小鼠胚胎Sry基因的RNA干涉研究
| 1 引言 | 第1-23页 |
| ·Sry调控机制的研究进展 | 第8-16页 |
| ·Sry基因的发现 | 第8-9页 |
| ·Sry基因的结构、定位 | 第9-11页 |
| ·Sry作用与功能 | 第11页 |
| ·Sry的表达 | 第11页 |
| ·Sry调节性腺分化机制 | 第11-12页 |
| ·Sry上游调控因子 | 第12-13页 |
| ·Sry下游基因 | 第13-14页 |
| ·各因子相互作用及关系 | 第14-16页 |
| ·RNA干涉研究进展 | 第16-22页 |
| ·RNA干涉的发现 | 第16-17页 |
| ·RNA干涉的作用机制 | 第17页 |
| ·RNA干涉的特征 | 第17-18页 |
| ·siRNA制备方法 | 第18-20页 |
| ·RNA干涉在哺乳动物中的应用 | 第20-21页 |
| ·siRNA导入哺乳动物体内的策略 | 第21-22页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 2 实验材料和方法 | 第23-33页 |
| ·实验材料 | 第23-25页 |
| ·实验动物 | 第23页 |
| ·菌株及载体 | 第23页 |
| ·主要仪器设备 | 第23-24页 |
| ·工具酶与主要试剂 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-33页 |
| ·构建siRNA干涉载体 | 第25-28页 |
| ·尾静脉注射法导入siRNA 表达质粒 | 第28页 |
| ·质粒注射条件的确定 | 第28-29页 |
| ·胚胎的性别鉴定 | 第29-31页 |
| ·RT-PCR 半定量 Sry 基因的表达量 | 第31-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-39页 |
| ·重组 shRNA 表达载体的鉴定 | 第33-34页 |
| ·PCR 鉴定胚胎性别 | 第34-35页 |
| ·胚胎基因组 DNA 的提取 | 第34-35页 |
| ·双重 PCR 鉴定胚胎性别 | 第35页 |
| ·不同条件下 Sry 基因的沉默作用 | 第35-39页 |
| ·靶序列的选择性 | 第36-37页 |
| ·Sry 基因沉默作用时间依赖性 | 第37-38页 |
| ·siRNA 注射剂量依赖性 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| ·siRNA 的获取方法 | 第39-40页 |
| ·siRNA 导入胚胎的途径 | 第40页 |
| ·Sry 基因表达量测定方法 | 第40页 |
| ·影响 Sry 沉默效果的因素 | 第40-41页 |
| 5 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 作者简介 | 第49页 |
