| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 绪论 | 第8-14页 |
| ·蜘蛛丝的相关研究 | 第8-10页 |
| ·蜘蛛丝的物理化学机械性质 | 第8-9页 |
| ·蜘蛛丝蛋白和基因结构 | 第9页 |
| ·蜘蛛丝的研究现状及其应用 | 第9-10页 |
| ·毛发角蛋白 | 第10-11页 |
| ·角蛋白的结构 | 第10页 |
| ·角蛋白的种类 | 第10-11页 |
| ·角蛋白与羊毛发育的关系 | 第11页 |
| ·启动子与报告基因 | 第11-12页 |
| ·启动子 | 第11页 |
| ·报告基因 | 第11-12页 |
| ·成纤维细胞 | 第12-13页 |
| ·成纤维细胞特点 | 第12页 |
| ·成纤维细胞的应用 | 第12-13页 |
| ·研究目的及意义 | 第13-14页 |
| 2 角蛋白启动子的克隆与表达活性分析 | 第14-27页 |
| ·实验材料 | 第14-16页 |
| ·实验动物 | 第14页 |
| ·实验菌种 | 第14页 |
| ·实验试剂配制 | 第14-15页 |
| ·仪器设备 | 第15-16页 |
| ·载体信息 | 第16页 |
| ·实验方法 | 第16-20页 |
| ·绵羊角蛋白启动子的克隆与序列分析 | 第16-19页 |
| ·角蛋白启动子成纤维细胞表达活性的检测 | 第19-20页 |
| ·实验结果 | 第20-25页 |
| ·绵羊角蛋白启动子的克隆与序列分析 | 第20-23页 |
| ·角蛋白启动子成纤维细胞表达活性的检测分析 | 第23-25页 |
| ·讨论 | 第25-26页 |
| ·本章小结 | 第26-27页 |
| 3 真核表达载体的构建 | 第27-32页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·实验菌株 | 第27页 |
| ·载体信息 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-28页 |
| ·丝蛋白四聚体的制备 | 第27页 |
| ·K2.10-pcDNA3.1-丝蛋白真核表达载体的构建 | 第27-28页 |
| ·pIRES2-EGFP-丝蛋白真核表达载体的构建 | 第28页 |
| ·实验结果 | 第28-31页 |
| ·K2.10-pcDNA3.1-丝蛋白真核表达载体的构建与鉴定 | 第28-30页 |
| ·pIRES2-EGFP-丝蛋白真核表达载体的构建与鉴定 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31页 |
| ·本章小结 | 第31-32页 |
| 4 绵羊皮肤成纤维细胞的转染、筛选与鉴定 | 第32-42页 |
| ·实验材料 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-35页 |
| ·绵羊皮肤成纤维细胞的原代培养 | 第32页 |
| ·G418筛选浓度及DNA转染浓度的确定 | 第32-33页 |
| ·绵羊皮肤成纤维细胞的转染及筛选 | 第33页 |
| ·转基因细胞系的鉴定 | 第33-34页 |
| ·转基因细胞的冷冻保存 | 第34页 |
| ·冷冻转基因细胞的复苏与检测 | 第34-35页 |
| ·实验结果 | 第35-39页 |
| ·绵羊皮肤成纤维细胞的原代培养及形态 | 第35页 |
| ·最适G418筛选及DNA转染浓度 | 第35-36页 |
| ·经G418筛选后的转基因细胞形态学观察 | 第36-37页 |
| ·转基因细胞的生物学指标检测及转基因细胞PCR鉴定 | 第37-39页 |
| ·冷冻复苏后的转基因细胞生物学性状检测 | 第39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| ·本章小结 | 第41-42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 附录 | 第47-51页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
