中文摘要 | 第1-15页 |
英文摘要 | 第15-18页 |
第一章 文献综述 | 第18-62页 |
1 昆虫的化学感受与嗅觉机制 | 第19-39页 |
·昆虫的化学感受 | 第19页 |
·昆虫的化学感受器与类型 | 第19-20页 |
·昆虫化学感受的相关蛋白 | 第20-35页 |
·昆虫的气味结合蛋白 | 第20-31页 |
·昆虫的气味受体 | 第31-32页 |
·昆虫的化学感受蛋白 | 第32-34页 |
·气味降解酶 | 第34-35页 |
·感觉神经元膜蛋白 | 第35页 |
·昆虫的嗅觉机制 | 第35-37页 |
·昆虫嗅觉途径 | 第35-37页 |
·昆虫嗅觉感受模型 | 第37页 |
·昆虫嗅觉机制前景和应用意义 | 第37-39页 |
2 RNAi 及其在昆虫学研究中的应用 | 第39-48页 |
·RNAi 的发现与发展 | 第39-40页 |
·RNAi 的分子机制 | 第40-42页 |
·起始阶段 | 第41页 |
·效应阶段 | 第41-42页 |
·扩增阶段 | 第42页 |
·RNAi 的生物学意义 | 第42-45页 |
·RNAi 抵御病毒感染 | 第42-44页 |
·RNAi 抑制转座子运动 | 第44页 |
·RNAi 参与异染色质的形成与维持 | 第44页 |
·RNAi 参与机体的发育调控及生理代谢 | 第44-45页 |
·RNAi 的系统性 | 第45页 |
·RNAi 在昆虫中导入方式 | 第45-47页 |
·昆虫RNAi 的导入方式 | 第45-47页 |
·注射法 | 第46页 |
·饲喂法 | 第46-47页 |
·组织培养法 | 第47页 |
·RNAi 在家蚕中的应用及前景 | 第47-48页 |
3 家蚕的遗传标记 | 第48-62页 |
·家蚕遗传学研究的概况 | 第48-49页 |
·近代的家蚕遗传学研究概况 | 第48-49页 |
·现代的家蚕遗传学研究概况 | 第49页 |
·家蚕作为遗传学研究材料的优点 | 第49页 |
·家蚕的遗传标记 | 第49-62页 |
·形态标记 | 第50页 |
·生化标记 | 第50页 |
·细胞学标记 | 第50-51页 |
·分子标记 | 第51-62页 |
第二章 主要试剂与常用实验方法 | 第62-69页 |
1 常用试剂 | 第62-64页 |
·培养基 | 第62页 |
·LB 液体培养基(Luria-Bertani Medium) | 第62页 |
·LB 固体培养基 | 第62页 |
·常用溶液 | 第62-64页 |
·Tris·EDTA(TE)缓冲液(pH8.0) | 第62页 |
·碱变性法质粒抽提缓冲液 | 第62页 |
·氨苄青霉素(ampicillin,Amp) | 第62页 |
·RNaseA | 第62-63页 |
·CaCl_2(75 mmol/L) | 第63页 |
·3 mol/L NaAc(pH 5.2) | 第63页 |
·溴化乙锭(ethidium bromide,EB) | 第63页 |
·X-gal(2%,m/v) | 第63页 |
·IPTG | 第63页 |
·1.2 %琼脂糖(Agarose) | 第63页 |
·DEPC 处理水 | 第63页 |
·TAE 电泳缓冲液(50×储存液,pH 约 8.5) | 第63-64页 |
2 主要仪器设备 | 第64页 |
3 常用实验方法 | 第64-69页 |
·碱裂解法少量制备质粒DNA | 第64-65页 |
·家蚕组织总RNA 提取 | 第65页 |
·家蚕DNA 提取 | 第65页 |
·CaC1_2 法制备E.coli 感受态细胞 | 第65-66页 |
·Reverse Transcription-PCR 反应(RT-PCR) | 第66页 |
