| 中文摘要 | 第1-17页 |
| 英文摘要 | 第17-21页 |
| 1 前言 | 第21-46页 |
| ·植物耐盐研究进展 | 第21-22页 |
| ·植物的盐胁迫 | 第22-39页 |
| ·盐胁迫对植物的危害 | 第22-25页 |
| ·渗透胁迫 | 第22页 |
| ·离子胁迫 | 第22-24页 |
| ·破坏正常生理代谢 | 第24-25页 |
| ·植物抗盐方式 | 第25-28页 |
| ·植物的避盐 | 第25-27页 |
| ·植物的耐盐 | 第27页 |
| ·盐生植物的分类 | 第27-28页 |
| ·植物盐胁迫适应机制 | 第28-34页 |
| ·维持体内离子和渗透平衡 | 第28-32页 |
| ·胁迫损害控制和修复 | 第32-34页 |
| ·生长调节控制 | 第34页 |
| ·盐胁迫信号途径 | 第34-39页 |
| ·MAPK信号传递途径 | 第35页 |
| ·Ca~(2+)偶联的CDPK 信号途径 | 第35-37页 |
| ·Ca~(2+)偶联的SOS 信号途径 | 第37-39页 |
| ·棉花的耐盐性 | 第39-43页 |
| ·棉花的耐盐机制 | 第40-43页 |
| ·拒盐 | 第40页 |
| ·耐盐性 | 第40-43页 |
| ·棉花耐盐基因及其主要研究进展 | 第43-44页 |
| ·棉花基因克隆的主要途径 | 第43页 |
| ·耐盐基因的研究方法 | 第43-44页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第44-46页 |
| 2 材料与方法 | 第46-72页 |
| ·材料 | 第46-48页 |
| ·植物材料 | 第46页 |
| ·植物材料培养与处理 | 第46页 |
| ·表达载体和菌株 | 第46-47页 |
| ·实验引物 | 第47页 |
| ·其他材料 | 第47-48页 |
| ·实验方法 | 第48-72页 |
| ·RNA 提取 | 第48-49页 |
| ·利用RNeasy Plant Mini Kit 提取总RNA | 第48-49页 |
| ·利用TRIZOL 试剂盒提取RNA | 第49页 |
| ·异硫酸氰胍-酸性酚-LiCl法 | 第49页 |
| ·RNA 纯化 | 第49-50页 |
| ·cDNA 第一条链的合成 | 第50页 |
| ·双链DNA的合成 | 第50-51页 |
| ·蛋白酶K消化dscDNA | 第51页 |
| ·SfiI 消化dscDNA | 第51页 |
| ·双链文库DNA的纯化 | 第51-52页 |
| ·cDNA 与λTriplEx2 载体连接、包装及效价测定 | 第52-53页 |
| ·cDNA 与λTriplEx2 载体连接 | 第52页 |
| ·λTriplEx2-cDNA的包装 | 第52页 |
| ·λTriplEx2-cDNA原始文库的效价测定 | 第52-53页 |
| ·λTriplEx2-cDNA 文库的扩增及效价测定 | 第53-54页 |
| ·λTriplEx2-cDNA 文库的扩增 | 第53-54页 |
| ·λTriplEx2-cDNA 扩增文库的效价测定 | 第54页 |
| ·λTriplEx2-cDNA 的筛选 | 第54-55页 |
| ·λTriplEx2-cDNA 转化pTriplEx2 | 第55页 |
| ·DNA 片段与克隆载体的连接 | 第55-56页 |
| ·大肠杆菌 DH5α感受态的制备 | 第56页 |
| ·大肠杆菌细胞的转化 | 第56页 |
| ·序列测定 | 第56-57页 |
| ·质粒 DNA 的提取 | 第57-58页 |
| ·凝胶电泳中 DNA 片段的回收 | 第58页 |
| ·Northern 杂交 | 第58-60页 |
| ·RNA 提取及电泳 | 第58-59页 |
| ·转膜及烘膜 | 第59-60页 |
| ·探针合成 | 第60页 |
