| 中文摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 英文缩写词 | 第12-15页 |
| 前言 | 第15-20页 |
| 工作假说 | 第20-21页 |
| 技术路线 | 第21-23页 |
| 第一部分 KU80对石英致DNA双链断裂修复及DNA-PK/JNK转导通路中信号分子的影响 | 第23-61页 |
| 引言 | 第23-25页 |
| 材料与方法 | 第25-39页 |
| 1. 实验材料 | 第25-31页 |
| ·细胞系 | 第25页 |
| ·感受态细菌 | 第25页 |
| ·质粒 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25-27页 |
| ·主要设备与器材 | 第27页 |
| ·主要试剂配制 | 第27-31页 |
| 2. 主要实验方法 | 第31-39页 |
| ·质粒转化大肠杆菌 | 第31页 |
| ·小规模扩增质粒 | 第31-32页 |
| ·质粒DNA的纯化 | 第32-33页 |
| ·建立稳定转染的细胞系 | 第33-34页 |
| ·Western blot实验方法 | 第34-36页 |
| ·免疫荧光实验 | 第36-37页 |
| ·彗星实验 | 第37-38页 |
| ·微核实验 | 第38页 |
| ·统计学方法 | 第38-39页 |
| 结果 | 第39-51页 |
| 1 抑制Ku80表达的稳定转染体的建立及鉴定 | 第39-42页 |
| ·Ku80的siRNA质粒 | 第39-40页 |
| ·Ku80的siRNA质粒转染人胚肺成纤维细胞 | 第40页 |
| ·稳定转染体的鉴定 | 第40-42页 |
| 2 Ku80对石英致DSBs修复的影响 | 第42-47页 |
| ·Ku80与石英刺激剂量反应关系和时间反应关系 | 第42-43页 |
| ·Ku80对H2AX磷酸化的影响 | 第43-45页 |
| ·中性彗星实验 | 第45-46页 |
| ·微核实验 | 第46-47页 |
| 3 Ku80对DNA-PK/JNK通路中信号分子表达及磷酸化的影响 | 第47-49页 |
| ·Ku 80与Ku 70、DNA-PKcs的关系 | 第47-48页 |
| ·Ku80对Akt、JNK、AP-1(侧重c-Jun)的影响 | 第48-49页 |
| 4 Akt、JNK、AP-1活性对γH2AX磷酸化水平的影响 | 第49-51页 |
| 讨论 | 第51-60页 |
| 1. 建立Ku80的siRNA质粒稳定转染人胚肺成纤维细胞的细胞系 | 第51-53页 |
| 2. Ku80表达对石英所致DSBs修复的影响 | 第53-56页 |
| 3. Ku80表达对DNA-PK/JNK信号通路中信号分子表达及活化的影响 | 第56-59页 |
| 4. Akt、JNK、AP-1活性对γH2AX磷酸化水平的影响 | 第59-60页 |
| 小结 | 第60-61页 |
| 第二部分 KU80对石英诱导的细胞周期改变的影响 | 第61-79页 |
| 引言 | 第61-64页 |
| 材料与方法 | 第64-66页 |
| 1. 细胞系 | 第64页 |
| 2. 主要仪器和试剂 | 第64-65页 |
| 3. 主要实验方法 | 第65页 |
| 4. 统计学方法 | 第65-66页 |
| 结果 | 第66-73页 |
| 1 Ku80表达对细胞周期的影响 | 第66-69页 |
| ·Ku80表达对石英诱导的细胞周期改变的影响 | 第66-67页 |
| ·Ku80对石英诱导的周期蛋白改变的影响 | 第67-69页 |
| 2. CDK4、CyclinDl表达对石英致DSBs修复的影响 | 第69-70页 |
| 3. DNA-PK/JNK通路及p53表达对CyclinE、CDK2表达的影响 | 第70-73页 |
| ·Ku80表达对石英诱导的CyclinE、CDK2水平的影响 | 第70页 |
| ·DNA-PKcs表达对石英诱导的CyclinE、CDK2水平的影响 | 第70-71页 |
| ·Akt、JNK及AP-1活性对石英诱导的CyclinE、CDK2水平的影响 | 第71-72页 |
| ·p53表达对石英诱导的CyclinE、CDK2水平的影响 | 第72-73页 |
| 讨论 | 第73-78页 |
| 小结 | 第78-79页 |
| 第三部分 PI3K对石英致DNA双链断裂修复的影响 | 第79-85页 |
| 引言 | 第79页 |
| 材料与方法 | 第79-80页 |
| 结果 | 第80-83页 |
| 1. PI3K对γH2AX磷酸化的影响 | 第80页 |
| 2. PI3K对Ku70、Ku80和DNA-PKcs蛋白水平的影响 | 第80-81页 |
| 3. PI3K对石英致DSBs修复的影响 | 第81-83页 |
| 讨论 | 第83-84页 |
| 小结 | 第84-85页 |
| 全文总结 | 第85-88页 |
| 参考文献 | 第88-95页 |
| 综述:KU蛋白与DNA双链断裂修复关系的研究进展 | 第95-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
| 个人简历 | 第102-104页 |
