| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 文献综述 | 第12-27页 |
| 第一章 鸭疫里默氏菌病的研究进展及胶体金快速诊断技术 | 第12-27页 |
| ·鸭疫里默氏菌病的研究进展 | 第12-21页 |
| ·病原学 | 第12-13页 |
| ·分类地位 | 第13-14页 |
| ·血清型 | 第14-15页 |
| ·分子生物学分类 | 第15页 |
| ·分子生物学 | 第15-17页 |
| ·流行病学 | 第17页 |
| ·病理变化 | 第17-18页 |
| ·临床症状 | 第18页 |
| ·诊断 | 第18-19页 |
| ·疫苗与免疫 | 第19-21页 |
| ·胶体金快速诊断技术 | 第21-27页 |
| ·免疫胶体金快速诊断技术的优点 | 第21页 |
| ·胶体金免疫技术的原理和类型 | 第21-22页 |
| ·胶体金免疫技术的主要研究步骤 | 第22-23页 |
| ·免疫胶体金的应用现状 | 第23-24页 |
| ·胶体金快速诊断技术的发展方向 | 第24-26页 |
| ·结语 | 第26-27页 |
| 试验研究 | 第27-66页 |
| 第二章 P25 基因的克隆，表达及生物信息学分析 | 第27-45页 |
| ·材料 | 第27-30页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·试验动物和饲料 | 第27页 |
| ·菌株和载体 | 第27-28页 |
| ·培养基 | 第28页 |
| ·常规化学试剂 | 第28页 |
| ·分子生物学试剂和试剂盒 | 第28页 |
| ·血清 | 第28页 |
| ·SDS-PAGE 所需材料 | 第28-29页 |
| ·免疫印迹所需材料 | 第29-30页 |
| ·融合蛋白纯化所需材料 | 第30页 |
| ·CaCl_2 法转化所需溶液 | 第30页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳用材料 | 第30页 |
| ·引物 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-36页 |
| ·P25 在E. coli Rosetta 大肠埃希菌的诱导表达 | 第30-31页 |
| ·融合蛋白的Western blot 检测 | 第31页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第31-32页 |
| ·P25（ORF）的克隆 | 第32-34页 |
| ·高免血清的制备 | 第34-35页 |
| ·P25 蛋白的免疫保护试验 | 第35页 |
| ·P25 蛋白的生物信息学分析 | 第35页 |
| ·不同血清型P25 基因的序列分析 | 第35-36页 |
| ·结果 | 第36-42页 |
| ·重组P25 的表达与纯化 | 第36页 |
| ·Ni-NTA 纯化试剂盒纯化结果 | 第36页 |
| ·以不同血清型RA 菌液为模板P25 (ORF) PCR 扩增结果 | 第36-37页 |
| ·免疫印迹分析结果 | 第37-38页 |
| ·免疫保护试验结果 | 第38页 |
| ·高免血清效价检测结果 | 第38页 |
| ·P25 蛋白的生物信息学分析结果 | 第38-40页 |
| ·相似性比对分析结果 | 第40-42页 |
| ·潜在抗原的预测结果 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 第三章 基于P25 蛋白检测RA 抗体间接ELISA 的建立 | 第45-54页 |
| ·材料 | 第45-46页 |
| ·主要仪器 | 第45页 |
| ·菌种与质粒 | 第45页 |
| ·试剂和血清 | 第45页 |
| ·试验动物 | 第45页 |
| ·培养基 | 第45页 |
| ·ELISA 所用溶液 | 第45-46页 |
| ·方法 | 第46-47页 |
| ·重组蛋白的Ni-NTA 亲和纯化 | 第46页 |
| ·间接ELISA 方法的建立 | 第46-47页 |
| ·ELISA 方法的特异性试验 | 第47页 |
| ·母源抗体水平和免疫后抗体消长规律的评价 | 第47页 |
| ·P25 间接ELISA 法对其他血清型RA 抗体的检测和临床应用 | 第47页 |
| ·结果 | 第47-51页 |
| ·蛋白的纯化结果 | 第47-48页 |
| ·间接ELISA 反应的最佳条件 | 第48-49页 |
| ·特异性试验结果 | 第49页 |
| ·母源抗体水平和免疫后抗体消长规律曲线 | 第49-50页 |
| ·间接ELISA 法对其它血清型RA 参考血清和临床样本的检测 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| ·小结 | 第53-54页 |
| 第四章 免疫胶体金快速诊断试纸条的研究 | 第54-66页 |
| ·材料 | 第54-55页 |
| ·制备胶体金所需试剂 | 第54页 |
| ·IgG 的分离与提纯试剂 | 第54页 |
| ·检测所用血清 | 第54-55页 |
| ·主要仪器 | 第55页 |
| ·金标耗材 | 第55页 |
| ·膜反应体系组成 | 第55页 |
| ·方法 | 第55-59页 |
| ·P25 重组蛋白抗原的制备 | 第55页 |
| ·胶体金的制备 | 第55-56页 |
| ·金标P25 抗原的制备 | 第56-57页 |
| ·金标垫的制备 | 第57页 |
| ·鸭疫里默氏菌病血清抗体的提纯 | 第57页 |
| ·金标检测卡的组装 | 第57-58页 |
| ·试纸条的检测方法及判断标准 | 第58页 |
| ·试纸条最佳试验条件的优化 | 第58-59页 |
| ·敏感性试验 | 第59页 |
| ·特异性试验 | 第59页 |
| ·临床样品验证 | 第59页 |
| ·结果 | 第59-62页 |
| ·包被蛋白浓度及标记蛋白用量的确定 | 第59-60页 |
| ·胶体金的鉴定 | 第60页 |
| ·金标P25 蛋白的鉴定 | 第60页 |
| ·各种试剂的优化结果 | 第60-61页 |
| ·敏感性试验结果 | 第61页 |
| ·特异性试验结果 | 第61页 |
| ·临床样品验证结果 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-65页 |
| ·金标蛋白的制备 | 第62页 |
| ·金标耗材的选择 | 第62-63页 |
| ·检测RA 抗体的GICA 系统的敏感性与特异性 | 第63-64页 |
| ·假阳性的原因分析 | 第64页 |
| ·试纸条的组装 | 第64页 |
| ·GICA 与其它检测方法的比较 | 第64-65页 |
| ·临床检测结果 | 第65页 |
| ·小结 | 第65-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 缩写词与英汉对照 | 第75-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 个人简介 | 第78页 |
