摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-14页 |
前言 | 第14-21页 |
植物药物蛋白的药用价值与开发前景 | 第14-19页 |
植物药物蛋白的治疗作用与疗效 | 第14-16页 |
超氧化物歧化酶 | 第14-15页 |
凝集素和毒蛋白 | 第15-16页 |
蛋白酶抑制因子 | 第16页 |
植物药物蛋白的产品设计与深加工 | 第16-19页 |
专一杀伤癌细胞的免疫毒素 | 第16-17页 |
多疗效抗过氧化治疗剂 | 第17页 |
广谱高效抑菌驱虫药 | 第17-18页 |
癌症自我检查与血型速测药盒 | 第18页 |
非手术胰腺炎化疗剂 | 第18页 |
无激素类副作用的避孕药 | 第18-19页 |
安全的中期妊娠引产剂 | 第19页 |
促免疫活化和抗衰老护肤用品 | 第19页 |
有效治疗皮肤病的药物 | 第19页 |
植物药物蛋白的开发策略 | 第19-21页 |
第一部分 大蒜SOD高效诱导与协同调控 | 第21-94页 |
概论 | 第22-38页 |
SOD的生化性质与药用价值 | 第22-24页 |
SOD研究与开发的意义和策略 | 第24-27页 |
SOD的基因工程与基因治疗 | 第24-26页 |
SOD的修饰改性与剂型设计 | 第26-27页 |
SOD的非肽模拟 | 第27页 |
植物SOD基因表达及其调控的研究现状 | 第27-32页 |
基因的组织结构、起源与进化 | 第28-29页 |
时空特异表达及其调控 | 第29-30页 |
氧化应激诱导表达及其调控 | 第30-32页 |
物理应激—光、温、水 | 第30-31页 |
化学应激—气、化 | 第31-32页 |
生理应激—病、老 | 第32页 |
植物细胞信号传导机理的研究进展 | 第32-35页 |
立题背景与研究内容 | 第35-38页 |
材料与方法 | 第38-44页 |
植物材料 | 第38页 |
药品与试剂 | 第38-39页 |
仪器设备 | 第39页 |
实验方法 | 第39-43页 |
大蒜细胞培养 | 第39页 |
固体培养 | 第39页 |
悬浮培养 | 第39页 |
氧化应激诱导 | 第39-40页 |
物理应激处理 | 第39-40页 |
化学应激处理 | 第40页 |
蛋白质含量测定 | 第40页 |
染液配制 | 第40页 |
蛋白质浓度标准曲线绘制 | 第40页 |
样品中蛋白质含量测定 | 第40页 |
SOD活力测定 | 第40-41页 |
醇液透析 | 第40-41页 |
样品中SOD活力测定 | 第41页 |
SOD类型鉴别 | 第41-42页 |
KCN专一性抑制Cu/ZnSOD的测定 | 第41页 |
氯仿-乙醇对FeSOD和MnSOD抑制的测定 | 第41-42页 |
CAT活力测定 | 第42页 |
CAT浓度标准曲线绘制 | 第42页 |
CAT诱导、离体抑制及其活力测定 | 第42页 |
POD活力测定 | 第42-43页 |
H_2O_2浓度水平测定 | 第43页 |
数据分析 | 第43-44页 |
结果 | 第44-87页 |
物理应激对大蒜培养细胞SOD的诱导 | 第44-60页 |
冷胁迫对培养细胞SOD的诱导 | 第44-50页 |
光照冷胁迫对SOD的诱导及其蛋白质合成动态 | 第44-46页 |
淹水、光照冷胁迫对SOD的诱导及其蛋白质合成动态 | 第46-47页 |
变温冷胁迫对SOD的诱导及其蛋白质合成动态 | 第47-49页 |
冷胁迫细胞恢复正常培养温度后SOD活力的变化 | 第49-50页 |
热休克对培养细胞SOD的诱导 | 第50-56页 |
光照对SOD热休克诱导及其蛋白质合成的影响 | 第50-52页 |
淹水与光照对SOD热休克诱导及其蛋白质合成的影响 | 第52-53页 |
间隙热休克对SOD诱导及其蛋白质合成的影响 | 第53-55页 |
热休克细胞处于正常培养温度下SOD活力的变化 | 第55-56页 |
KCN对物理应激诱导SOD活力的影响 | 第56-58页 |
冷胁迫诱导SOD对KCN的敏感性 | 第56-57页 |
热休克诱导SOD对KCN的敏感性 | 第57-58页 |
小结 | 第58-60页 |
化学应激对大蒜培养细胞SOD的诱导 | 第60-75页 |
化学诱导剂对培养细胞SOD诱导的动力学 | 第60-65页 |
水杨酸浓度及处理时间与SOD活力的关系 | 第60-62页 |
亚硫酸钠浓度与SOD活力的关系 | 第62-63页 |
甲基紫精浓度与SOD活力的关系 | 第63页 |
甲基萘醌浓度与SOD活力的关系 | 第63-64页 |
亚甲基蓝浓度与SOD活力的关系 | 第64-65页 |
化学诱导剂对离体SOD活力及其测定体系的影响 | 第65-69页 |
水杨酸对无细胞抽提液SOD活力的影响 | 第65-66页 |
水杨酸对肾上腺素自氧化的影响 | 第66页 |
亚硫酸钠对肾上腺素自氧化的影响 | 第66-67页 |
甲基紫精对肾上腺素自氧化的影响 | 第67-68页 |
甲基萘醌对肾上腺素自氧化的影响 | 第68页 |
亚甲基蓝对肾上腺素自氧化的影响 | 第68-69页 |
水杨酸对物理应激反应的累加效应 | 第69-70页 |
水杨酸与冷胁迫的互作 | 第69页 |
水杨酸与热休克的互作 | 第69-70页 |
水杨酸诱导SOD同工酶的分类 | 第70-71页 |
水杨酸对蛋白质合成动态的影响 | 第71-73页 |
水杨酸浓度与蛋白质合成的关系 | 第71-72页 |
