细胞质量浓度的相关性考察 | 第41-43页 |
| 第三部分 高产菌株的诱变及筛选 | 第43-46页 |
| ·亚硝基胍诱变 | 第43页 |
| ·紫外诱变 | 第43-44页 |
| ·紫外和NTG复合处理 | 第44页 |
| ·紫外加氯化锂做连续诱变 | 第44-46页 |
| 第四部分 培养基的优化 | 第46-50页 |
| ·碳源对产酶的影响 | 第46页 |
| ·含氮化合物对产酶的影响 | 第46-47页 |
| ·金属离子对产酶的影响 | 第47页 |
| ·碳源、氮源的最佳浓度 | 第47-48页 |
| ·培养基的起始pH对产酶的影响 | 第48-49页 |
| ·磷酸盐对产酶的影响 | 第49-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 致谢 | 第55页 |