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天然酚类和蛋白质与ONOO~-相互作用的体外研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
前言第8-9页
第一章 文献综述第9-23页
   ·过氧化亚硝基第9-13页
     ·过氧化亚硝基第9-10页
     ·过氧化亚硝基合成途径第10页
     ·过氧化亚硝基的损伤作用第10-13页
     ·RNS/ROS/HOCl生物损伤体系第13页
   ·天然酚类抗氧化剂清除ONOO~-的机理第13-18页
     ·酚类化合物与ONOO~-直接作用的硝化位点取向第14页
     ·酚类化合物清除ONOO~-的作用机理第14-16页
     ·量子化学法研究酚类清除ONOO~-活性-结构关系第16-18页
   ·酚类抗氧化剂第18-20页
     ·咖啡酸类化合物第18-19页
     ·白藜芦醇与虎杖苷第19-20页
   ·重组干扰素第20-22页
     ·干扰素分类以及IFN-α2b结构特点第20-21页
     ·干扰素生物学活性第21-22页
   ·本文主要内容和研究意义第22-23页
第二章 咖啡酸类清除ONOO~-的活性和构效关系第23-36页
   ·材料与方法第23-26页
     ·主要试剂第23页
     ·主要仪器第23-24页
     ·ONOO~-的合成第24页
     ·ONOO~-的鉴定与分析第24页
     ·酪氨酸与ONOO~-的作用第24页
     ·3-硝基酪氨酸标准曲线第24-25页
     ·高效液相法测抗氧化剂清除ONOO~-的活性第25页
     ·IC_(50) 的计算第25页
     ·咖啡酸类与ONOO~-的直接作用第25页
     ·阿魏酸与ONOO~-作用产物的质谱分析第25-26页
     ·统计分析第26页
   ·结果与讨论第26-35页
     ·ONOO~-的紫外光谱特性第26-27页
     ·3-硝基酪氨酸的紫外光谱特性第27-29页
     ·3-硝基酪氨酸的标准曲线第29-30页
     ·咖啡酸类化合物清除ONOO~-的活性第30-31页
     ·咖啡酸类化合物清除ONOO~-的S曲线拟和与IC_(50)值第31-32页
     ·咖啡酸类化合物与ONOO~-作用产物的紫外光谱特性第32-33页
     ·阿魏酸与ONOO~-作用后硝化产物的质谱特性第33-35页
   ·小结第35-36页
第三章 白藜芦醇与虎杖苷清除ONOO~-的活性第36-48页
   ·材料与方法第36-39页
     ·主要试剂第36页
     ·主要仪器第36-37页
     ·ONOO~-的合成第37页
     ·金属离子对ONOO~-的清除作用第37页
     ·有机溶剂对ONOO~-的清除作用第37页
     ·紫外分光法测定tyrosine损伤产物3-NT第37-38页
     ·荧光分光法测定tyrosine损伤产物dityrosine第38页
     ·高效液相法测白藜芦醇/虎杖苷清除ONOO~-的活性第38页
     ·IC_(50) 计算第38-39页
     ·白藜芦醇/虎杖苷与ONOO~-的直接作用第39页
     ·白藜芦醇与ONOO~-作用产物的质谱分析第39页
     ·统计分析第39页
   ·结果与讨论第39-47页
     ·金属离子对ONOO~-损伤tyrosine的影响第39-40页
     ·有机溶剂对ONOO~-损伤tyrosine的影响第40-41页
     ·ONOO~-损伤tyrosine生成3-NT/dityrosine的浓度效应第41-44页
     ·白藜芦醇/虎杖苷清除ONOO~-的活性第44页
     ·白藜芦醇ONOO~-的S曲线拟和与IC_(50)值第44-46页
     ·白藜芦醇/虎杖苷与ONOO~直接作用的紫外光谱特性第46页
     ·白藜芦醇与ONOO~-生成硝化产物的质谱特性第46-47页
   ·小结第47-48页
第四章 人干扰素与ONOO~-作用的氨基酸损伤位点第48-56页
   ·材料与方法第48-50页
     ·主要试剂第48页
     ·实验中所用溶液的配制第48页
     ·主要仪器第48-49页
     ·蛋白样品制备第49页
     ·肽段的色谱分离及质谱检测第49-50页
     ·蛋白肽段的鉴定与分析第50页
   ·结果与讨论第50-55页
     ·ONOO~-损伤蛋白样的HPLC-MS及HPLC-MS/MS图谱第50-52页
     ·ONOO~-引发的IFN损伤的氨基酸位点第52-53页
     ·ONOO~-引发的发生氧化/硝化修饰肽段的分析第53-55页
   ·小结第55-56页
第五章 ONOO~-与白蛋白作用的初步研究第56-63页
   ·材料与方法第56-59页
     ·主要试剂第56页
     ·实验中所用溶液的配制第56-57页
     ·主要仪器第57页
     ·BSA的硝化损伤第57页
     ·非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳与图像分析第57-58页
     ·用Sephadex G75 分离BSA第58-59页
     ·统计分析第59页
   ·结果与讨论第59-62页
     ·ONOO~-引发的BSA硝化损伤第59-60页
     ·BSA的硝化损伤第60页
     ·阿魏酸对ONOO~-引起蛋白硝化的影响第60-62页
   ·小结第62-63页
第六章 结论与展望第63-65页
   ·结论第63-64页
   ·展望第64-65页
参考文献第65-70页
发表论文和参加科研情况说明第70-71页
致谢第71页

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