| 目录 | 第1-14页 |
| 致谢 | 第14-15页 |
| 摘要 | 第15-17页 |
| Abstract | 第17-19页 |
| 缩略语表 | 第19-20页 |
| 第一章 文献综述 | 第20-38页 |
| 引言 | 第20页 |
| ·生长素信号途径 | 第20-24页 |
| ·泛素蛋白酶系统概述 | 第21-22页 |
| ·SCF~(TIR/AFBs)复合体参与的生长素信号途径 | 第22-23页 |
| ·生长素快速响应基因 | 第23页 |
| ·ARF与IAA互作传递生长素信号 | 第23页 |
| ·生长素不敏感性突变体总结 | 第23-24页 |
| ·生长素极性运输 | 第24-26页 |
| ·生长素输出载体PIN | 第24-25页 |
| ·生长素输入载体AUX/LAX | 第25页 |
| ·新的生长素运输载体家族PGP | 第25-26页 |
| ·ARF结构及功能 | 第26-30页 |
| ·ARF结构研究 | 第26-27页 |
| ·ARF影响植物器官发育 | 第27-30页 |
| ·ARF与根系发育 | 第27-28页 |
| ·ARF与维管组织,胚轴,叶器官发育 | 第28-29页 |
| ·ARF与花器官发育 | 第29页 |
| ·ARF影响种子与果实发育 | 第29-30页 |
| ·ARF调控植物磷营养吸收代谢 | 第30-34页 |
| ·植物磷信号网络及其主要成员简介 | 第30-33页 |
| ·PHR1 | 第30-32页 |
| ·PHO2 | 第32页 |
| ·miR399 | 第32-33页 |
| ·at4 | 第33页 |
| ·生长素改变根构型参与磷吸收代谢 | 第33-34页 |
| ·磷信号与生长素信号的结合 | 第34页 |
| ·ARF介导的生长素与其他植物激素的信号交叉 | 第34-36页 |
| ·ARF参与细胞分裂素信号途径 | 第34-35页 |
| ·ARF参与乙烯信号途径 | 第35-36页 |
| ·ARF参与脱落酸信号途径 | 第36页 |
| ·本研究的意义 | 第36-38页 |
| 第二章 水稻ARF家族基因氨基酸含量,结构及核定位信号位置分析 | 第38-43页 |
| ·材料与方法 | 第38-39页 |
| ·水稻ARF家族基因序列来源及分析 | 第38页 |
| ·水稻ARF氨基酸含量分析 | 第38页 |
| ·水稻ARF核定位信号分析 | 第38-39页 |
| ·水稻ARF全长cDNA克隆获得 | 第38页 |
| ·实验用菌株及载体 | 第38页 |
| ·核定位信号分析 | 第38页 |
| ·35S:cDNA::sGFP载体构建 | 第38-39页 |
| ·基因枪轰击洋葱表皮方法 | 第39页 |
| ·激光扫描共聚焦显微镜(Confocal)观察GFP荧光方法 | 第39页 |
| ·结果与分析 | 第39-42页 |
| ·水稻ARF家族氨基酸含量分析 | 第39-40页 |
| ·依赖于氨基酸含量的水稻ARF家族分类 | 第40-41页 |
| ·水稻ARF家族核定位信号位置的确定 | 第41-42页 |
| ·小结与讨论 | 第42-43页 |
| 第三章 OsARF16突变体的鉴定及表型分析 | 第43-54页 |
| ·材料与方法 | 第43-47页 |
| ·材料的获得 | 第43页 |
| ·水稻营养液的配制 | 第43页 |
| ·水稻少量DNA提取方法 | 第43-44页 |
| ·RNA提取方法 | 第44页 |
| ·逆转录及RT-PCR实验方法 | 第44页 |
| ·突变体的鉴定 | 第44-45页 |
| ·DNA水平鉴定插入位置 | 第44-45页 |
| ·RNA水平确认基因敲除 | 第45页 |
| ·突变体的回复验证 | 第45页 |
| ·水稻转基因方法及培养条件 | 第45-46页 |
| ·表型分析方法 | 第46-47页 |
| ·照片拍摄 | 第46页 |
| ·植物生长及根参数统计 | 第46-47页 |
| ·离子含量测定方法 | 第47页 |
| ·结果与分析 | 第47-53页 |
| ·生长素不敏感型突变体 | 第47页 |
