| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 1 文献综述 | 第14-29页 |
| ·植物开花转变途径分子生物学基础 | 第14-27页 |
| ·自发途径 | 第14-17页 |
| ·FCA基因转录后调控控制开花时间 | 第15-16页 |
| ·FCA与FY作用控制开花时间 | 第16-17页 |
| ·春化途径 | 第17-21页 |
| ·FLC基因是一个开花抑制子且受低温调控 | 第17-18页 |
| ·春化"记忆"的表观遗传学机制 | 第18-21页 |
| ·光周期途径 | 第21-25页 |
| ·应答长日照启动开花 | 第21-22页 |
| ·光周期信号的产生 | 第22-23页 |
| ·光周期信号的特性 | 第23-25页 |
| ·FLC抑制光周期信号的产生 | 第25页 |
| ·GA途径 | 第25-26页 |
| ·结语与展望 | 第26-27页 |
| ·本论文研究目的意义和主要内容 | 第27-29页 |
| ·目的意义 | 第27-28页 |
| ·主要内容 | 第28-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-43页 |
| ·高羊茅的克隆FaVRN1、FaCONSTANS、FaVRT-2和FaSAMDC基因全长的cDNA克隆 | 第29-33页 |
| ·植物材料 | 第29页 |
| ·总RNA提取 | 第29页 |
| ·引物设计 | 第29-32页 |
| ·FaVRN1基因克隆引物设计与合成 | 第31页 |
| ·FaCONSTANS基因克隆引物设计与合成 | 第31页 |
| ·FaVRT-2基因克隆引物设计与合成 | 第31-32页 |
| ·FaSAMDC基因克隆引物设计与合成 | 第32页 |
| ·高羊茅FaVRN1、FaCONSTANS、FaVRT-2和FaSAMDC基因全长cDNA克隆 | 第32-33页 |
| ·高羊茅FaVRN1、FaCONSTANS、FaVRT-2和FaSAMDC基因编码蛋白质功能分析 | 第33页 |
| ·荧光定量分析 | 第33-37页 |
| ·材料处理 | 第33页 |
| ·构建标准品引物及Real-Time FQ-PCR引物设计 | 第33-34页 |
| ·体外转录获得RNA标准品 | 第34-36页 |
| ·Real-Time FQ-PCR标准曲线建立 | 第36页 |
| ·Real-Time FQ-PCR检测 | 第36-37页 |
| ·亚细胞定位分析 | 第37-39页 |
| ·洋葱表皮细胞培养 | 第37页 |
| ·金粉的处理 | 第37页 |
| ·设计带有HindⅢ和XbaⅠ酶切位点的引物 | 第37页 |
| ·融合载体构建 | 第37-38页 |
| ·制备微粒子弹 | 第38页 |
| ·基因枪轰击受体材料 | 第38-39页 |
| ·RNA干涉载体构建 | 第39-43页 |
| ·pBI121载体修饰 | 第39页 |
| ·引物设计 | 第39页 |
| ·PCR扩增 | 第39页 |
| ·载体与PCR产物双酶切及连接 | 第39页 |
| ·PCR扩增INT、FaVRN1和FaCONSTANS基因目的片段 | 第39-40页 |
| ·pBI121与INT回收产物连接 | 第40-41页 |
| ·pBI121与FaVRN1及FaCONSTANS目标序列正向连接 | 第41页 |
| ·pBI121与FaVRN1及FaCONSTANS目标序列反向连接 | 第41-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-86页 |
| ·高羊茅春化基因FaVRN1的克隆与分析 | 第43-47页 |
| ·FaVRN1基因全长克隆 | 第43-44页 |
| ·FaVRN1基因编码蛋白质分析 | 第44-45页 |
| ·FaVRN1基因编码蛋白质功能分析 | 第45-46页 |
| ·FaVRN1基因同源性分析 | 第46-47页 |
| ·高羊茅光周期调控基因CONSTANS的克隆与分析 | 第47-52页 |
| ·FaCONSTANS基因全长克隆 | 第47-49页 |
| ·FaCONSTANS基因编码蛋白质分析 | 第49-50页 |
| ·CONSTANS保守结构域分析 | 第50-51页 |
| ·FaCONSTANS基因同源性分析 | 第51-52页 |
| ·高羊茅FaVRT-2基因的克隆与分析 | 第52-56页 |
| ·FaVRT-2基因全长克隆 | 第52-53页 |
| ·FaVRT-2基因编码蛋白质分析 | 第53-54页 |
| ·FaVRT-2保守结构域分析 | 第54-55页 |
| ·FaVRT-2基因同源性分析 | 第55-56页 |
| ·高羊茅腺苷甲硫氨酸脱羧酶基因FaSAMDC的克隆与分析 | 第56-62页 |
| ·FaSAMDC基因全长克隆 | 第56-58页 |
| ·FaSAMDC基因编码蛋白质分析 | 第58-60页 |
| ·FaSAMDC保守结构域分析 | 第60-61页 |
| ·FaSAMDC基因的同源性分析 | 第61-62页 |
| ·高羊茅春花与光周期调控相关基因差异表达分析 | 第62-80页 |
| ·Real-Time FQ-PCR标准曲线的建立 | 第62-67页 |
| ·Real-Time FQ-PCR定量结果 | 第67-80页 |
| ·亚细胞定位分析 | 第80-82页 |
| ·融合表达载体的构建 | 第80页 |
| ·FaVRN1、FaCONSTANS和FaVRT-2在洋葱表皮细胞的瞬时表达 | 第80-82页 |
| ·RNA干涉载体 | 第82-86页 |
| ·pBI121载体修饰 | 第82页 |
| ·获得构建RNA干扰载体的目的序列 | 第82-83页 |
| ·连接p-INT序列 | 第83页 |
| ·p-CONSTANS/p-VRN1正向连接 | 第83-85页 |
| ·p-CONSTANS/p-VRN1反向连接 | 第85-86页 |
| 4 讨论 | 第86-96页 |
| ·FaVRN1基因编码一个MADS-box转录因子 | 第86页 |
| ·FaVRN1基因受春化作用正调控 | 第86-87页 |
| ·高羊茅FaCONSTANS是一个CONSTANS同源物 | 第87-88页 |
| ·FaCONSTANS基因长日照促进高羊茅开花 | 第88-91页 |
| ·VRT-2基因是一个开花抑制子 | 第91-93页 |
| ·FaVRT-2基因应答春化作用 | 第93-94页 |
| ·FaSAMDC基因5’-UTR具有两个uORF | 第94-95页 |
| ·生物钟控制FaSAMDC基因昼夜表达节律 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-109页 |
| 致谢 | 第109-110页 |
| 附录 | 第110-111页 |
| 攻读学位期间发表和拟发表的学术论文 | 第111页 |
