苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis）几丁质酶基因的克隆、表达及其工程菌的构建
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-8页 |
| 前言 | 第8-28页 |
| 1 苏云金芽孢杆菌 | 第8-12页 |
| ·研究历史 | 第8页 |
| ·血清学分类 | 第8-9页 |
| ·作用机制和范围 | 第9-11页 |
| ·工业化生产 | 第11-12页 |
| 2 几丁质 | 第12-14页 |
| 3 几丁质酶 | 第14-24页 |
| ·研究历史 | 第14页 |
| ·微生物几丁质酶 | 第14-24页 |
| 4 微生物几丁质酶生物防治应用的生物学研究 | 第24-27页 |
| ·几丁质酶的杀虫增效作用 | 第24-26页 |
| ·几丁质酶防治真菌病害研究 | 第26页 |
| ·几丁质酶在医学上的应用 | 第26-27页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
| 几丁质酶基因的克隆和表达 | 第28-48页 |
| 1 材料与方法 | 第28-39页 |
| ·菌株 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28页 |
| ·总DNA的提取 | 第28页 |
| ·总DNA的定性定量 | 第28-29页 |
| ·PCR扩增 | 第29-32页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳分析 | 第32-33页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第33页 |
| ·克隆载体构建 | 第33-34页 |
| ·转化和筛选 | 第34页 |
| ·碱裂解法提取E. coli质粒 | 第34-35页 |
| ·克隆重组质粒酶切分析 | 第35页 |
| ·测序 | 第35页 |
| ·从琼脂糖凝胶中回收核酸 | 第35-36页 |
| ·chi7基因原核表达载体构建 | 第36-37页 |
| ·表达重组质粒的酶切分析 | 第37-38页 |
| ·原核表达的检测 | 第38-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-46页 |
| ·菌株产几丁质酶测定 | 第39页 |
| ·WB-7几丁质酶基因的PCR扩增 | 第39-40页 |
| ·几丁质酶基因的克隆 | 第40页 |
| ·序列测定 | 第40-41页 |
| ·核酸同源性分析 | 第41-42页 |
| ·推导出的蛋白质结构功能分析 | 第42-44页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第44-45页 |
| ·原核表达的几丁质酶活性检测 | 第45-46页 |
| 3 讨论 | 第46-48页 |
| ·Bt是一个独立的种? | 第46页 |
| ·原核表达的菌株选择 | 第46-47页 |
| ·几丁质酶活性的检测方法 | 第47页 |
| ·下一步工作 | 第47-48页 |
| 枯草芽孢杆菌工程菌构建 | 第48-55页 |
| 1 材料与方法 | 第48-52页 |
| ·菌株 | 第48页 |
| ·培养基 | 第48页 |
| ·总DNA的提取 | 第48页 |
| ·总DNA的定性定量 | 第48页 |
| ·碱裂解法提取Bs质粒 | 第48页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳分析 | 第48页 |
| ·Bs表达载体构建 | 第48-50页 |
| ·从琼脂糖凝胶中回收核酸 | 第50页 |
| ·电激感受态的制备 | 第50页 |
| ·电激 | 第50-51页 |
| ·转化和筛选 | 第51页 |
| ·表达重组质粒的酶切分析 | 第51页 |
| ·PCR验证 | 第51-52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-54页 |
| ·重组质粒pUS-chi7鉴定 | 第52页 |
| ·重组质粒导入目的菌株的鉴定 | 第52-54页 |
| 3 讨论 | 第54-55页 |
| ·pUS186质粒载体的改造 | 第54页 |
| ·下一步工作 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 发表论文 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
