前言 | 第1-6页 |
第一章 PH Ⅱ-7作用模式和机理研究 | 第6-58页 |
摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
前言 | 第10-11页 |
第一节 实验材料 | 第11-15页 |
·细胞株 | 第11页 |
·药物及试剂 | 第11-12页 |
·基因芯片 | 第12页 |
·主要仪器 | 第12-15页 |
第二节 实验方法 | 第15-28页 |
·细胞培养 | 第15页 |
·MTT法测定药物敏感性 | 第15-16页 |
·PH Ⅱ-7处理前后的基因表达谱变化比较 | 第16-19页 |
·总RNA的提取和纯化 | 第16-17页 |
·cDNA的合成和纯化 | 第17页 |
·cRNA的合成和纯化 | 第17-18页 |
·cRNA片段化、配制杂交液 | 第18页 |
·芯片杂交 | 第18-19页 |
·洗脱芯片 | 第19页 |
·扫描芯片 | 第19页 |
·数据分析 | 第19-21页 |
·Realtime PCR相对定量分析验证基因表达变化 | 第21-23页 |
·SiRNA设计与合成 | 第23-25页 |
·siRNA的转染 | 第25-26页 |
·Annexin V与PI双染法侧凋亡 | 第26页 |
·细胞周期检测 | 第26-27页 |
·流式细胞术和激光共聚焦显微镜检测PH Ⅱ-7对胞内阿霉素浓度的影响 | 第27-28页 |
第三节 结果 | 第28-54页 |
·PH Ⅱ-7对耐药肿瘤细胞的杀伤效果,及其与阿霉素合用时的联和杀伤效果。 | 第28-29页 |
·GeneChip~(?) Human Genome U133 Plus 2.0 Array质控结果。 | 第29-37页 |
·生物信息学分析结果 | 第37-45页 |
·Relative quantitative real-time PCR对差异基因的复测结果 | 第45-49页 |
·靶向PKCA的SiRNA干扰K562/A02细胞的结果 | 第49-50页 |
·PH Ⅱ-7诱导凋亡的效果及与阿霉素的效果对比 | 第50-52页 |
·激光共聚焦测PH Ⅱ-7对阿霉素胞内蓄积的影响 | 第52-53页 |
·流式测PH Ⅱ-7对阿霉素胞内蓄积的影响 | 第53-54页 |
第四节 讨论 | 第54-57页 |
第五节 小结 | 第57-58页 |
第二章 SiRNA沉默SORCIN基因表达对K562/A02基因表达谱的影响的研究 | 第58-82页 |
摘要 | 第58-59页 |
Abstract | 第59-60页 |
前言 | 第60-61页 |
第一节 实验材料 | 第61-62页 |
·细胞株 | 第61页 |
·药物及试剂 | 第61页 |
·基因芯片 | 第61页 |
·主要仪器 | 第61-62页 |
第二节 实验方法 | 第62-69页 |
·细胞培养 | 第62-63页 |
·siRNA的设计 | 第63页 |
·体外转录法合成siRNA | 第63-66页 |
·siRNA的转染 | 第66页 |
·总RNA的提取 | 第66页 |
·cDNA的合成 | 第66-67页 |
·Realtime PCR相对定量分析 | 第67-68页 |
·基因芯片检测 | 第68页 |
·统计学处理 | 第68-69页 |
第三节 实验结果 | 第69-73页 |
·RNA干扰对sorcin基因表达的抑制作用 | 第69-73页 |
·Real-time PCR检测RNA干扰K562/A02细胞GAPDH基因表达改变 | 第69-70页 |
·Realtime PCR检测转染sorcin基因的siRNA对K562/A02细胞sorcin基因表达抑制作用 | 第70-71页 |
·RNA干扰sorcin后K562/A02细胞基因表达谱的变化 | 第71-73页 |
第四节 讨论 | 第73-81页 |
第五节 小结 | 第81-82页 |
第三章 论文综述 | 第82-98页 |
一.多药耐药相关基因MDR1及其表达和功能调控 | 第82-94页 |
二.SORCIN基因与多药耐药的关系 | 第94-98页 |
引文 | 第98-106页 |
附录一 英文缩略词汇表 | 第106-108页 |
附录二、溶液配制 | 第108-112页 |
致谢 | 第112-114页 |
专利申请 | 第114页 |
发表文章和参加会议 | 第114-115页 |