| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 文献综述 | 第12-28页 |
| 第一章 转基因动物乳腺生物反应器的研究进展 | 第12-28页 |
| 1 表达载体的构建 | 第13-15页 |
| ·乳清酸蛋白基因调控序列 | 第13页 |
| ·酪蛋白基因调控序列 | 第13-15页 |
| ·β-乳球蛋白基因调控序列 | 第15页 |
| 2 影响外源基因表达效率的因素及提高措施 | 第15-22页 |
| ·位置效应 | 第16-17页 |
| ·内含子对转基因动物基因表达效率的影响 | 第17-18页 |
| ·基质结合区影响转基因动物基因表达 | 第18-19页 |
| ·真核mRNA5′和3′非翻译区对基因表达的影响 | 第19页 |
| ·外源基因结构的影响 | 第19-20页 |
| ·酵母人工染色体技术(YAC) | 第20-21页 |
| ·同源重组技术(基因打靶) | 第21-22页 |
| 3 小结与展望 | 第22页 |
| 参考文献 | 第22-28页 |
| 实验研究 | 第28-62页 |
| 第二章 牛β-乳球蛋白基因5′调控成分的分离、克隆及序列分析 | 第28-40页 |
| 1 材料与方法 | 第28-34页 |
| ·实验动物 | 第28页 |
| ·质粒和菌种 | 第28-29页 |
| ·试剂和仪器 | 第29-30页 |
| ·奶牛基因组DNA的提取 | 第30-31页 |
| ·特异性引物设计 | 第31页 |
| ·PCR扩增 | 第31页 |
| ·琼脂糖电泳 | 第31页 |
| ·目的片段的克隆、鉴定和序列分析 | 第31-34页 |
| 2 结果 | 第34-37页 |
| ·牛基因组DNA的完整性 | 第34页 |
| ·PCR扩增结果 | 第34-35页 |
| ·重组质粒酶切鉴定结果 | 第35页 |
| ·序列分析结果 | 第35-37页 |
| 3 讨论 | 第37页 |
| 4 结论 | 第37页 |
| 参考文献 | 第37-40页 |
| 第三章 人乳铁蛋白基因cDNA克隆与序列分析的研究 | 第40-50页 |
| 1 材料和方法 | 第41-43页 |
| ·组织来源 | 第41页 |
| ·质粒和菌种 | 第41页 |
| ·试剂和仪器 | 第41页 |
| ·总RNA的提取 | 第41-42页 |
| ·RNA的甲醛凝胶变性电泳 | 第42页 |
| ·特异性引物设计 | 第42页 |
| ·RT-PCR反应 | 第42-43页 |
| ·PCR产物的琼脂糖凝胶电泳、克隆 | 第43页 |
| ·阳性克隆的鉴定及序列测定 | 第43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-47页 |
| ·人乳腺癌组织总RNA的完整性 | 第43-44页 |
| ·人乳铁蛋白基因cDNA的扩增 | 第44页 |
| ·重组质粒酶切鉴定 | 第44-45页 |
| ·人乳铁蛋白基因cDNA核苷酸序列分析结果 | 第45-47页 |
| 3 讨论 | 第47页 |
| 4 结论 | 第47页 |
| 参考文献 | 第47-50页 |
| 第四章 人乳铁蛋白基因表达载体的构建及细胞表达的研究 | 第50-62页 |
| 1 材料和方法 | 第50-56页 |
| ·细胞来源 | 第50页 |
| ·质粒和菌种 | 第50-51页 |
| ·试剂和仪器 | 第51页 |
| ·特异性引物设计 | 第51页 |
| ·牛β-乳球蛋白基因5′调控成分的点突变 | 第51-52页 |
| ·重组PCR连接牛β-乳球蛋白基因5′调控成分与人乳铁蛋白基因 | 第52-54页 |
| ·人乳铁蛋白基因表达载体的构建 | 第54页 |
| ·人乳铁蛋白的细胞表达 | 第54-56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-58页 |
| ·牛β-乳球蛋白基因5′调控成分的点突变 | 第56-57页 |
| ·重组PCR连接MBLG片段与LTF片段 | 第57-58页 |
| ·人乳铁蛋白基因表达载体的构建 | 第58页 |
| ·人乳铁蛋白的细胞表达 | 第58页 |
| 3 讨论 | 第58-60页 |
| 4 结论 | 第60页 |
| 参考文献 | 第60-62页 |
| 个人简历 | 第62-63页 |
| 附录 | 第63-71页 |