| ·预杂交及杂交 | 第60页 |
| ·Southern 杂交 | 第60-62页 |
| ·基因组 DNA 的提取 | 第60-61页 |
| ·限制性内切酶消化 | 第61页 |
| ·转膜 | 第61页 |
| ·探针合成 | 第61页 |
| ·预杂交及杂交 | 第61-62页 |
| ·植物表达载体的构建与转化 | 第62-64页 |
| ·植物正义表达载体的构建 | 第62页 |
| ·农杆菌感受态细胞制备及转化 | 第62-63页 |
| ·农杆菌的培养 | 第63页 |
| ·农杆菌介导的烟草的转化 | 第63-64页 |
| ·原核表达及蛋白质纯化 | 第64-66页 |
| ·实验试剂配制 | 第64页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第64页 |
| ·E.coli BL21 原核表达的诱导 | 第64-65页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第65-66页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第66页 |
| ·蛋白质结合金属离子能力的测定 | 第66页 |
| ·叶绿素含量的测定 | 第66页 |
| ·过氧化氢含量的测定 | 第66-67页 |
| ·原理 | 第66-67页 |
| ·试剂 | 第67页 |
| ·样品提取和测定 | 第67页 |
| ·超氧化物歧化酶（SOD）活力测定 | 第67-70页 |
| ·原理 | 第67-68页 |
| ·试剂 | 第68-69页 |
| ·操作方法和步骤 | 第69-70页 |
| ·考马斯亮蓝 G-250 法测定蛋白质含量 | 第70-71页 |
| ·原理 | 第70页 |
| ·试剂 | 第70-71页 |
| ·测定与计算 | 第71页 |
| ·融合蛋白表达载体转化洋葱表皮细胞 | 第71页 |
| ·脯氨酰顺反异构酶活性测定 | 第71-72页 |
| 3 结果与分析 | 第72-119页 |
| ·棉花耐盐cDNA文库的构建与筛选鉴定 | 第72-76页 |
| ·棉花总RNA的提取 | 第72页 |
| ·棉花cDNA文库构建及效价测定 | 第72-74页 |
| ·棉花cDNA原始文库构建 | 第72-73页 |
| ·棉花cDNA原始文库效价测 | 第73-74页 |
| ·棉花cDNA重组克隆效率测定 | 第74页 |
| ·棉花cDNA原始文库的扩增与效价测定 | 第74-75页 |
| ·棉花cDNA文库的筛选 | 第75页 |
| ·棉花盐胁迫诱导cDNA文库的筛选结果 | 第75-76页 |
| ·棉花GhMT1和GhMT2的克隆与功能鉴定 | 第76-97页 |
| ·5号克隆GhMT1和17号克隆GhMT2的生物信息学分析 | 第76-80页 |
| ·5号和17号克隆的核苷酸序列与氨基酸序列 | 第76-77页 |
| ·5号和17号克隆的同源性分析 | 第77-79页 |
| ·金属硫蛋白GhMT1和GhMT2跨膜结构的分析 | 第79-80页 |
| ·棉花金属硫蛋白GhMT1及GhMT2的功能分析 | 第80-88页 |
| ·GhMT1内源表达分析 | 第80-88页 |
| ·GhMT1与GhMT2在烟草中超表达及转基因烟草的抗逆性分析 | 第88-94页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第88-90页 |
| ·转基因烟草抗逆性分析 | 第90-94页 |
| ·GhMT1 的原核诱导表达与GhMT1体外结合锌离子能力的测定 | 第94-97页 |
| ·GhMT1基因的原核表达 | 第94-96页 |
| ·GhMT1蛋白的纯化 | 第96页 |
| ·GhMT1蛋白与Zn~(2+)相结合的检测 | 第96-97页 |
| ·棉花GhPPI的克隆与功能初步鉴定 | 第97-112页 |
