| 第一章 绪论 | 第1页 |
| 第一章 引言 | 第10-21页 |
| ·国内外研究现状 | 第10-20页 |
| ·抗原表位的研究 | 第10-12页 |
| ·识别抗原表位的方法 | 第12-14页 |
| ·噬菌体展示技术 | 第14-16页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征概述 | 第16-17页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原表位的研究现状 | 第17-20页 |
| ·研究内容和方法 | 第20页 |
| ·研究目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 研究报告 | 第21-48页 |
| 试验一 利用噬菌体展示随机肽库鉴定猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原表位 | 第21-30页 |
| 1 材料和方法 | 第21-25页 |
| ·肽库、菌株与单克隆抗体 | 第21-22页 |
| ·单抗的纯化 | 第22页 |
| ·肽库的生物淘选 | 第22-24页 |
| ·第一轮淘选 | 第22页 |
| ·噬菌体的扩增 | 第22-23页 |
| ·噬菌体的滴定 | 第23-24页 |
| ·噬菌体的第2、3轮淘选 | 第24页 |
| ·测序模板的制备 | 第24页 |
| ·DNA序列测定 | 第24页 |
| ·噬菌体夹心ELISA | 第24-25页 |
| ·竞争抑制试验 | 第25页 |
| 2 结果 | 第25-27页 |
| ·淘选的产率 | 第25页 |
| ·序列测定结果 | 第25-26页 |
| ·噬菌体ELISA | 第26-27页 |
| ·竞争抑制试验 | 第27页 |
| 3 讨论 | 第27-30页 |
| ·获得模拟表位的原因 | 第27-28页 |
| ·影响噬菌体特异性的因素 | 第28-30页 |
| 试验二 猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7基因特异性噬菌体展示肽库的构建及抗原表位的鉴定 | 第30-48页 |
| 1 材料与方法 | 第30-37页 |
| ·毒株、菌株、噬菌粒、单克隆抗体与辅助噬菌体 | 第30-31页 |
| ·PRRSV ORF7基因小片段的制备 | 第31-32页 |
| ·PRRSV ORF7基因的获得 | 第31页 |
| ·PRRSV ORF7基因随机小片段的制备 | 第31-32页 |
| ·噬菌粒载体的制备 | 第32页 |
| ·重组噬菌粒的制备 | 第32页 |
| ·高效感受态细胞的制备 | 第32-33页 |
| ·噬菌体随机肽库构建 | 第33-34页 |
| ·基因特异性肽库质量的测定 | 第34-35页 |
| ·基因特异性肽库容量的测定 | 第34页 |
| ·基因特异性肽库随机性的测定 | 第34-35页 |
| ·基因特异性肽库的淘选 | 第35页 |
| ·噬菌体单克隆的制备 | 第35页 |
| ·噬菌体ELISA | 第35页 |
| ·噬菌体阳性克隆的测序 | 第35页 |
| ·表位蛋白的抗原性印证 | 第35-37页 |
| ·天然表位与模拟表位的竞争抑制试验 | 第37页 |
| 2 结果 | 第37-42页 |
| ·PRRSV ORF7基因随机片段及噬菌粒载体 | 第37-38页 |
| ·基因特异性肽库的容量 | 第38页 |
| ·基因特异性肽库随机性的测定 | 第38-39页 |
| ·噬菌体的ELISA反应 | 第39页 |
| ·表位的序列 | 第39页 |
| ·表位原核表达产物的ELISA及Western blot反应 | 第39-41页 |
| ·天然表位对模拟表位的竞争抑制 | 第41-42页 |
| 3 讨论 | 第42-48页 |
| ·表位Ep703与其它分离株相当区域的表位进行比较 | 第42-45页 |
| ·模拟表位与天然表位 | 第45页 |
| ·随机肽库与基因特异性肽库 | 第45-46页 |
| ·影响基因特异性肽库容量的因素 | 第46页 |
| ·噬菌体载体与噬菌粒载体 | 第46-47页 |
| ·单克隆抗体与多克隆抗体 | 第47-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者简历 | 第57页 |