| ·TOS17插入突变鉴定结果 | 第47-48页 |
| ·插入位置的确定 | 第47页 |
| ·转基因回复 | 第47-48页 |
| ·OsARF16基因在各种背景下的表达 | 第48页 |
| ·osarf16及Ov16材料对外源多种激素的响应 | 第48-52页 |
| ·osarf16及Ov16材料主根对外源激素的响应 | 第49页 |
| ·osarf16侧根对外源激素的响应 | 第49-50页 |
| ·osarf16不定根对外源激素的响应 | 第50-51页 |
| ·osarf16根毛对外源激素的响应 | 第51页 |
| ·osarf16主根在不同pH值下对生长素的响应 | 第51-52页 |
| ·osarf16中离子含量 | 第52-53页 |
| ·小结与讨论 | 第53-54页 |
| 第四章 OsARF16基因表达位置分析 | 第54-64页 |
| ·材料与方法 | 第54-56页 |
| ·水稻材料 | 第54页 |
| ·水稻总RNA提取及逆转录 | 第54页 |
| ·实时荧光定量PCR实验方法 | 第54页 |
| ·实验菌株及载体 | 第54页 |
| ·OsARF16基因Promoter：GUS载体构建 | 第54页 |
| ·水稻转基因方法及培养条件 | 第54页 |
| ·组织特异性GUS染色及观察 | 第54-55页 |
| ·生长素含量测定方法 | 第55-56页 |
| ·实验材料的培养 | 第55页 |
| ·样品的前处理 | 第55页 |
| ·过柱及洗脱收集 | 第55页 |
| ·上样测定 | 第55-56页 |
| ·结果与分析 | 第56-61页 |
| ·全组织GUS染色观察 | 第56页 |
| ·OsARF16基因在不同处理下根中的表达 | 第56-58页 |
| ·侧根原基萌发过程OsARF16表达及生长素分布 | 第58页 |
| ·正常条件下osarf16突变体根部生长素含量上升 | 第58-59页 |
| ·OsARF16突变阻滞了外源生长素的进入 | 第59页 |
| ·生长素合成基因OsYUCCA在突变体中的表达 | 第59-60页 |
| ·OsARF16突变抑制生长素运输载体基因对外源生长素的响应 | 第60-61页 |
| ·小结与讨论 | 第61-64页 |
| 第五章 OsARF16影响磷的吸收代谢 | 第64-79页 |
| ·材料与方法 | 第64-66页 |
| ·水稻材料及培养条件 | 第64页 |
| ·水稻总磷含量测定方法 | 第64-65页 |
| ·试剂配制 | 第64页 |
| ·操作步骤 | 第64-65页 |
| ·磷标准曲线制作 | 第65页 |
| ·水稻茎-根生物量的测定 | 第65页 |
| ·水稻根系参数统计 | 第65页 |
| ·芯片数据作图方法 | 第65页 |
| ·水稻总RNA提取及逆转录,实时荧光定量PCR | 第65-66页 |
| ·结果与分析 | 第66-77页 |
| ·OsARF16敲除增加水稻对磷的吸收 | 第66-69页 |
| ·osarf16磷含量高于NIP | 第66-67页 |
| ·内源较高生长素含量可以提高水稻对磷的吸收 | 第67页 |
| ·pH值对磷吸收的影响 | 第67-69页 |
| ·OsARF16敲除降低了植株对磷缺乏的敏感性 | 第69-73页 |
| ·生物量与根冠比对磷缺乏的响应降低 | 第69-70页 |
| ·根毛失去磷缺乏响应 | 第70-71页 |
| ·侧根失去磷缺乏响应 | 第71-72页 |
| ·铁含量失去磷缺乏响应 | 第72-73页 |
| ·OsARF16敲除对磷信号途径关键基因表达的影响 | 第73-74页 |
| ·生长素信号与磷信号互作 | 第74-77页 |
| ·小结与讨论 | 第77-79页 |
| 第六章 OsARF16突变影响糖的吸收代谢 | 第79-88页 |
| ·材料与方法 | 第79-80页 |
| ·水稻材料及培养条件 | 第79页 |
| ·水稻糖含量测定方法 | 第79页 |
| ·固体培养基的配制 | 第79页 |
| ·种子的前处理与播种 | 第79页 |
| ·样品前处理 | 第79页 |
