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基因枪轰击法获得转P5CS基因黑麦草植株

第一章 引言第1-23页
 1 草坪草育种的发展概况第9-18页
   ·我国草坪草育种发展概况第9-11页
   ·草坪草的组织再生体系第11-15页
     ·植株再生体系的建立第11-15页
   ·转化体系第15-18页
     ·硅碳纤维介导的直接基因转化第15页
     ·电击融合法和PEG介导的DNA直接转移导入原生质体第15-16页
     ·基因枪法介导的直接基因转化第16页
     ·农杆菌介导的转化法第16-18页
 2 选择标记基因与启动子第18页
 3 抗非生物胁迫第18-20页
 4 存在问题与展望第20-21页
 5 本研究的目的和意义第21-23页
第二章 黑麦草组培再生体系第23-30页
 1 黑麦草成熟胚为外植体的组培体系第23-27页
   ·材料与方法第23页
     ·植物材料第23页
     ·外植体消毒及愈伤组织诱导第23页
     ·愈伤组织的分化及植株再生第23页
   ·结果与分析第23-26页
     ·愈伤诱导率与浸种时间和不同培养基的关系第23-25页
     ·不同激素比对胚性愈伤组织分化的影响第25页
     ·再生植株的生根和移栽第25-26页
   ·讨论第26-27页
     ·种子浸泡时间与对愈伤形成的影响第26页
     ·胚乳对诱导愈伤的影响第26页
     ·体细胞胚的发生第26-27页
     ·激素对分化影响第27页
 2 黑麦草幼穗为外植体的组织培养体系第27-30页
   ·材料与方法第27页
     ·植株材料第27页
     ·外植体的消毒及愈伤组织诱导第27页
     ·愈伤组织的分化及植株再生第27页
   ·结果与分析第27-28页
     ·愈伤质量、诱导率、分化率及植株再生第27-28页
   ·讨论第28-30页
     ·取材时间与愈伤发生部位第28页
     ·同属不同种在相同或相似培养基的表现第28页
     ·器官发生途径第28页
     ·白化苗与2,4-D浓度的关系第28-29页
     ·激素对愈伤继代和分化能力保持的影响第29-30页
第三章 基因枪轰击法获得转P5CS基因的黑麦草植株第30-46页
 1 材料第30-31页
   ·受体材料第30页
   ·转化所用的重组质粒第30页
   ·试剂第30页
   ·培养基的名称及配方第30-31页
     ·成熟胚的培养基名称及配方第30-31页
     ·幼穗的培养基名称及配方第31页
   ·仪器设备第31页
 2 实验方法第31-40页
   ·黑麦草愈伤组织对选择剂Glufosinate的抗性的测定第31页
   ·黑麦草基因枪法转化第31-35页
     ·受体准备第31页
     ·貭粒的提取和纯化第31-33页
     ·基因枪法共转化第33-35页
   ·转化体筛选和植株再生第35页
     ·成熟胚为外植体的转化体筛选和植株再生第35页
     ·幼穗为外植体的转化体筛选和植株再生第35页
   ·PCR及PCR-Southern检测第35-40页
     ·PCR检测第35-37页
     ·PCR-Southern杂交检测第37-40页
 3 结果与分析第40-44页
   ·愈伤组织对除草剂的敏感性测定第40页
   ·基因枪转化后的抗性筛选及抗性愈伤组织分化苗第40-42页
     ·以成熟胚为外植体的抗性筛选及抗性愈伤组织分化苗第40-42页
     ·以幼穗为外植体的抗性筛选及抗性愈伤组织分化苗第42页
   ·转基因植株的PCR和PCR-Southern检测第42-44页
     ·以成熟胚为外植体的转基因植株的PCR和PCR-Southern检测第42-43页
     ·以幼穗为外植体的转基因植株的PCR检测第43-44页
 4 讨论第44-46页
   ·提高遗传转化的途径第44-45页
   ·共转化第45-46页
第四章 结论第46-47页
 1 建立了多年生黑麦草两种外植体的再生体系第46页
 2 初步建立了多年黑麦草的遗传转化体系第46-47页
致谢第47-48页
参考文献第48-56页
作者简介第56页

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