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共表达IBDV VP0、VP2基因的重组鸡痘病毒构建及实验免疫研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-14页
第一章 鸡传染性法氏囊病的研究进展第14-25页
   ·概述第14页
   ·IBDV 的病原特性第14-20页
     ·IBDV 的基因组结构第14-15页
     ·病毒的形态发生第15-16页
     ·病毒蛋白第16-18页
     ·IBDV 毒株分类第18页
     ·培养特性第18-19页
     ·IBDV 的抵抗力第19-20页
   ·流行病学第20-21页
     ·自然宿主第20页
     ·传播媒介第20页
     ·潜伏期和症状第20-21页
     ·发病率和死亡率第21页
   ·IBDV 疫苗的研究进展第21-25页
     ·传统疫苗第21-22页
     ·基因工程疫苗第22页
     ·VP5 蛋白缺失IBDV 毒株第22页
     ·亚单位疫苗第22-23页
     ·DNA 疫苗第23页
     ·载体疫苗第23页
     ·烈性毒株疫苗第23页
     ·免疫复合物(immune complex)疫苗第23页
     ·可食用转基因植物疫苗(edible transgenic plant vaccine)第23-25页
第二章 鸡痘病毒载体研究进展第25-30页
   ·痘病毒的分类第25页
   ·痘病毒载体的特点第25-26页
     ·痘病毒载体的优点第25-26页
     ·痘病毒载体的不足之处第26页
   ·痘病毒载体构建过程中的技术第26-28页
     ·病毒复制非必需区的选择第26页
     ·启动子的选择第26-27页
     ·外源基因所需满足的条件第27页
     ·同源重组法构建重组病毒第27页
     ·重组病毒筛选方法第27-28页
   ·禽痘病毒载体第28-29页
     ·禽痘病毒载体的特点第28页
     ·禽痘病毒载体的应用第28-29页
   ·本研究的目的意义和总体构思第29-30页
第三章 IBDV 的分离、鉴定及抗IBDV 高免血清的制备第30-47页
   ·材料第30-31页
     ·病料第30页
     ·鸡胚与雏鸡第30页
     ·IBDV 琼脂免疫扩散试验及血凝试验标准抗原有血清第30页
     ·受体菌、质粒载体和主要试剂第30页
     ·主要设备第30-31页
   ·方法第31-39页
     ·病料处理第31页
     ·病毒的分离与传代第31-33页
     ·毒价测定第33页
     ·血清学鉴定第33-34页
     ·动物回归试验第34页
     ·间接免疫荧光法检测(IFA)第34页
     ·电镜观察第34-35页
     ·IBDV 分离株RT-PCR 鉴定第35-37页
     ·病毒的浓缩与纯化第37-38页
     ·抗IBDV 的高免血清的制备第38-39页
   ·结果第39-45页
     ·鸡胚稳定性试验第39页
     ·IBDV 分离株在CEF 中的稳定性试验第39-40页
     ·IBDV 分离株毒价测定结果第40-42页
     ·血清学鉴定结果第42页
     ·动物回归试验结果第42页
     ·间接免疫荧光试验(IFA)结果第42-43页
     ·电镜结果第43-44页
     ·RT-PCR 电泳结果第44页
     ·重组质粒PCR 检测第44-45页
     ·病毒含量的测定第45页
     ·高免血清效价的测定结果第45页
   ·分析与讨论第45-46页
   ·小结第46-47页
第四章 重组鸡痘病毒转移载体的构建与重组鸡痘病毒的筛选鉴定第47-61页
   ·材料第47页
     ·病毒、细胞、质粒、菌种第47页
     ·酶及主要试剂第47页
     ·主要仪器第47页
   ·方法第47-54页
     ·引物的设计与合成第47-48页
     ·重组鸡痘病毒转移载体pMTB18-VP0-VP2 的构建第48-50页
     ·鸡胚成纤维细胞的制备第50页
     ·FPV 毒价测定第50-51页
     ·鸡痘病毒细胞内同源重组方法第51页
     ·TK-鸡痘病毒的筛选第51-52页
     ·重组病毒表达产物的检测第52-54页
   ·结果第54-58页
     ·FPV 的毒价测定结果第54页
     ·VP0 和VP2 片段的扩增结果第54-55页
     ·重组质粒pMTB18-VP0-VP2 酶切鉴定电泳图第55-56页
     ·重组病毒的DNA 提取后的PCR 鉴定第56-57页
     ·重组病毒的RT-PCR 鉴定第57页
     ·重组病毒表达产物的间接免疫荧光(IFA)鉴定第57-58页
     ·rFPV 感染单位(U/mL)第58页
   ·分析与讨论第58-60页
   ·小结第60-61页
第五章 重组鸡痘病毒对SPF 鸡的实验免疫研究第61-73页
   ·材料第61-62页
     ·疫苗第61页
     ·雏鸡和鸡胚第61页
     ·细胞、病毒第61页
     ·试剂和抗体第61页
     ·主要仪器第61-62页
   ·方法第62-66页
     ·重组鸡痘病毒的滴定与增殖第62页
     ·重组鸡痘病毒动物免疫试验的试验设计第62-63页
     ·免疫学检测第63-65页
     ·免疫保护检测第65-66页
     ·试验数据的处理与统计第66页
   ·结果第66-70页
     ·重组鸡痘病毒的毒价测定结果第66页
     ·免疫学检测试验结果第66-69页
     ·免疫保护结果第69-70页
   ·分析与讨论第70-72页
   ·小结第72-73页
第六章 结论第73-74页
参考文献第74-80页
致谢第80-81页
附录第81-84页
作者简历第84页
 个人情况第84页
 教育背景第84页
 项目经历第84页
 英语及计算机能力第84页
 自我评价第84页
 在研期间发表论文第84页

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