| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-17页 |
| 第一部分 文献综述 | 第17-41页 |
| ·巴西橡胶树及其生物技术简介 | 第17-18页 |
| ·巴西橡胶树组织培养研究进展 | 第18-24页 |
| ·花药培养 | 第18-21页 |
| ·花药培养的技术流程 | 第18-19页 |
| ·制约花药再生体系建立的因素 | 第19-20页 |
| ·花药植株的起源 | 第20页 |
| ·花药植株的特性 | 第20-21页 |
| ·内珠被培养 | 第21页 |
| ·内珠被来源的胚性愈伤继代培养 | 第21页 |
| ·内珠被来源的胚性愈伤组织超低温保存 | 第21页 |
| ·未授粉胚珠培养 | 第21-22页 |
| ·子房培养 | 第22页 |
| ·茎尖培养 | 第22页 |
| ·花药植株微繁及籽苗芽接 | 第22页 |
| ·次生胚诱导培养 | 第22-23页 |
| ·悬浮细胞培养 | 第23页 |
| ·原生质体培养 | 第23-24页 |
| ·植物游离小孢子培养研究进展 | 第24-31页 |
| ·游离小孢子培养的意义 | 第24-25页 |
| ·影响游离小孢子培养的因素 | 第25-30页 |
| ·材料预处理 | 第25-26页 |
| ·小孢子预处理 | 第26-27页 |
| ·供体基因型 | 第27-28页 |
| ·小孢子培养密度 | 第28-29页 |
| ·培养基pH值 | 第29页 |
| ·培养基成分 | 第29-30页 |
| ·植物游离小孢子培养研究概况 | 第30-31页 |
| ·植物乳管研究进展 | 第31-39页 |
| ·乳管的类型及其发育 | 第31-32页 |
| ·乳管的功能 | 第32-34页 |
| ·巴西橡胶树乳管细胞的构成及胶乳的成分 | 第34-36页 |
| ·巴西橡胶树乳管细胞的构成 | 第34-36页 |
| ·巴西橡胶树胶乳的成分 | 第36页 |
| ·巴西橡胶树乳管分化研究进展 | 第36-37页 |
| ·乳管细胞在组织培养物中的分化 | 第37-39页 |
| ·本课题的研究目的和意义 | 第39-41页 |
| 第二部分 巴西橡胶树花药愈伤形态发生、组织学及其生理生化的研究 | 第41-62页 |
| ·材料与方法 | 第41-47页 |
| ·材料 | 第41-42页 |
| ·材料处理 | 第42页 |
| ·花药愈伤组织脱分化生长过程的形态学观察 | 第42页 |
| ·花药愈伤组织学研究 | 第42-43页 |
| ·试剂的配制 | 第42-43页 |
| ·石蜡制片 | 第43页 |
| ·不同类型愈伤的发生频率 | 第43-44页 |
| ·不同类型愈伤的分化力比较 | 第44页 |
| ·花药愈伤组织的生理生化研究 | 第44-47页 |
| ·可溶性糖和淀粉的测定 | 第44-45页 |
| ·可溶性蛋白的测定 | 第45页 |
| ·叶绿素和类胡萝卜素含量的测定 | 第45页 |
| ·愈伤组织过氧化氢酶(CAT)的测定 | 第45-46页 |
| ·愈伤组织超氧化物歧化酶(SOD)的测定 | 第46-47页 |
| ·结果与分析 | 第47-60页 |
| ·花药愈伤的形态类型 | 第47-49页 |
| ·三种类型花药愈伤的细胞学差异 | 第49页 |
| ·不同品种各种类型愈伤的发生频率及其与体胚发生的相关性 | 第49-50页 |
| ·三种类型花药愈伤分化力的比较 | 第50-52页 |
| ·三种类型愈伤生理生化的比较 | 第52-56页 |
| ·三种类型愈伤组织可溶性糖和淀粉含量的比较 | 第52-53页 |
| ·三种类型愈伤组织蛋白质含量的比较 | 第53-54页 |
| ·三种类型愈伤组织叶绿素和类胡萝卜素的比较 | 第54-56页 |
| ·品种间胚性愈伤组织的生理生化比较 | 第56-60页 |
| ·品种间胚性愈伤组织的可溶性糖和淀粉含量的比较及其与体胚发生相关性的分析 | 第56-57页 |
| ·品种间胚性愈伤组织的蛋白质含量比较及其与体胚发生相关性的分析 | 第57-58页 |
| ·品种间过氧化物酶含量的比较及与体胚发生相关性的分析 | 第58-60页 |
| ·讨论 | 第60-61页 |
| ·结论 | 第61-62页 |
| 第三部分 巴西橡胶树花药体胚发育及其培养条件的改良 | 第62-73页 |
| ·材料与方法 | 第63-64页 |
| ·材料 | 第63页 |
| ·外植体的消毒 | 第63页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第63页 |
| ·体胚诱导 | 第63页 |
| ·植株诱导 | 第63-64页 |
| ·结果与分析 | 第64-71页 |
| ·花药胚性愈伤组织体胚发育过程及其类型 | 第64-68页 |
| ·花药胚性愈伤不同类型体胚的发生频率 | 第68页 |
| ·不同胚状体培养条件对植株再生率的影响 | 第68-71页 |
| ·稀土对花药体胚发生的影响 | 第71页 |
| ·讨论 | 第71-72页 |
