第一章 引言 | 第1-23页 |
1 草坪草育种的发展概况 | 第9-18页 |
·我国草坪草育种发展概况 | 第9-11页 |
·草坪草的组织再生体系 | 第11-15页 |
·植株再生体系的建立 | 第11-15页 |
·转化体系 | 第15-18页 |
·硅碳纤维介导的直接基因转化 | 第15页 |
·电击融合法和PEG介导的DNA直接转移导入原生质体 | 第15-16页 |
·基因枪法介导的直接基因转化 | 第16页 |
·农杆菌介导的转化法 | 第16-18页 |
2 选择标记基因与启动子 | 第18页 |
3 抗非生物胁迫 | 第18-20页 |
4 存在问题与展望 | 第20-21页 |
5 本研究的目的和意义 | 第21-23页 |
第二章 黑麦草组培再生体系 | 第23-30页 |
1 黑麦草成熟胚为外植体的组培体系 | 第23-27页 |
·材料与方法 | 第23页 |
·植物材料 | 第23页 |
·外植体消毒及愈伤组织诱导 | 第23页 |
·愈伤组织的分化及植株再生 | 第23页 |
·结果与分析 | 第23-26页 |
·愈伤诱导率与浸种时间和不同培养基的关系 | 第23-25页 |
·不同激素比对胚性愈伤组织分化的影响 | 第25页 |
·再生植株的生根和移栽 | 第25-26页 |
·讨论 | 第26-27页 |
·种子浸泡时间与对愈伤形成的影响 | 第26页 |
·胚乳对诱导愈伤的影响 | 第26页 |
·体细胞胚的发生 | 第26-27页 |
·激素对分化影响 | 第27页 |
2 黑麦草幼穗为外植体的组织培养体系 | 第27-30页 |
·材料与方法 | 第27页 |
·植株材料 | 第27页 |
·外植体的消毒及愈伤组织诱导 | 第27页 |
·愈伤组织的分化及植株再生 | 第27页 |
·结果与分析 | 第27-28页 |
·愈伤质量、诱导率、分化率及植株再生 | 第27-28页 |
·讨论 | 第28-30页 |
·取材时间与愈伤发生部位 | 第28页 |
·同属不同种在相同或相似培养基的表现 | 第28页 |
·器官发生途径 | 第28页 |
·白化苗与2,4-D浓度的关系 | 第28-29页 |
·激素对愈伤继代和分化能力保持的影响 | 第29-30页 |
第三章 基因枪轰击法获得转P5CS基因的黑麦草植株 | 第30-46页 |
1 材料 | 第30-31页 |
·受体材料 | 第30页 |
·转化所用的重组质粒 | 第30页 |
·试剂 | 第30页 |
·培养基的名称及配方 | 第30-31页 |
·成熟胚的培养基名称及配方 | 第30-31页 |
·幼穗的培养基名称及配方 | 第31页 |
·仪器设备 | 第31页 |
2 实验方法 | 第31-40页 |
·黑麦草愈伤组织对选择剂Glufosinate的抗性的测定 | 第31页 |
·黑麦草基因枪法转化 | 第31-35页 |
·受体准备 | 第31页 |
·貭粒的提取和纯化 | 第31-33页 |
·基因枪法共转化 | 第33-35页 |
·转化体筛选和植株再生 | 第35页 |
·成熟胚为外植体的转化体筛选和植株再生 | 第35页 |
·幼穗为外植体的转化体筛选和植株再生 | 第35页 |
·PCR及PCR-Southern检测 | 第35-40页 |
·PCR检测 | 第35-37页 |
·PCR-Southern杂交检测 | 第37-40页 |
3 结果与分析 | 第40-44页 |
·愈伤组织对除草剂的敏感性测定 | 第40页 |
·基因枪转化后的抗性筛选及抗性愈伤组织分化苗 | 第40-42页 |
·以成熟胚为外植体的抗性筛选及抗性愈伤组织分化苗 | 第40-42页 |
·以幼穗为外植体的抗性筛选及抗性愈伤组织分化苗 | 第42页 |
·转基因植株的PCR和PCR-Southern检测 | 第42-44页 |
·以成熟胚为外植体的转基因植株的PCR和PCR-Southern检测 | 第42-43页 |
·以幼穗为外植体的转基因植株的PCR检测 | 第43-44页 |
4 讨论 | 第44-46页 |
·提高遗传转化的途径 | 第44-45页 |
·共转化 | 第45-46页 |
第四章 结论 | 第46-47页 |
1 建立了多年生黑麦草两种外植体的再生体系 | 第46页 |
2 初步建立了多年黑麦草的遗传转化体系 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-56页 |
作者简介 | 第56页 |