·PCR 扩增反应程序及加样体系 | 第66-67页 |
·PCR 产物的回收 | 第67页 |
·连接反应 | 第67页 |
·重组DNA 的转化 | 第67页 |
·重组质粒的筛选 | 第67页 |
·限制性内切酶反应 | 第67-68页 |
·家蚕OBP 基因表达半定量分析 | 第68-69页 |
第三章 家蚕OBP 家族的生物信息学分析 | 第69-84页 |
1 材料与方法 | 第69-70页 |
·主要数据库及软件 | 第69-70页 |
·数据库及网址 | 第69页 |
·所用生物信息学软件 | 第69-70页 |
2 结果与分析 | 第70-83页 |
·家蚕OBP 家族核苷酸序列分析 | 第70-76页 |
·家蚕OBP 家族基因染色体定位 | 第70-71页 |
·家蚕OBP 家族基因结构分析 | 第71-72页 |
·家蚕OBP 家族基因电子表达谱分析 | 第72-73页 |
·家蚕OBP 家族基因进化分析与遗传距离 | 第73-76页 |
·家蚕OBP 家族蛋白序列分析 | 第76-83页 |
·家蚕OBP 蛋白生化特征 | 第76页 |
·家蚕OBP 蛋白跨膜区和疏水性预测 | 第76-79页 |
·家蚕OBP 蛋白氨基酸序列分析 | 第79-83页 |
3 结论与讨论 | 第83-84页 |
第四章 家蚕潜成虫和成虫期PBP/GOBP 亚家族基因簇基因定位、表达与蚕蛾趋性研究 | 第84-94页 |
1 材料与方法 | 第85-86页 |
·PBP/GOBP 亚家族基因序列获取与染色体定位 | 第85-86页 |
·家蚕品种与组织选取和RT-PCR | 第86页 |
·基因表达水平分析 | 第86页 |
·家蚕蛾的趋性测定 | 第86页 |
2 结果与分析 | 第86-92页 |
·家蚕PBP/GOBP 亚家族基因簇基因在染色体上的定位与排布分析 | 第86-88页 |
·家蚕PBP/GOBP 亚家族基因表达谱分析 | 第88-92页 |
·羽化前1 天家蚕PBP/GOBP 亚家族基因的表达分析 | 第88-89页 |
·羽化当日家蚕PBP/GOBP 亚家族基因的表达分析 | 第89-90页 |
·家蚕蛹和成虫不同时期触角中PBP/GOBP 亚家族基因的表达分析 | 第90-91页 |
·家蚕蛾的趋性测定 | 第91-92页 |
3 结论与讨论 | 第92-94页 |
·家蚕PBP/GOBP 基因簇 | 第92页 |
·家蚕PBP/GOBP 基因簇基因的表达与功能分析 | 第92-94页 |
第五章 家蚕ABP 和ABPX 的表达与功能研究 | 第94-112页 |
1 材料与方法 | 第94-98页 |
·家蚕ABP 和ABPX 的序列、结构与功能位点分析 | 第94页 |
·不同发育阶段家蚕ABP 和ABPX 基因表达分析 | 第94-95页 |
·基于RNAi 的家蚕ABP 和ABPX 功能研究 | 第95-98页 |
·注射化学合成的dsRNA 研究家蚕ABP 和ABPX 的功能 | 第95-96页 |
·口服细菌表达的dsRNA 研究家蚕ABP 和ABPX 的功能 | 第96-98页 |
·RNAi 对家蚕对桑叶趋性的影响 | 第98页 |
·RNAi 对家蚕发育的影响 | 第98页 |
·RNAi 对基因表达的影响 | 第98页 |
2 结果与分析 | 第98-109页 |
·家蚕ABP 和ABPX 的序列、结构与功能位点分析 | 第98-101页 |
·不同发育阶段家蚕ABP 和ABPX 基因表达分析 | 第101-104页 |
·家蚕胚胎期ABP 和ABPX 基因的表达 | 第101页 |
·家蚕幼虫不同时期ABP 和ABPX 基因的表达 | 第101-103页 |
·5 龄中期不同组织器官ABP 和ABPX 基因的表达 | 第103-104页 |