| ·液相色谱上样测定 | 第79页 |
| ·水稻总RNA提取及逆转录,实时荧光定量PCR | 第79页 |
| ·体视镜及照相机使用方法 | 第79页 |
| ·植物蛋白提取方法 | 第79-80页 |
| ·中性/碱性蔗糖转化酶活性测定方法 | 第80页 |
| ·结果与分析 | 第80-86页 |
| ·OsARF16敲除改变葡萄糖、果糖、蔗糖含量及其比例 | 第80-81页 |
| ·中性蔗糖转化酶(OsNINs)基因在osarf16突变体中表达增高 | 第81-82页 |
| ·中性蔗糖转化酶(OsNINs)活性测定 | 第82-83页 |
| ·tfs^W/^/e突变减缓高浓度葡糖糖（7%)对植株生长的抑制 | 第83-86页 |
| ·植株生长及侧根发育 | 第83-84页 |
| ·植株体内糖含量 | 第84-85页 |
| ·7%葡萄糖诱导基因表达 | 第85-86页 |
| ·小结 | 第86-88页 |
| 第七章 OsIAA8的相关研究 | 第88-95页 |
| ·材料与方法 | 第88-90页 |
| ·OsIAA全长cDNA的获得 | 第88页 |
| ·荧光素酶蛋白互作实验方法 | 第88页 |
| ·载体的构建 | 第88页 |
| ·烟草叶片选用 | 第88页 |
| ·荧光素酶蛋白互作实验原理简介 | 第88页 |
| ·结果观察 | 第88页 |
| ·酵母双杂交实验方法 | 第88-90页 |
| ·载体的构建 | 第88-89页 |
| ·酵母菌种的选用及培养所需药品 | 第89页 |
| ·酵母感受态的制作 | 第89页 |
| ·酵母的转化 | 第89-90页 |
| ·双杂交结果观察 | 第90页 |
| ·OsIAA8超表达载体的构建 | 第90页 |
| ·35S::OsIAA8转基因材料获得 | 第90页 |
| ·Promter_(OsIAA8)：GUS转基因材料获得 | 第90页 |
| ·生理表型实验 | 第90页 |
| ·结果与分析 | 第90-94页 |
| ·两种方法验证OsIAA8与OsARF16互作 | 第90-91页 |
| ·对OsIAA8与OsARF16可能关系的分析 | 第91-92页 |
| ·OsIAA8超表达材料鉴定 | 第92页 |
| ·OsIAA8超表达材料表型初步观察 | 第92-93页 |
| ·OsIAA8表达位置初步鉴定 | 第93-94页 |
| ·小结与讨论 | 第94-95页 |
| 第八章 结论与展望 | 第95-99页 |
| ·结论 | 第95-97页 |
| ·OsARF16基因突变降低了植株对生长素的敏感性 | 第95页 |
| ·生长素运输受阻是osarf16对生长素不敏感的本质 | 第95-96页 |
| ·OsARF16基因在众多组织器官中表达 | 第96页 |
| ·内源较高浓度生长素促进植株对外界磷的吸收 | 第96页 |
| ·OsARF16基因突变导致植株磷信号的缺失 | 第96-97页 |
| ·磷信号对生长素信号的依赖 | 第97页 |
| ·OsARF16基因突变破换体内糖代谢平衡 | 第97页 |
| ·高浓度糖抑制水稻生长依赖于体内生长素快速运输 | 第97页 |
| ·展望 | 第97-99页 |
| 附件信息 | 第99-103页 |
| 附件一 OsARF MR结构域起始终止位置 | 第99页 |
| 附件二：核定位信号定位实验,OsARF分区Ⅰ-Ⅵ位置 | 第99页 |
| 附件三：核定位信号定位实验引物序列 | 第99-100页 |
| 附件四：OsARF16材料发展相关引物 | 第100页 |
| 附件五：OsYUCCA基因RT引物序列 | 第100页 |
| 附件六：OsPINs/OsLAXs/OsPGPs RT引物序列 | 第100-101页 |
| 附件七：磷信号相关基因RT引物 | 第101页 |
| 附件八：OsNINs引物序列 | 第101-102页 |
| 附件九：荧光素酶实验引物序列 | 第102页 |
| 附件十 OsIAA8材料发展相关引物 | 第102-103页 |
| References | 第103-119页 |
| 攻读博士期间发表的论文 | 第119页 |
