| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 符号说明 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-35页 |
| 1.干扰素与原发性肝癌的研究 | 第14-21页 |
| ·原发性肝癌的流行病学研究 | 第14页 |
| ·原发性肝癌的治疗方法 | 第14-16页 |
| ·干扰素与原发性肝癌的研究 | 第16-21页 |
| 2.纳米磁载体药物与肿瘤靶向治疗的研究 | 第21-32页 |
| ·干扰素治疗原发性肝癌的局限性 | 第21-22页 |
| ·磁靶向治疗的概念及研究 | 第22-26页 |
| ·纳米磁性载药脂质体微球靶向治疗肿瘤的研究 | 第26-32页 |
| 3.立题依据 | 第32-33页 |
| 4.研究目标与研究内容 | 第33-35页 |
| ·研究目标 | 第33页 |
| ·主要研究内容 | 第33-35页 |
| 第二章 重组人干扰素纳米磁性脂质体的制备和理化性质的研究 | 第35-56页 |
| 1 前言 | 第35-36页 |
| 2 材料和方法 | 第36-43页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·药品和试剂 | 第36页 |
| ·仪器和设备 | 第36-37页 |
| ·方法 | 第37-43页 |
| ·纳米磁性材料—Fe_3O_4的制备 | 第37-38页 |
| ·重组人干扰素纳米磁性脂质体的制备 | 第38-39页 |
| ·重组人干扰素纳米磁性脂质体大小测定和形态观察 | 第39页 |
| ·重组人干扰素纳米磁性脂质体中干扰素包封率的测定 | 第39-40页 |
| ·重组人干扰素纳米磁性脂质体制备工艺的优化 | 第40-42页 |
| ·重组人干扰素纳米磁性脂质体的体外磁响应性 | 第42页 |
| ·重组人干扰素纳米磁性脂质体保存期间的稳定性 | 第42-43页 |
| ·重组人干扰素纳米磁性脂质体的灭菌和无菌检测 | 第43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-52页 |
| ·纳米磁性材料—Fe_3O_4的制备 | 第43-44页 |
| ·重组人干扰素纳米磁性脂质体的制备 | 第44-45页 |
| ·重组人干扰素纳米磁性脂质体大小测定和形态观察 | 第45-47页 |
| ·重组人干扰素纳米磁性脂质体中干扰素包封率的测定 | 第47-49页 |
| ·ELISA试剂盒测定干扰素浓度 | 第47页 |
| ·柱分离法 | 第47-49页 |
| ·重组人干扰素纳米磁性脂质体制备工艺的优化 | 第49页 |
| ·重组人干扰素纳米磁性脂质体的体外磁响应性 | 第49-51页 |
| ·重组人干扰素纳米磁性脂质体保存期间的稳定性 | 第51-52页 |
| ·放置时间影响 | 第51页 |
| ·泄漏率 | 第51-52页 |
| ·重组人干扰素纳米磁性脂质体的灭菌和无菌检测 | 第52页 |
| 4 讨论 | 第52-56页 |
| ·纳米磁性材料—Fe_3O_4的制备 | 第52页 |
| ·重组人干扰素纳米磁性脂质体的制备 | 第52页 |
| ·重组人干扰素纳米磁性脂质体中干扰素包封率的测定 | 第52-53页 |
| ·重组人干扰素纳米磁性脂质体制备工艺的优化 | 第53-54页 |
| ·包封率二次多项式逐步回归 | 第53页 |
| ·平均粒径二次多项式逐步回归 | 第53-54页 |
| ·重组人干扰素纳米磁性脂质体的体外磁响应性 | 第54页 |
| ·重组人干扰素纳米磁性脂质体保存期间的稳定性 | 第54-55页 |
| ·重组人干扰素纳米磁性脂质体的灭菌和无菌检测 | 第55-56页 |
| 第三章 重组人干扰素纳米磁性脂质体药动学和体内分布的研究 | 第56-74页 |
| 1 前言 | 第57页 |
| 2 材料和方法 | 第57-62页 |
| ·材料 | 第57-58页 |
| ·动物 | 第57-58页 |
| ·试剂和药品 | 第58页 |
| ·仪器和设备 | 第58页 |
| ·方法 | 第58-62页 |
| ·干扰素磁性脂质体的安全性试验 | 第58-60页 |
| ·干扰素磁性脂质体的药动学和体内分布研究 | 第60-62页 |
| 3 结果与分析 | 第62-69页 |
| ·干扰素磁性脂质体的安全性试验 | 第62-64页 |
| ·溶血试验 | 第62-63页 |
| ·急毒性试验 | 第63-64页 |
| ·干扰素磁性脂质体的药动学和体内分布研究 | 第64-69页 |
| ·干扰素ELISA测定法的标准曲线及回归方程 | 第64页 |
| ·回收率实验 | 第64页 |
| ·干扰素磁性脂质体的药动学(血药浓度与时间的关系)研究 | 第64-65页 |
| ·磁场诱导下干扰素磁性脂质体在组织中的分布 | 第65-67页 |
| ·药动学解析 | 第67-69页 |
| 4.讨论 | 第69-74页 |
| ·安全性试验 | 第69-70页 |
