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白桦(Betula plataphylla Suk.)形成层组织基因表达及木材形成相关基因克隆的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-12页
1 绪论第12-23页
   ·引言第12页
   ·木材形成的生物学过程及其基因调控第12-18页
     ·形成层原始细胞的分裂及木材细胞的生成第13-14页
     ·次生壁的形成第14页
     ·木质素的生物合成第14-17页
     ·木材的形成第17-18页
   ·木材形成的基因组学研究方法第18-21页
     ·ESTs分析第18-19页
     ·抑制性扣除杂交第19页
     ·基因表达系列分析第19-20页
     ·基于cDNA-AFLP技术的转录组分析第20页
     ·微阵列技术第20-21页
     ·蛋白质组学研究第21页
   ·本课题研究的目的和意义第21-22页
   ·本项研究的内容和技术路线第22-23页
2 白桦形成层cDNA文库的构建第23-33页
   ·试验材料第23-24页
     ·建库材料第23页
     ·主要仪器设备第23-24页
   ·试验方法第24-30页
     ·白桦形成层总RNA提取第24-25页
     ·cDNA第一链合成第25页
     ·cDNA第二链合成第25页
     ·蛋白酶K消化第25-26页
     ·Sfi I 消化第26页
     ·cDNA片段的分级分离第26-27页
     ·载体连接第27页
     ·重组质粒的转化第27-28页
     ·插入片段长度检测第28页
     ·挑取单菌落摇菌第28页
     ·菌种保存第28页
     ·小量质粒的提取第28-29页
     ·测序PCR反应及模板制备第29-30页
   ·结果与分析第30-31页
     ·RNA质量检测第30页
     ·ds cDNA的合成及纯化第30-31页
     ·插入片段的长度检测及文库重组率测定第31页
   ·讨论第31-32页
   ·小结第32-33页
3 白桦形成层基因表达分析第33-40页
   ·材料与方法第33-34页
     ·材料第33页
     ·方法第33-34页
   ·结果与分析第34-38页
     ·文库的基本特征第34-35页
     ·序列同源比较及功能分类第35-36页
     ·四个物种形成区域文库数据比较第36-37页
     ·白桦木材形成相关基因及分类第37-38页
   ·讨论第38-39页
   ·小结第39-40页
4 不同发育时期白桦木材形成相关基因的表达分析第40-55页
   ·材料第40页
   ·方法第40-45页
     ·目标基因和内参基因的引物设计第40-41页
     ·RT-PCR检测第41页
     ·Northern杂交第41-44页
     ·sq RT-PCR第44-45页
   ·结果与分析第45-51页
     ·EST序列第45-49页
     ·基因表达分析第49-51页
   ·讨论第51-53页
   ·小结第53-55页
5 全长cDNA序列的获得及生物信息学分析第55-73页
   ·材料与方法第55页
     ·材料第55页
     ·方法第55页
   ·结果与分析第55-71页
     ·香豆醇辅酶A降解酶(CCR)第56-61页
     ·咖啡醇辅酶A-O-甲基转移酶(CCoAOMT)第61-66页
     ·木聚糖内糖基转移酶(XET)第66-71页
   ·小结第71-73页
结论第73-74页
参考文献第74-83页
附录第83-84页
攻读学位期间发表的学术论文第84-85页
致谢第85-86页

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