致谢 | 第1-4页 |
摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-36页 |
1 根系发育生物学研究进展 | 第11-19页 |
·生长素调控不定根发生发育的分子机理 | 第11-15页 |
·不定根发生过程中的特异表达基因 | 第15-16页 |
·林木插穗生根机理研究 | 第16-19页 |
2 林木分子生物学研究进展 | 第19-27页 |
·杨树全基因组测序计划 | 第19-22页 |
·林木分子生物学资源 | 第22-23页 |
·林木典型生长发育现象的分子基础 | 第23-25页 |
·次生生长与应力材的形成 | 第23-24页 |
·林木开花调控机制与季节性休眠 | 第24-25页 |
·转基因林木改良特性 | 第25页 |
·林木遗传基因组学和关联基因组学 | 第25-27页 |
3 基因芯片技术及其应用 | 第27-33页 |
·基因芯片概述 | 第27-29页 |
·基因芯片在林木生物学研究中的应用 | 第29-30页 |
·Affymetrix 基因芯片技术 | 第30-32页 |
·寡聚核苷酸原位光刻技术 | 第30-31页 |
·独特的PM-MM 探针设计 | 第31-32页 |
·严格的质控标准 | 第32页 |
·杨树全基因组芯片 | 第32-33页 |
4 本研究的立题依据及技术路线 | 第33-36页 |
·立题依据 | 第33-34页 |
·南林895 杨背景介绍 | 第34页 |
·本研究的技术路线 | 第34-36页 |
第二章 杨树不定根发育的全基因组芯片检测和质控评估 | 第36-50页 |
1 研究材料 | 第37页 |
2 实验方法 | 第37-44页 |
·插穗生根水培试验 | 第37-38页 |
·总RNA 提取与纯化 | 第38-39页 |
·基因芯片杂交实验 | 第39-44页 |
·芯片杂交实验质控分析 | 第44页 |
3 结果与讨论 | 第44-49页 |
·芯片实验设计 | 第44-45页 |
·插穗生根材料总RNA 提取 | 第45-46页 |
·杨树全基因组芯片的质控评估 | 第46-47页 |
·生物学重复样本相关性分析 | 第47-48页 |
·插穗不定根发育芯片实验的取样策略 | 第48-49页 |
4 小结 | 第49-50页 |
第三章 杨树全基因组芯片数据分析 | 第50-69页 |
1 研究材料 | 第51页 |
2 实验方法 | 第51-55页 |
·基因表达谱数据分析 | 第51-52页 |
·芯片结果实时定量RT-PCR验证 | 第52-55页 |
3 结果与分析 | 第55-67页 |
·基因芯片数据的预处理和归一化 | 第55-56页 |
·显著差异表达基因筛选 | 第56-58页 |
·杨树全基因组芯片结果的验证 | 第58-61页 |
·内对照基因的确定 | 第58-59页 |
·基因芯片结果的实时定量RT-PCR 验证 | 第59-61页 |
·差异表达基因的功能注释 | 第61-67页 |
·GO 功能分类 | 第64-65页 |
·KEGG 代谢通路分析 | 第65-66页 |
·显著差异表达基因染色体定位 | 第66-67页 |
4 小结 | 第67-69页 |
第四章 杨树不定根发育差异表达基因功能分析 | 第69-105页 |
1 生长素信号传导相关基因 | 第70-79页 |
2 泛素降解途径相关基因 | 第79-85页 |
3 与小RNA产生及其功能发生相关基因 | 第85-88页 |
4 转录因子 | 第88-100页 |
·SCR与SHR转录因子 | 第88-91页 |
·NAC转录因子 | 第91-93页 |
·MYB转录因子 | 第93-97页 |
·WRKY转录因子 | 第97-100页 |
5 其他根系发育相关基因 | 第100-105页 |
·LBD基因 | 第100-101页 |
·RHD基因 | 第101-102页 |
·LRP1基因 | 第102-103页 |
·ALF基因 | 第103页 |
·CLV基因 | 第103-104页 |
·STM基因 | 第104-105页 |
第五章 杨树不定根发育相关基因的克隆、表达载体构建及其遗传转化 | 第105-139页 |
1 研究材料 | 第105页 |
2 实验方法 | 第105-116页 |
·不定根发生发育相关基因的克隆 | 第105-111页 |
·相关基因的同源克隆 | 第105-108页 |
·相关基因的RACE 克隆 | 第108-110页 |
·启动子克隆 | 第110-111页 |
·克隆基因的表达分析 | 第111页 |
·植物表达载体构建 | 第111-114页 |
·TOPO PCR 反应 | 第111-112页 |
·pENTR/D-TOPO Cloning (BP reaction) | 第112-113页 |
·Gateway 目的载体准备 | 第113页 |
·LR 反应(LR reaction) | 第113-114页 |
·遗传转化 | 第114-116页 |
·农杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第114页 |
·花器官浸泡法转化拟南芥 | 第114-115页 |
·叶盘法转化南林895杨 | 第115-116页 |
·茎段法转化杂种山杨T89 | 第116页 |
3 结果与分析 | 第116-138页 |
·克隆基因的序列分析及功能预测 | 第117-132页 |
·Aux/IAA 基因功能分析 | 第118-123页 |
·杨树 Aux/IAA 基因的克隆与序列分析 | 第118-121页 |
·PeAux/IAA 基因在插穗生根中的表达分析 | 第121-122页 |
·PeAux/IAA2 基因启动子序列分析 | 第122-123页 |
·ABP1 基因克隆与功能分析 | 第123-126页 |
·RHD3 基因克隆与功能分析 | 第126-129页 |
·杨树AGO 基因克隆与功能分析 | 第129-130页 |
·PeNAC1 基因克隆与功能分析 | 第130-132页 |
·表达载体构建及其遗传转化 | 第132-135页 |
·BP 反应阳性克隆检测 | 第133-134页 |
·LR 反应阳性重组子检测 | 第134-135页 |
·转基因植株的初步检测与表型观察 | 第135-138页 |
·转基因植株的PCR 检测 | 第135页 |
·转基因植株的表型观察 | 第135-138页 |
4 小结 | 第138-139页 |
第六章 杨树不定根发育的eQTLs 分析 | 第139-151页 |
1 研究材料 | 第139页 |
2 实验方法 | 第139-140页 |
·遗传图谱构建与QTL定位 | 第139-140页 |
·生根性状eQTLs分析 | 第140页 |
3 结果与分析 | 第140-150页 |
·生根性状QTLs定位 | 第140-144页 |
·生根性状eQTLs表达谱分析 | 第144-148页 |
·显著差异表达eQTLs筛选 | 第144-145页 |
·生根数(TNR)性状eQTLs分析 | 第145-147页 |
·最大根长(MRL)性状eQTLs分析 | 第147-148页 |
·不定根发生eQTLs的遗传分析 | 第148-150页 |
4 小结 | 第150-151页 |
参考文献 | 第151-166页 |
详细摘要 | 第166-169页 |