| 摘 要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 1 前 言 | 第6-7页 |
| 2 材料与方法 | 第7-21页 |
| ·材 料 | 第7-8页 |
| ·病毒株、菌种、细胞和载体 | 第7页 |
| ·各种酶类和生物试剂 | 第7页 |
| ·引物设计 | 第7-8页 |
| ·实验动物 | 第8页 |
| ·方 法 | 第8-21页 |
| ·口蹄疫病毒OH/99株全基因组的克隆 | 第8-14页 |
| ·病毒总RNA的提取 | 第8页 |
| ·反转录 | 第8-9页 |
| ·PCR 扩增 | 第9-10页 |
| ·PCR 产物的纯化与回收 | 第10-11页 |
| ·PCR 产物与pGEM-T Easy载体的克隆 | 第11-12页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第12页 |
| ·感受态细胞的转化 | 第12-13页 |
| ·挑斑 | 第13页 |
| ·重组质粒的提取 | 第13页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第13-14页 |
| ·口蹄疫病毒OH/99株全长cDNA的构建 | 第14-18页 |
| ·5′半长cDNA的构建 | 第14-17页 |
| ·全长重组质粒的构建 14 2.2.3 体外转录模板的制备 | 第17-18页 |
| ·体钋转录模板的制备 | 第18-19页 |
| ·FMDV全长PCR | 第18-19页 |
| ·FMDV 全长 PCR 产物的线化 | 第19页 |
| ·体外转录本的制备 | 第19-20页 |
| ·RNA 转录本的纯化及鉴定 | 第20页 |
| ·FMDV基因组RNA 转染BHK-21细胞 | 第20页 |
| ·全长cDNA感染性的鉴定 | 第20-21页 |
| ·BHK-21 细胞的病变效应 | 第20-21页 |
| ·动物实验 | 第21页 |
| ·基因工程毒的RT-PCR | 第21页 |
| ·电镜观察病毒粒子 | 第21页 |
| 3 结 果 | 第21-27页 |
| ·口蹄疫病毒OH/99株全基因组的克隆 | 第21-22页 |
| ·口蹄疫病毒OH/99株全长cDNA的分子克隆 | 第22页 |
| ·体外模板的制备 | 第22-23页 |
| ·体外转录 | 第23页 |
| ·全长 cDNA 感染性的鉴定 | 第23-27页 |
| 4 讨 论 | 第27-29页 |
| 结 论 | 第29-30页 |
| 文 献 综 述 | 第30-43页 |
| 参 考 文 献 | 第43-47页 |
| 附 录 | 第47-55页 |
| 致 谢 | 第55页 |