| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-30页 |
| ·生物多样性及其分类方法 | 第13-19页 |
| ·生物多样性 | 第13页 |
| ·细菌分类鉴定方法概述 | 第13-18页 |
| ·芽孢杆菌分类方法 | 第18-19页 |
| ·微生物几丁质酶及其应用 | 第19-23页 |
| ·几丁质 | 第19页 |
| ·几丁质酶 | 第19-20页 |
| ·微生物几丁质酶 | 第20-23页 |
| ·微生物几丁质酶的表达调控 | 第23-28页 |
| ·碳源介导的代谢物阻遏(Catabolite Repression) | 第23-24页 |
| ·微生物几丁质酶基因调控研究现状 | 第24-25页 |
| ·微生物几丁质酶基因调控元件的研究 | 第25-28页 |
| ·主要研究内容及研究目的 | 第28-30页 |
| 第二章 产几丁质酶芽孢杆菌MY75的鉴定及特性 | 第30-46页 |
| ·实验材料 | 第32-34页 |
| ·菌株及培养基 | 第32页 |
| ·主要试剂和材料 | 第32-34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-39页 |
| ·Biolog微生物自动鉴定系统 | 第34-35页 |
| ·MY75菌株16S rDNA,gryA及ropB基因部分序列的克隆 | 第35-36页 |
| ·进化树绘制 | 第36-37页 |
| ·MY75菌株产几丁质酶曲线的绘制 | 第37-38页 |
| ·抑真菌活性检测 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-43页 |
| ·MY75菌株的鉴定 | 第39-41页 |
| ·MY75菌株产几丁质酶曲线 | 第41-42页 |
| ·MY75菌株抑真菌活性检测 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| ·本章小结 | 第45-46页 |
| 第三章 MY75几丁质酶基因的克隆、表达及酶的特性研究 | 第46-62页 |
| ·实验材料 | 第48-50页 |
| ·菌株及培养基 | 第48页 |
| ·主要试剂和材料 | 第48-49页 |
| ·主要仪器 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-52页 |
| ·地衣芽孢杆菌MY75几丁质酶粗蛋白的制备 | 第50页 |
| ·蛋白质SDS-PAGE电泳及酶谱分析 | 第50页 |
| ·地衣芽孢杆菌MY75几丁质酶基因的克隆及异源表达 | 第50-51页 |
| ·飞行时间质谱分析(time-of-flight mass spectrometer,TOF MS) | 第51页 |
| ·最佳温度、pH及热稳定性测定 | 第51页 |
| ·金属离子对几丁质酶活力的影响 | 第51-52页 |
| ·杯碟法检测抑真菌真菌活性 | 第52页 |
| ·几丁质酶对苏云金芽孢杆菌杀虫毒力的增效作用 | 第52页 |
| ·结果与分析 | 第52-59页 |
| ·MY75菌株培养上清中几丁质酶粗蛋白的SDS-PAGE及酶谱分析 | 第52-53页 |
| ·飞行时间质谱分析 | 第53-54页 |
| ·地衣芽孢杆菌MY75几丁质酶基因的克隆、表达 | 第54-56页 |
| ·异源表达的ChiMY75几丁质酶特性 | 第56-57页 |
| ·几丁质酶ChiMY75的抑真菌活性 | 第57-58页 |
| ·几丁质酶ChiMY75对苏云金芽孢杆菌杀虫毒力的增效作用 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| ·本章小结 | 第61-62页 |
| 第四章 芽孢杆菌几丁质酶基因正向重复序列缺失对酶异源表达的影响 | 第62-79页 |
| ·实验材料 | 第64-66页 |
| ·菌株及培养基 | 第64页 |
| ·主要试剂和材料 | 第64-65页 |
| ·主要仪器 | 第65-66页 |
| ·实验方法 | 第66-69页 |
| ·芽孢杆菌几丁质酶基因及其上游序列的克隆及分析 | 第66页 |
| ·芽孢杆菌几丁质酶基因上游序列的缺失 | 第66-67页 |
| ·上游序列缺失对芽孢杆菌几丁质酶基因表达水平的影响 | 第67-69页 |
| ·结果与分析 | 第69-76页 |
| ·芽孢杆菌几丁质酶全长基因的克隆及其重要调节元件的分析 | 第69-70页 |
| ·正向重复序列缺失基因的克隆 | 第70-71页 |
| ·正向重复序列缺失对几丁质酶表达水平的影响 | 第71-75页 |
| ·正向重复序列缺失对几丁质酶mRNA转录水平的影响 | 第75-76页 |
| ·讨论 | 第76-78页 |
| ·本章小结 | 第78-79页 |
| 第五章 研究结论与展望 | 第79-83页 |
| ·研究结论 | 第79-80页 |
| ·确定了MY75菌株的分类地位 | 第79页 |
| ·发现并证明MY75菌株几丁质酶有抑真菌活性 | 第79页 |
| ·确定MY75菌株几丁质酶分子量及部分酶学特性 | 第79页 |
| ·发现正向重复序列是芽胞杆菌几丁质酶基因负控制元件 | 第79-80页 |
| ·研究展望 | 第80-83页 |
| 参考文献 | 第83-92页 |
| 致谢 | 第92-94页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第94-95页 |
| 本论文感谢以下基金项目的资助 | 第95页 |
