大麦HvPrp1基因的克隆和表达模式分析
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-16页 |
| ·Prp1蛋白在剪接体中作用 | 第9-10页 |
| ·Prp1蛋白简介 | 第10-12页 |
| ·Prp1蛋白在酵母中的作用 | 第10-11页 |
| ·Prp1蛋白在植物中的作用 | 第11-12页 |
| ·实时荧光定量PCR技术 | 第12-15页 |
| ·实时荧光定量PCR原理 | 第12-13页 |
| ·实时荧光定量PCR技术种类 | 第13-14页 |
| ·SYBR Green Ⅰ荧光染料 | 第13页 |
| ·TaqMan探针 | 第13-14页 |
| ·实时荧光定量PCR定量方法 | 第14-15页 |
| ·绝对定量 | 第14页 |
| ·相对定量 | 第14-15页 |
| ·立题依据 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-25页 |
| ·实验材料 | 第16页 |
| ·植物材料和种植 | 第16页 |
| ·实验试剂 | 第16页 |
| ·实验仪器 | 第16页 |
| ·引物合成 | 第16页 |
| ·实验方法 | 第16-25页 |
| ·植物材料 | 第16-17页 |
| ·冷处理大麦幼苗 | 第16-17页 |
| ·大麦发育期种子收集 | 第17页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第17页 |
| ·植物组织总RNA的提取 | 第17页 |
| ·RNA质量检测 | 第17-18页 |
| ·RNA变性琼脂糖凝胶电泳 | 第17页 |
| ·分光光度计检测 | 第17-18页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第18页 |
| ·引物设计和目的片段扩增 | 第18-19页 |
| ·PCR产物的胶回收 | 第19页 |
| ·目的基因的连接 | 第19页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第19-20页 |
| ·转化步骤 | 第20页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第20页 |
| ·序列测定 | 第20页 |
| ·基因组步移 | 第20-22页 |
| ·序列生物信息学分析 | 第22页 |
| ·荧光定量 | 第22-24页 |
| ·相对标准样品的制备 | 第22-23页 |
| ·质粒提取 | 第23页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第23-24页 |
| ·荧光定量PCR分析 | 第24页 |
| ·Prp1基因表达谱芯片数据的收集 | 第24-25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-38页 |
| ·HvPrp1序列分析 | 第25-26页 |
| ·聚类分析 | 第26-27页 |
| ·荧光定量 | 第27-32页 |
| ·总RNA的提取 | 第27-28页 |
| ·荧光定量PCR引物的特异性检测 | 第28-29页 |
| ·相对标准品质粒的鉴定结果及标准曲线的建立 | 第29-31页 |
| ·HvPrp1基因的表达分析 | 第31-32页 |
| ·其他物种的Prp1基因启动子预测 | 第32-34页 |
| ·Prp1基因表达谱芯片的收集和分析 | 第34-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| ·大麦HvPrp1蛋白的功能 | 第38-39页 |
| ·植物Prp1基因的表达模式 | 第39页 |
| ·大麦HvPrp1基因的研究展望 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-46页 |
| 致谢 | 第46页 |
