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辣椒高赖氨酸基因(CFLR)导入小麦的研究

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-8页
第一章 文献综述第8-21页
 第一节 小麦基因枪转化体系的建立第8-17页
   ·引言第8页
   ·小麦遗传转化主要方法第8-13页
     ·基因枪法第9-11页
     ·根癌农杆菌介导法第11-12页
     ·花粉管通道法第12-13页
     ·创伤侵染法第13页
   ·转基因小麦目标基因第13-15页
     ·品质基因第13-14页
     ·抗病基因第14页
     ·抗虫基因第14-15页
     ·雄性不育基因第15页
     ·抗除草剂基因第15页
     ·其它基因第15页
   ·外源基因在转基因小麦中的整合和表达第15-16页
     ·外源基因在转基因小麦中的整合第15-16页
     ·外源基因在转基因小麦中的表达第16页
   ·小麦幼胚组织培养研究及小麦组织培养技术的发展第16页
   ·小麦转化受体第16-17页
   ·小麦转基因存在的问题第17页
 第二节 高赖氨酸蛋白基因(CFLR)导入小麦的研究第17-20页
 第三节 本研究的目的和意义第20-21页
第二章 小麦基因枪转化体系的优化第21-29页
 1. 材料与方法第21-25页
   ·供试材料第21页
   ·转化培养总技术方法第21-22页
   ·培养基组成第22页
   ·质粒载体第22页
   ·载体制备第22-23页
   ·微弹制备、包裹和幼胚的获得及基因枪轰击第23-24页
   ·筛选及植株再生第24页
   ·转基因植株 DNA 提取第24页
   ·转基因植株的检测第24-25页
 2. 结果与分析第25-28页
   ·不同金粉直径的金粉分散及转化情况第25-26页
   ·不同大小受体材料分化的选择第26页
   ·不同浓度除草剂对愈伤分化的影响第26-27页
   ·T_0 代基因组 PCR 的bar 基因检测第27-28页
 3. 讨论第28页
   ·幼胚的大小愈转化效率第28页
   ·除草剂对小麦植株再生过程的筛选第28页
 4. 结论第28-29页
第三章 辣椒高赖氨酸蛋白基因cflr 载体构建及小麦转化第29-46页
 1. 材料与方法第29-36页
   ·材料第29页
   ·方法第29-36页
     ·辣椒高赖氨酸蛋白基因cflr的克隆第29页
     ·载体构建第29-34页
       ·引物设计第31页
       ·PAHC25载体构建第31-34页
     ·中间载体 PUC18-U-C-N 酶切验证第34页
     ·载体 PAHC25-U-C-N 验证第34页
       ·bar 基因部分片段扩增验证第34页
       ·cflr 基因部分片段扩增验证第34页
     ·cflr 基因导入小麦第34页
     ·转基因植株的检测第34-36页
       ·T_0代PCR 检测材料DNA 提取和 PCR 检测第34-35页
       ·T_1代转基因植株cflr PCR 检测和表达PCR 检测第35-36页
     ·叶片中赖氨酸含量检测第36页
 2 结果与分析第36-43页
   ·cflr 基因序列第36-37页
   ·中间载体PUC18-U-C-N 酶切验证第37页
   ·载体 PAHC25-U-C-N 验证第37-38页
   ·T_0 代PCR 检测结果第38-43页
     ·T_0 代PCR 检测结果第38-39页
     ·T_1代基因组PCR检测结果第39-43页
     ·叶片中赖氨酸含量第43页
 3. 讨论第43-46页
   ·转基因阳性植株的分子鉴定第43页
   ·通过转基因改良小麦品质的可行性第43-45页
   ·外源基因插入对小麦生长发育的影响第45页
   ·高赖氨酸基因在作物上应用第45-46页
参考文献第46-53页
致谢第53-54页
附表第54页

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