| 1、前言 | 第1-18页 |
| ·概述 | 第6-8页 |
| ·硒的分布及存在状态 | 第6-7页 |
| ·谷胱甘肽的性质、分布与合成 | 第7-8页 |
| ·硒及谷胱甘肽在生物体内的功能 | 第8-11页 |
| ·硒和谷胱甘肽的抗氧化功能 | 第8-10页 |
| ·硒的其他重要生物学功能 | 第10-11页 |
| ·谷胱甘肽的其他重要生物学功能 | 第11页 |
| ·酵母富集硒及生成谷胱甘肽的研究 | 第11-15页 |
| ·富硒酵母的研究 | 第11-13页 |
| ·酵母中谷胱甘肽的作用 | 第13-15页 |
| ·论文的立题依据及主要研究内容 | 第15-18页 |
| ·高生物量富硒酵母的选育和培养条件初步优化 | 第15-16页 |
| ·GSH-I基因的克隆及其在酿酒酵母中的表达 | 第16-18页 |
| 2、材料与方法 | 第18-33页 |
| ·材料 | 第18-23页 |
| ·菌种与质粒 | 第18页 |
| ·培养基 | 第18-20页 |
| ·缓冲液与试剂 | 第20-22页 |
| ·主要仪器和设备 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-33页 |
| ·酵母菌亚硒酸钠抗性实验 | 第23页 |
| ·生物量的测定 | 第23页 |
| ·硒含量的测定 | 第23页 |
| ·硒总含量的计算 | 第23-24页 |
| ·酵母菌生孢及单倍体分离 | 第24页 |
| ·单倍体诱变 | 第24页 |
| ·突变株营养缺陷型的鉴定 | 第24页 |
| ·酵母菌原生质体融合 | 第24-26页 |
| ·培养条件初步优化 | 第26-27页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR)引物的设计与合成 | 第27页 |
| ·引物的稀释 | 第27页 |
| ·酵母总DNA提取 | 第27-28页 |
| ·DNA浓度的测定 | 第28页 |
| ·PCR扩增基因GSH-I | 第28页 |
| ·PCR产物的回收 | 第28-29页 |
| ·低熔点胶回收酶切片段 | 第29页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第29-30页 |
| ·质粒或PCR产物的限制性酶切 | 第30页 |
| ·连接反应 | 第30页 |
| ·大肠杆菌感受态制备、转化及重组转化子的筛选 | 第30-31页 |
| ·酵母菌完整细胞转化法 | 第31页 |
| ·酵母菌质粒提取方法 | 第31页 |
| ·重组转化子的稳定性检验 | 第31-32页 |
| ·酵母细胞GSH含量的分析 | 第32-33页 |
| 3、结果与讨论 | 第33-57页 |
| ·高生物量富硒酵母的选育及培养条件的初步优化 | 第33-45页 |
| ·高生物量和高硒含量抗硒酵母菌株的初筛、复筛 | 第33页 |
| ·高生物量富硒酵母菌的选育 | 第33-38页 |
| ·融合子ZFF-28的发酵条件优化 | 第38-45页 |
| ·融合子ZFF-28在优化培养条件下细胞无机硒含量分析 | 第45页 |
| ·GSH-I基因的克隆及其在酿酒酵母中的表达 | 第45-57页 |
| ·PCR引物设计 | 第45-46页 |
| ·引物的稀释 | 第46页 |
| ·部分酿酒酵母谷胱甘肽(GSH)含量的测定 | 第46-47页 |
| ·DNA浓度的测定 | 第47页 |
| ·PCR扩增γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶基因GSH-I | 第47-48页 |
| ·重组质粒pGF-2的构建 | 第48-49页 |
| ·GSH-I基因在单倍体酿酒酵母YS58中的表达 | 第49-50页 |
| ·部分啤酒酵母铜抗性测定结果 | 第50-51页 |
| ·重组质粒pGMF的构建 | 第51-53页 |
| ·重组质粒pGMF转化单倍体酿酒酵母YS58 | 第53页 |
| ·重组质粒pGMF在酿酒酵母中的表达 | 第53-55页 |
| ·转化子的稳定性 | 第55-57页 |
| 4、小结 | 第57-59页 |
| ·高生物量富硒酵母的菌种选育和培养条件的初步优化 | 第57页 |
| ·GSH-I基因的克隆及其在酿酒酵母中表达 | 第57-59页 |
| 5、展望 | 第59-60页 |
| ·高生物量富硒酵母的菌种选育和培养条件的初步优化 | 第59页 |
| ·GSH-I基因的克隆及其在酿酒酵母中的表达 | 第59-60页 |
| 6、参考文献 | 第60-65页 |
| 7、致谢 | 第65-66页 |
| 8、研究生期间发表论文情况 | 第66页 |