摘要(中文) | 第1-5页 |
摘要(英文) | 第5-6页 |
引言 | 第6-8页 |
1 材料与方法 | 第8-15页 |
·供试昆虫 | 第8页 |
·供试菌种与载体 | 第8页 |
·供试试剂 | 第8页 |
·供试仪器 | 第8-9页 |
·乙酰胆碱酯酶的分离纯化及特性分析 | 第9-11页 |
·乙酰胆碱酯酶的提取 | 第9页 |
·(NH_4)_2SO_4分级沉淀 | 第9页 |
·乙酰胆碱酯酶的Sephadex G-200柱层析分离 | 第9页 |
·乙酰胆碱酯酶的CEA亲和层析分离 | 第9-10页 |
·蛋白质含量的测定 | 第10页 |
·乙酰胆碱酯酶活性测定 | 第10页 |
·SDS-PAGE测定乙酰胆碱酯酶的分子量 | 第10页 |
·不同温度对AChE活性的影响 | 第10页 |
·不同pH值对AChE活性的影响 | 第10-11页 |
·不同底物浓度对AChE活性的影响 | 第11页 |
·黄曲条跳甲乙酰胆碱酯酶cDNA片断的克隆和序列分析 | 第11-15页 |
·总RNA提取 | 第11页 |
·第一链cDNA合成 | 第11-12页 |
·PCR扩增反应 | 第12-13页 |
·质粒连接 | 第13页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第13页 |
·转化 | 第13页 |
·质粒DNA提取 | 第13-14页 |
·重组克隆的酶切鉴定 | 第14页 |
·序列测定与序列分析 | 第14-15页 |
2 结果与分析 | 第15-23页 |
·乙酰胆碱酯酶的分离纯化及特性分析 | 第15-19页 |
·纯化方法的比较 | 第15页 |
·乙酰胆碱酯酶的CEA亲和层析分离 | 第15-16页 |
·SDS-PAGE测定乙酰胆碱酯酶的分子量 | 第16-17页 |
·乙酰胆碱酯酶的特性分析 | 第17-19页 |
·不同温度对AChE活性的影响 | 第17页 |
·不同pH值对AChE活性的影响 | 第17-18页 |
·不同ATChI底物浓度对AChE活性的影响 | 第18-19页 |
·黄曲条跳甲乙酰胆碱酯酶cDNA片断的克隆和序列分析 | 第19-23页 |
·总RNA提取 | 第19页 |
·乙酰胆碱酯酶基因cDNA片断的克隆 | 第19-20页 |
·序列比较分析 | 第20-23页 |
3 讨论与小结 | 第23-25页 |
参考文献 | 第25-28页 |
附录1: 文献综述 | 第28-40页 |
附录2: 缩写词和英汉对照 | 第40-42页 |
致谢 | 第42页 |