| ·棉花 GhPPI 的克隆与生物信息学分析 | 第97-101页 |
| ·棉花 GhPPI 的核苷酸序列与氨基酸序列 | 第97-98页 |
| ·氨基酸序列同源性分析 | 第98-99页 |
| ·GhPPI 同源蛋白的聚类分析 | 第99-101页 |
| ·GhPPI 蛋白的等电点分析 | 第101页 |
| ·棉花 GhPPI 蛋白的亚细胞定位 | 第101-103页 |
| ·棉花 GhPPI 克隆编码蛋白的跨膜结构分析 | 第101页 |
| ·棉花 GhPPI 蛋白的亚细胞定位 | 第101-103页 |
| ·棉花 GhPPI 肽酰脯氨酰顺反异构酶活性鉴定 | 第103-106页 |
| ·GhPPI 基因的原核表达 | 第103页 |
| ·棉花 GhPPI 蛋白的纯化 | 第103页 |
| ·棉花 GhPPI 顺反异构酶活性分析 | 第103-105页 |
| ·不同菌株来源的 GhPPI 顺反异构酶活性比较 | 第105-106页 |
| ·棉花 GhPPI 内源表达分析 | 第106页 |
| ·拟南芥中 GhPPI 的同源基因 AtPPI 克隆与功能分析 | 第106-112页 |
| ·拟南芥基因 AtPPI 的克隆 | 第107页 |
| ·AtPPI 基因植物超表达载体与反义表达载体的构建与转化 | 第107-108页 |
| ·植物 RNAi 表达载体的构建与转化 | 第108-111页 |
| ·拟南芥转化与筛选 | 第111页 |
| ·转基因拟南芥的基因组 DNA PCR 鉴定 | 第111页 |
| ·转基因拟南芥 T1 代萌发检测 | 第111-112页 |
| ·棉花GhUVB1的克隆与功能初步分析 | 第112-119页 |
| ·棉花 GhUVB1 的克隆与生物信息学分析 | 第112-115页 |
| ·棉花 GhUVB1 的核苷酸序列与氨基酸序列 | 第112-113页 |
| ·棉花GhUVB1氨基酸序列同源比较分析 | 第113-115页 |
| ·棉花 GhUVB1 蛋白跨膜区预测 | 第115页 |
| ·棉花 GhUVB1 蛋白亚细胞定位 | 第115-116页 |
| ·GhUVB1在拟南芥中超表达分析 | 第116-119页 |
| ·GhUVB1超表达载体的构建 | 第116-117页 |
| ·转基因拟南芥 T0 代的筛选 | 第117页 |
| ·转基因拟南芥 T0 代表型观察 | 第117页 |
| ·转基因拟南芥 T1 代表型观察 | 第117-119页 |
| 4 讨论 | 第119-133页 |
| ·棉花盐胁迫诱导 cDNA 文库的构建与筛选鉴定 | 第119页 |
| ·GhMT1 与 GhMT2 的结构和功能鉴定 | 第119-123页 |
| ·GhMT1 与 GhMT2 的结构和功能 | 第119-121页 |
| ·GhMT1 与 GhMT2 可能信号途径及机制 | 第121-122页 |
| ·GhMT1 及其同源家族的研究展望 | 第122-123页 |
| ·棉花 GhPPI 顺反异构酶结构与功能分析 | 第123-131页 |
| ·肽酰脯氨酰顺反异构酶的分类与功能 | 第123-127页 |
| ·棉花 GhPPI 顺反异构酶的结构和功能 | 第127-131页 |
| ·棉花 GhUVB1 基因功能初步分析 | 第131-133页 |
| 5 结论 | 第133-136页 |
| ·棉花盐胁迫诱导cDNA 文库的构建 | 第133页 |
| ·棉花金属硫蛋白 GhMT1 与 GhMT2 功能鉴定 | 第133-134页 |
| ·棉花 GhPPI 顺反异构酶的功能分析 | 第134-135页 |
| ·棉花 GhUVB1 蛋白定位与基因功能初步分析 | 第135-136页 |
| 参考文献 | 第136-152页 |
| 附录 | 第152-155页 |
| 致谢 | 第155-156页 |
| 入学以来已发表论文及成果 | 第156页 |
