| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 缩略语 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-22页 |
| ·疟疾及其疫苗研究进展 | 第14-17页 |
| ·疟疾 | 第14-15页 |
| ·现阶段疟疾疫苗研究进展 | 第15-17页 |
| ·恶性疟原虫裂殖子表面蛋白 1（MSP1）综述 | 第17页 |
| ·Bac-to-Bac 系统 | 第17-20页 |
| ·家蚕杆状病毒表面展示系统综述 | 第20-22页 |
| 第二章 实验方案设计 | 第22-25页 |
| ·研究的目的及意义 | 第22-23页 |
| ·研究内容 | 第23-24页 |
| ·实验流程图 | 第24-25页 |
| 第三章 生物信息学分析 | 第25-29页 |
| ·生物信息学工具 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-27页 |
| ·MSP1_(19c)的基因序列与氨基酸序列 | 第25-26页 |
| ·MSP1_(19c)蛋白信号肽预测 | 第26页 |
| ·MSP1_(19c)蛋白跨膜区预测 | 第26-27页 |
| ·MSP1_(19C)蛋白的二级结构预测 | 第27页 |
| ·结果与讨论 | 第27-29页 |
| 第四章 供体质粒 pFastBac 1-gp64-MSP1_(19c)的构建 | 第29-40页 |
| ·材料与试剂 | 第29-31页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·试剂 | 第29-31页 |
| ·方法 | 第31-36页 |
| ·MSP1_(19C)基因的扩增 | 第31-33页 |
| ·碱裂解法提取 pFastBac1-gp64 载体质粒 | 第33页 |
| ·MSP1_(19C)基因片段与 pFastBac1-gp64 载体的双酶切 | 第33-34页 |
| ·连接反应 | 第34页 |
| ·E. coli TG1 感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第34-35页 |
| ·连接产物的转化 | 第35页 |
| ·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第35-36页 |
| ·结果 | 第36-38页 |
| ·MSP1_(19c)基因的扩增 | 第36页 |
| ·pFastBac1-gp64- MSP1_(19C)重组质粒的鉴定 | 第36-37页 |
| ·测序结果分析 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第五章 重组病毒 BmNPV-gp64-MSP1_(19c)的筛选与鉴定 | 第40-51页 |
| ·材料与试剂 | 第40-42页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·主要试剂配制 | 第40-42页 |
| ·方法 | 第42-47页 |
| ·E. coli DH10Bac 感受态细胞的制备 | 第42页 |
| ·重组质粒转化 E. coli DH10Bac 菌株 | 第42-43页 |
| ·挑取单克隆 | 第43页 |
| ·重组 Bacmid 的小量制备 | 第43页 |
| ·重组 Bacmid PCR 鉴定 | 第43-45页 |
| ·细胞冻存 | 第45页 |
| ·细胞复苏 | 第45页 |
| ·重组 Bacmid-gp64-MSP1_(19c)转染家蚕 BmN 细胞 | 第45-46页 |
| ·病毒扩增 | 第46页 |
| ·重组 Bacmid-gp64-MSP1_(19C)在 BmN 细胞中的 PCR 鉴定 | 第46-47页 |
| ·结果与讨论 | 第47-49页 |
| ·重组 Bacmid-gp64-MSP1_(19C)的 PCR 鉴定 | 第47-48页 |
| ·重组 Bacmid-gp64-MSP1_(19C)转染家蚕 BmN 细胞 | 第48页 |
| ·细胞中重组病毒 DNA 的 PCR 鉴定结果 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 第六章 MSP1_(19c)蛋白在蚕蛹中的表达检测 | 第51-60页 |
| ·材料与试剂 | 第51-53页 |
| ·材料 | 第51页 |
| ·试剂 | 第51页 |
| ·试剂的配制 | 第51-53页 |
| ·方法 | 第53-56页 |
| ·重组病毒接种蚕蛹 | 第53页 |
| ·发病蚕蛹中重组病毒基因 PCR 鉴定 | 第53-55页 |
| ·免疫印记法检测 MSP1_(19C)蛋白在蚕蛹中的表达 | 第55-56页 |
| ·结果 | 第56-58页 |
| ·蚕蛹中病毒基因组 PCR 检测 | 第56-57页 |
| ·MSP1_(19C)蛋白在蚕蛹中的免疫印记检测 | 第57-58页 |
| ·分析 | 第58-60页 |
| 第七章 蚕蛹中病毒粒子的纯化及其免疫原性研究 | 第60-71页 |
| ·试剂与材料 | 第60-62页 |
| ·试剂与材料 | 第60页 |
| ·试剂配制 | 第60-62页 |
| ·方法 | 第62-67页 |
| ·蚕蛹中病毒的粒子纯化 | 第62-64页 |
| ·纯化后病毒粒子免疫新西兰雄兔 | 第64-65页 |
| ·多克隆抗体血清的获得 | 第65页 |
| ·ProteinA 抗体纯化柱纯化所得抗体 | 第65-66页 |
| ·间接 ELISA 法测定抗体效价 | 第66-67页 |
| ·结果 | 第67-69页 |
| ·Western Blotting 分析纯化流程中 MSP1_(19C)蛋白 | 第67页 |
| ·双向电泳分析结果 | 第67-68页 |
| ·抗体纯化结果 | 第68-69页 |
| ·抗体效价测定 | 第69页 |
| ·讨论 | 第69-71页 |
| 结论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