| ·结论 | 第72-73页 |
| 第四部分 巴西橡胶树游离小孢子培养初步研究 | 第73-88页 |
| ·材料与方法 | 第73-77页 |
| ·材料 | 第73-74页 |
| ·方法 | 第74-77页 |
| ·培养基及试剂的配制 | 第74页 |
| ·雄花预处理的效果 | 第74-75页 |
| ·橡胶树游离小孢子的提取纯化 | 第75页 |
| ·预处理对小孢子分化的影响 | 第75页 |
| ·诱导培养基组分对小孢子分化的影响 | 第75-76页 |
| ·不同橡胶树品种对小孢子分化的影响 | 第76页 |
| ·游离小孢子的电激转化 | 第76-77页 |
| ·结果与分析 | 第77-84页 |
| ·雄花预处理的效果对橡胶树小孢子分化的影响 | 第77页 |
| ·游离小孢子提取方法的比较 | 第77-79页 |
| ·不同预处理对橡胶树小孢子分化的影响 | 第79-80页 |
| ·诱导培养基的组分对小孢子分化的影响 | 第80-81页 |
| ·游离小孢子分化过程 | 第81-82页 |
| ·不同品种的小孢子培养效果 | 第82页 |
| ·游离小孢子瞬时表达 | 第82-84页 |
| ·讨论 | 第84-86页 |
| ·花药低温预处理对小孢子分化的影响 | 第84页 |
| ·游离小孢子的预处理对小孢子分化的影响 | 第84-85页 |
| ·碳源对小孢子培养的影响 | 第85页 |
| ·基因型对小孢子培养的影响 | 第85页 |
| ·培养基pH值对小孢子培养的影响 | 第85-86页 |
| ·林木游离小孢子培养的困难性 | 第86页 |
| ·以游离小孢子为受体构建橡胶树遗传转化的可能性 | 第86页 |
| ·结论 | 第86-88页 |
| 第五部分 胚胎发生基因转化橡胶树的研究 | 第88-97页 |
| ·材料与方法 | 第88-90页 |
| ·材料的采集与处理 | 第88-89页 |
| ·BBM基因的克隆与植物表达载体的构建 | 第89页 |
| ·表达载体导入农杆菌和菌液的制备 | 第89页 |
| ·卡那霉素选择压的影响 | 第89页 |
| ·共培养温度的影响 | 第89-90页 |
| ·不同培养时间的外植体对转化效率的影响 | 第90页 |
| ·抗性愈伤的检测 | 第90页 |
| ·抗性胚状体的诱导 | 第90页 |
| ·转基因胚状体检测 | 第90页 |
| ·结果与分析 | 第90-95页 |
| ·BBM基因克隆和表达载体的构建 | 第90-91页 |
| ·卡那霉素选择压的影响 | 第91-92页 |
| ·共培养温度的效果 | 第92页 |
| ·不同培养时间的外植体对转化效率的影响 | 第92-93页 |
| ·抗性愈伤的检测 | 第93页 |
| ·抗性愈伤诱导转基因胚状体 | 第93-95页 |
| ·讨论 | 第95-96页 |
| ·结论 | 第96-97页 |
| 第六部分 橡胶树花药愈伤乳管细胞的分化及其与体胚发生的关系 | 第97-117页 |
| ·材料与方法 | 第98-102页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第98-99页 |
| ·材料 | 第98页 |
| ·材料的处理 | 第98-99页 |
| ·溴-碘组织化学染色 | 第99页 |
| ·试验的配制 | 第99页 |
| ·材料的固定 | 第99页 |
| ·溴-碘染色和制片 | 第99页 |
| ·石蜡制片的免疫组织学定位 | 第99-101页 |
| ·试剂的配制 | 第99-100页 |
| ·材料的处理 | 第100页 |
| ·试验步骤 | 第100-101页 |
| ·新鲜切片免疫组织学定位 | 第101-102页 |
| ·溶液的配制 | 第101页 |
| ·实验步骤 | 第101-102页 |
| ·不同基因型的花药愈伤组织的诱导 | 第102页 |
| ·不同基因型的体胚发生率 | 第102页 |
| ·不同基因型的愈伤组织中乳管细胞发生率的比较 | 第102页 |
| ·结果与分析 | 第102-113页 |
| ·组织化学法定位愈伤乳管细胞 | 第102-106页 |
| ·石蜡制片免疫组织化学法定位花药愈伤乳管细胞 | 第106-107页 |
| ·新鲜组织制片免疫组织化学法定位花药愈伤乳管细胞 | 第107-111页 |
| ·愈伤组织中的乳管细胞分化依赖于橡胶树的基因型 | 第111-113页 |
| ·讨论 | 第113-116页 |
| ·关于植物乳管的鉴定方法 | 第113-114页 |
| ·关于橡胶树花药愈伤乳管细胞与花药体胚发生的关系 | 第114-115页 |
| ·关于橡胶树花药愈伤组织作为生物反应器的可能性 | 第115页 |
| ·关于利用橡胶树花药愈伤组织作为一种研究乳管分化机制的模式的可能性 | 第115-116页 |
| ·结论 | 第116-117页 |
| 参考文献 | 第117-137页 |
| 博士期间发表的论文及申请的专利 | 第137-138页 |
| 博士期间主持的课题 | 第138-139页 |
| 缩略词表 | 第139-140页 |
| 致谢 | 第140页 |
