摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
第一章 绪论 | 第7-23页 |
·引言 | 第7页 |
·非病毒载体 | 第7-21页 |
·裸DNA | 第9-10页 |
·脂质体 | 第10-12页 |
·高分子载体 | 第12-21页 |
·天然高分子载体及其衍生物 | 第12-14页 |
·合成高分子载体 | 第14-21页 |
·聚乙烯基亚胺 | 第14-17页 |
·多肽类 | 第17页 |
·树状高分子载体 | 第17-18页 |
·温敏性高分子载体 | 第18-21页 |
·光敏性载体 | 第21页 |
·其他高分子载体 | 第21页 |
·论文工作的提出 | 第21-23页 |
第二章 温度敏感聚异丙基丙烯酰胺-聚精氨酸生物缀合物的制备及其与DNA形成复合物的研究 | 第23-40页 |
·引言 | 第23页 |
·实验部分 | 第23-26页 |
·实验药品 | 第23-24页 |
·聚异丙基丙烯酰胺-聚-L-精氨酸生物缀合物的制备和表征 | 第24-25页 |
·聚异丙基丙烯酰胺-聚-L-精氨酸生物缀合物的制备 | 第24页 |
·PNIPArg的表征 | 第24-25页 |
·复合物的表征 | 第25-26页 |
·透射电镜(TEM) | 第25页 |
·圆二色谱(CD) | 第25页 |
·变温紫外测试 | 第25-26页 |
·复合物电泳 | 第26页 |
·复合物的稳定性 | 第26页 |
·结果与讨论 | 第26-38页 |
·PNIPArg的物化性质 | 第26-29页 |
·红外光谱分析 | 第26-27页 |
·核磁共振分析 | 第27-28页 |
·PNIPArg溶液的LCST | 第28-29页 |
·复合物的表征和温敏性的分析 | 第29-38页 |
·透射电镜 | 第29-31页 |
·圆二色谱分析 | 第31-35页 |
·变温紫外分析 | 第35-36页 |
·复合物电泳 | 第36-38页 |
·酶解分析 | 第38页 |
·结论 | 第38-40页 |
第三章 温度敏感PNIPArg载体介导的基因转染研究 | 第40-61页 |
·引言 | 第40页 |
·实验部分 | 第40-48页 |
·试剂耗材 | 第40-41页 |
·实验仪器 | 第41-42页 |
·菌体的培养与质粒的提取纯化 | 第42-43页 |
·试剂配制 | 第42页 |
·实验操作 | 第42-43页 |
·C2C12 细胞的培养 | 第43-45页 |
·培养用液的制备 | 第43-44页 |
·细胞培养的基本操作 | 第44-45页 |
·MTT比色法 | 第45-46页 |
·实验原理 | 第45页 |
·操作 | 第45-46页 |
·体外转染实验 | 第46页 |
·复合物的形成 | 第46页 |
·细胞转染 | 第46页 |
·荧光素酶(Luciferase)活性的测定 | 第46-47页 |
·BCA法测总蛋白 | 第47页 |
·原理 | 第47页 |
·材料和仪器 | 第47页 |
·操作步骤 | 第47页 |
·绿色荧光蛋白活性的测定 | 第47-48页 |
·荧光显微镜观察转染细胞 | 第47-48页 |
·流式细胞仪测定转染效率 | 第48页 |
·结果与讨论 | 第48-60页 |
·MTT测定载体的细胞毒性 | 第48-51页 |
·载体的转染效率 | 第51-60页 |
·荧光素酶活性的测定 | 第51-53页 |
·荧光显微镜观察细胞的转染 | 第53-58页 |
·流式细胞仪测定转染效率 | 第58-60页 |
·结论 | 第60-61页 |
全文结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-68页 |
攻读硕士学位期间完成的学术论文 | 第68-69页 |
致谢 | 第69页 |