| ·溶血试验 | 第69页 |
| ·急性毒性试验 | 第69-70页 |
| ·干扰素磁性脂质体的药动学和体内分布研究 | 第70-74页 |
| ·干扰素磁性脂质体的药动学研究 | 第70-71页 |
| ·干扰素磁性脂质体的体内分布研究 | 第71-72页 |
| ·干扰素磁性脂质体药动学参数解析 | 第72-74页 |
| 第四章 重组人干扰素纳米磁性脂质体抑制肝癌细胞生长及诱导其凋亡的研究 | 第74-91页 |
| 1 前言 | 第75页 |
| 2 材料和方法 | 第75-81页 |
| ·材料 | 第75-78页 |
| ·细胞株 | 第75-76页 |
| ·常用试剂和药品 | 第76页 |
| ·细胞培养用液的配制与消毒 | 第76-78页 |
| ·常用设备和仪器 | 第78页 |
| ·方法 | 第78-81页 |
| ·Bel-7402细胞的培养及单细胞悬液的制备 | 第78页 |
| ·肝癌细胞生长抑制的研究 | 第78-80页 |
| ·肝癌细胞凋亡的相关研究 | 第80-81页 |
| 3 结果与分析 | 第81-87页 |
| ·Bel-7402细胞的培养及单细胞悬液的制备 | 第81-82页 |
| ·肝癌细胞生长抑制的研究 | 第82-84页 |
| ·MTT法检测药物干预后肝癌细胞生长的抑制率 | 第82-83页 |
| ·细胞计数法观察药物干预后肝癌细胞的生长曲线 | 第83-84页 |
| ·肝癌细胞凋亡的相关研究 | 第84-87页 |
| ·吖啶橙荧光单染法观察肝癌细胞的凋亡 | 第84-86页 |
| ·DNA ladder法检测凋亡肝癌细胞的生理功能 | 第86-87页 |
| 4.讨论 | 第87-91页 |
| ·Bel-7402细胞的培养及单细胞悬液的制备 | 第87页 |
| ·肝癌细胞生长抑制的研究 | 第87-88页 |
| ·MTT法检测药物干预后肝癌细胞生长的抑制率 | 第87-88页 |
| ·细胞计数法观察药物干预后肝癌细胞的生长曲线 | 第88页 |
| ·肝癌细胞凋亡的相关研究 | 第88-91页 |
| ·吖啶橙荧光染色法观察肝癌细胞的凋亡 | 第89页 |
| ·DNA ladder法检测凋亡肝癌细胞的生理功能 | 第89-91页 |
| 第五章 重组人干扰素纳米磁性脂质体靶向治疗人原发性肝癌的研究 | 第91-128页 |
| 1 前言 | 第91-92页 |
| 2 材料和方法 | 第92-115页 |
| ·材料 | 第92-100页 |
| ·细胞株 | 第92页 |
| ·实验动物 | 第92页 |
| ·药品与试剂 | 第92-93页 |
| ·其它试剂 | 第93页 |
| ·试剂配制 | 第93-99页 |
| ·主要仪器 | 第99-100页 |
| ·引物设计及合成 | 第100页 |
| ·方法 | 第100-115页 |
| ·纳米磁性重组人干扰素脂质体的制备 | 第100-101页 |
| ·人肝癌细胞癌荷瘤裸鼠移植瘤模型的建立 | 第101页 |
| ·外磁场诱导下磁性微球对裸鼠肝癌模型的体内靶向治疗研究 | 第101页 |
| ·RT-PCR检测肿瘤组织内VEGF和Caspase-3 mRNA的表达 | 第101-111页 |
| ·Western bolt检测肿瘤组织中VEGF和Caspase-3蛋白的表达 | 第111-115页 |
| 3 结果与分析 | 第115-124页 |
| ·荷瘤裸鼠用药过程中肿瘤体积的变化 | 第115-116页 |
| ·荷瘤裸鼠肿瘤瘤重及瘤重抑制率 | 第116-117页 |
| ·肿瘤组织内VEGF和Caspase-3 mRNA的检测 | 第117-122页 |
| ·荷瘤裸鼠肿瘤组织总RNA制备 | 第117-118页 |
| ·RT-PCR结果 | 第118-119页 |
| ·PCR产物克隆 | 第119-120页 |
| ·克隆片段的核苷酸序列分析 | 第120-121页 |
| ·肿瘤组织内VEGF mRNA的检测 | 第121页 |
| ·肿瘤组织内Caspase-3 mRNA的检测 | 第121-122页 |
| ·Western blot检测肿瘤组织中VEGF和Caspase-3蛋白的表达 | 第122-124页 |
| ·Western blot检测肿瘤组织中VEGF蛋白的表达 | 第122-123页 |
| ·Western blot检测肿瘤组织中Caspase-3蛋白的表达 | 第123-124页 |
| 4.讨论 | 第124-128页 |
| ·人原发性肝癌VEGF和CASPASE-3 cDNA的克隆 | 第124-125页 |
| ·人原发性肝癌与VEGF和CASPASE-3基因 | 第125-128页 |
| 结论与创新点 | 第128-130页 |
| 参考文献 | 第130-141页 |
| 致谢 | 第141-143页 |
| 附录 | 第143-148页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文、主持及参与的科研课题等 | 第148-149页 |