·家蚕ABP 和ABPX 的RNAi | 第104-109页 |
·dsRNA 的合成与家蚕的处理 | 第104-105页 |
·注射dsRNA 对家蚕的影响 | 第105-106页 |
·口服细菌表达的dsRNA 对家蚕的影 | 第106-109页 |
3 结论与讨论 | 第109-112页 |
·家蚕ABP 和ABPX 基因表达与功能分析 | 第109-110页 |
·家蚕ABP 和ABPX 的RNAi 系统性与效应 | 第110-111页 |
·口服细菌表达载体产生的dsRNA 用于昆虫RNAi 分析 | 第111-112页 |
第六章 野桑蚕pbp、or1 和or3 基因的克隆与进化分析 | 第112-123页 |
1 材料与方法 | 第113-114页 |
·野桑蚕蛾 | 第113页 |
·试剂 | 第113页 |
·野桑蚕基因的克隆与测序 | 第113-114页 |
·基因序列分析 | 第114页 |
·遗传距离和进化分析 | 第114页 |
2 结果与分析 | 第114-119页 |
·野桑蚕和家蚕的PBP 和OR 基因变异分析 | 第114-118页 |
·野桑蚕和家蚕的PBP 成熟蛋白和OR 蛋白的二级结构分析 | 第118页 |
·野桑蚕和家蚕同源基因遗传距离分析 | 第118页 |
·进化速率 | 第118页 |
·5 种昆虫PBP 蛋白进化分析 | 第118-119页 |
3 结论与讨论 | 第119-123页 |
·野桑蚕和家蚕的基因的变异及其与蛋白质功能的关系 | 第119-122页 |
·野桑蚕和家蚕PBP 亚家族基因的进化比较 | 第122-123页 |
第七章 昆虫GOBP 的分子进化分析 | 第123-137页 |
1 材料与方法 | 第124-125页 |
·GOBP 蛋白及cDNA 序列获取 | 第124页 |
·13 个物种GOBP 的氨基酸同源比对及聚类分析 | 第124-125页 |
2 结果分析 | 第125-136页 |
·13 种昆虫GOBP 蛋白的聚类分析及氨基酸同源比对 | 第125-131页 |
·13 种昆虫GOBP 聚类分析 | 第125-126页 |
·13 种昆虫GOBP 蛋白氨基酸和核苷酸序列一致性与差异性分析 | 第126-127页 |
·13 种昆虫GOBP 蛋白序列的遗传距离分析 | 第127-131页 |
·13 种昆虫GOBP 氨基酸残基替代分析 | 第131页 |
·13 种昆虫GOBP 蛋白基于氨基酸序列的ω分析 | 第131-136页 |
·13 种昆虫GOBP 蛋白氨基酸序列分析 | 第136页 |
3 结论与讨论 | 第136-137页 |
第八章 家蚕食性相关分子标记研究 | 第137-146页 |
1 材料与方法 | 第138-140页 |
·家蚕品系及对人工饲料的摄食性鉴定 | 第138页 |
·家蚕DNA 提取与检测 | 第138页 |
·分子标记PCR | 第138-140页 |
·引物设计 | 第138-139页 |
·RAPD-PCR 反应体系及条件设置 | 第139-140页 |
·SSR-PCR 反应体系及条件设置 | 第140页 |
2 结果与分析 | 第140-144页 |
·家蚕高摄食性和低摄食性纯系的摄食性调查 | 第140页 |
·家蚕DNA 检测 | 第140-141页 |
·分子标记分析 | 第141-144页 |
·RAPD 标记分析 | 第141页 |
·SSR 标记分析 | 第141-144页 |
3 结论与讨论 | 第144-146页 |
第九章 结论 | 第146-148页 |
参考文献 | 第148-173页 |
致谢 | 第173-174页 |
攻读学位期间发表的论文与研究成果 | 第174页 |