水杨酸处理时间与蛋白质合成的关系 | 第72-73页 |
小结 | 第73-75页 |
氧化应激早期应答信号及其传导 | 第75-82页 |
氧化应激对胞外H_2O_2水平的影响 | 第75页 |
氧化应激时胞外POD活力的早期变化 | 第75-76页 |
氧化应激时胞内外POD活力的比较 | 第76-77页 |
冷胁迫过程中胞内外POD活力的消长 | 第76-77页 |
水杨酸处理时胞内外POD活力的消长 | 第77页 |
H_2O_2水平对胞外POD活力的影响 | 第77-79页 |
甲基紫精作用下胞外POD活力的变化 | 第77-78页 |
硫脲作用下胞外POD活力的变化 | 第78-79页 |
H_2O_2水平对胞内CAT活力的影响 | 第79-81页 |
水杨酸处理对离体CAT活力的影响 | 第79-80页 |
半胱氨酸处理时胞内CAT活力的变化 | 第80-81页 |
小结 | 第81-82页 |
氧化应激信号模拟与抗氧化酶的诱导调控 | 第82-87页 |
外源H_2O_2对SOD与POD活力的诱导 | 第82-83页 |
H_2O_2诱导的胞内外POD活力的变化 | 第82页 |
H_2O_2诱导的胞内SOD活力的变化 | 第82-83页 |
谷胱甘肽在SOD诱导调控中的作用 | 第83-85页 |
GSSG对SOD活力的影响 | 第83-84页 |
GSSG/GSH对SOD活力的影响 | 第84-85页 |
辅酶Ⅱ在SOD诱导调控中的作用 | 第85-86页 |
NADP对SOD活力的影响 | 第85-86页 |
G6P对SOD活力的影响 | 第86页 |
小结 | 第86-87页 |
讨论 | 第87-94页 |
多因一效:氧化应激引发H_2O_2的持续生成 | 第87-90页 |
胞外H_2O_2水平骤升是细胞氧化应激的共同特征 | 第87-88页 |
胞外POD活力剧增是细胞氧化应激的敏感标志 | 第88-89页 |
CAT可能是胞外氧化应激强度“感受器”与胞内H_2O_2水平“调节器” | 第89-90页 |
一因多效:H_2O_2介导抗氧化酶的协同合成 | 第90-94页 |
各种氧化应激因素的诱导模式既基本相同又有差异 | 第90-91页 |
外源H_2O_2可模拟细胞对氧化应激的应答 | 第91-92页 |
磷酸化/脱磷酸化循环构成了氧化应激信号传导通路的基本轮廓 | 第92-94页 |
第二部分 野生稻TI基因体外重组与异源表达 | 第94-126页 |
概论 | 第95-100页 |
TI基因的分子克隆与表达 | 第96-97页 |
转基因抗虫植物培育与生物检测 | 第96页 |
TI基因在微生物细胞中的表达 | 第96-97页 |
TI基因的分子进化及其超基因家族 | 第97页 |
植物TI的药用价值与开发前景 | 第97-98页 |
立题背景与研究内容 | 第98-100页 |
材料与方法 | 第100-106页 |
菌种和质粒 | 第100页 |
药品和试剂 | 第100页 |
主要仪器设备 | 第100页 |
实验方法 | 第100-104页 |
质粒提取与纯化 | 第100-101页 |
DNA序列分析 | 第101-102页 |
限制酶消化、酶切片段回收与连接 | 第102页 |
感受态细胞制备及转化 | 第102-103页 |
重组质粒鉴定 | 第103页 |
基因诱导表达 | 第103页 |
SDS-PAGE分析 | 第103页 |
表达产物的TI活力测定 | 第103-104页 |
数据分析 | 第104-106页 |
结果与讨论 | 第106-126页 |
野生稻TI基因的DNA序列分析与分子进化距离估计 | 第106-120页 |
TI基因全序列测定 | 第106-107页 |
TI的氨基酸序列同源性展示 | 第107-112页 |
野生稻与栽培稻TI及其它植物TI的同源分析 | 第107-108页 |
野生稻TI与其它植物蛋白质的同源分析 | 第108-111页 |
植物与动物及人TI的同源分析 | 第111-112页 |
植物TI基因的分子进化参数 | 第112-115页 |
氨基酸变异率(Var值)分析 | 第112-113页 |
核苷酸替换率(Knuc值)分析 | 第113-114页 |
分子进化树的构建 | 第114-115页 |
种子贮藏蛋白同源家族及其分类系统 | 第115-120页 |
种子贮藏蛋白同源家族 | 第115-116页 |
种子贮藏蛋白的进化距离 | 第116-117页 |
种子贮藏蛋白的系统分类 | 第117-120页 |
重组基因表达载体构建与活性融合多肽诱导合成 | 第120-125页 |
TI基因的亚克隆与重组克隆的鉴定 | 第120-122页 |
重组克隆的初步筛选 | 第121页 |
重组质粒的双酶切 | 第121-122页 |
工程菌的表达与检测 | 第122-125页 |
融合多肽的SDS-PAGE图谱 | 第122-124页 |
表达产物的TI活力 | 第124-125页 |
小结 | 第125-126页 |
总结与展望 | 第126-130页 |
参考文献 | 第130-138页 |
附录 | 第138-142页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第138-140页 |
攻读学位期间参加的国内外学术会议 | 第140页 |
课外科技活动获奖论文简介 | 第140-142页 |
缩略词 | 第142-146页 |
致谢 | 第146-147页 |