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基因传感器检测木质素降解酶基因及堆肥群落多样性研究

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
插图索引第12-14页
附表索引第14-15页
第1章 绪论第15-38页
   ·木质素降解微生物及酶系第16-25页
     ·堆肥中木质素降解微生物的种类第16-17页
     ·木质素降解酶系第17-21页
     ·木质素生物降解机理第21-24页
     ·影响木质素降解的主要因素第24-25页
   ·常规方法检测木质素降解酶基因第25-26页
     ·普通分子生物学方法检测木质素降解酶编码基因第25-26页
     ·酶生物传感器检测木质素降解酶第26页
   ·DNA 生物传感器的工作原理、分类及应用第26-34页
     ·DNA 生物传感器的工作原理第26-27页
     ·DNA 生物传感器的分类第27-30页
     ·DNA 探针的固定方法第30-31页
     ·DNA 生物传感器的应用第31-34页
   ·DNA 生物传感器的优缺点及发展趋势第34-37页
     ·DNA 生物传感器的优缺点第34-35页
     ·DNA 生物传感器的发展趋势第35-37页
   ·展望第37-38页
第2章 PCR-DGGE 技术应用于堆肥中微生物群落结构分析的可行性探讨第38-46页
   ·堆肥中的微生物学过程第38-39页
     ·真菌第38-39页
     ·放线菌和细菌第39页
     ·病原微生物第39页
   ·DGGE 技术的原理第39-40页
   ·PCR-DGGE 技术在环境工程生物处理研究中的应用第40-41页
     ·在废水生物处理研究中的应用第40-41页
     ·在废气生物处理研究中的应用第41页
     ·在污泥生物处理研究中的应用第41页
   ·PCR-DGGE 技术在微生物生态学中的应用第41-42页
     ·分析微生物多样性第41-42页
     ·监测微生物群落动态性第42页
   ·PCR-DGGE 技术的优势、局限性及应用前景第42-44页
     ·PCR-DGGE 技术的优势第42-43页
     ·PCR-DGGE 技术的局限性第43页
     ·PCR-DGGE 技术的应用前景第43-44页
   ·PCR-DGGE 用于堆肥中群落结构分析的可行性第44-46页
第3章 木质素降解酶基因序列分析及探针设计第46-50页
   ·木质素降解酶编码基因序列分析第46-47页
   ·木质素降解酶编码基因探针设计第47-50页
     ·影响 Primer Premier 5.0 软件设计的因素第47页
     ·探针及引物设计的原则第47-49页
     ·两种酶编码基因探针及引物第49-50页
第4章 DNA 生物传感器单独检测MnP 编码基因第50-62页
   ·引言第50-51页
   ·实验部分第51-54页
     ·仪器与试剂第51页
     ·实验方法第51-53页
     ·磷酸盐缓冲液pH 值的优化第53页
     ·杂交时间的优化第53-54页
     ·杂交温度的优化第54页
     ·对苯二酚浓度的优化第54页
     ·过氧化氢量的优化第54页
     ·传感器的再生及特异性第54页
   ·结果与讨论第54-60页
     ·磷酸盐缓冲液pH 值的优化第54-55页
     ·杂交时间的优化第55页
     ·杂交温度的优化第55-56页
     ·对苯二酚浓度的优化第56-57页
     ·过氧化氢量的优化第57-58页
     ·裸金电极、ssDNA/Au 电极及dsDNA/Au 电极的电化学表征第58-59页
     ·MnP 编码基因的线性检测范围第59页
     ·传感器的再生及特异性第59-60页
   ·结论第60-62页
第5章 DNA 生物传感器同时检测MnP 与CDH 编码基因第62-73页
   ·引言第62页
   ·实验部分第62-66页
     ·仪器与试剂第62-63页
     ·实验方法第63-64页
     ·磷酸盐缓冲液pH 值的优化第64-65页
     ·探针固定时间的优化第65页
     ·杂交时间的优化第65页
     ·杂交温度的优化第65页
     ·传感器的重复性及特异性第65-66页
     ·传感器的稳定性及抗干扰性第66页
   ·结果与讨论第66-72页
     ·磷酸盐缓冲液pH 值的优化第66页
     ·探针固定时间的优化第66-67页
     ·杂交时间的优化第67页
     ·杂交温度的优化第67-68页
     ·同时检测MnP 和CDH 编码基因第68-69页
     ·传感器的重复性及特异性第69-71页
     ·传感器的稳定性及抗干扰性第71-72页
   ·结论第72-73页
第6章 PCR-DGGE 分析堆肥中群落结构多样性第73-82页
   ·引言第73-74页
   ·实验部分第74-76页
     ·实验材料第74页
     ·实验仪器第74页
     ·实验试剂第74页
     ·基因组总DNA 的提取与纯化第74-75页
     ·PCR-DGGE 分析第75-76页
   ·结果与讨论第76-80页
     ·堆肥过程中温度、pH、有机质含量、C/N 的变化第76页
     ·堆肥样基因组总DNA 的提取与纯化第76-78页
     ·堆肥样品PCR-DGGE 群落多样性分析第78-80页
   ·结论第80-82页
结论第82-84页
参考文献第84-95页
附录 A 攻读学位期间发表的论文及申请的专利第95-96页
致谢第96页

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