| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 1.文献综述 | 第8-26页 |
| 1.1 烟草 | 第8-12页 |
| 1.1.1 烟草简介 | 第8-9页 |
| 1.1.2 贵烟1号 | 第9-12页 |
| 1.2 镉 | 第12-15页 |
| 1.2.1 镉污染来源及现状 | 第12-14页 |
| 1.2.2 镉对人体的伤害 | 第14页 |
| 1.2.3 烟草镉污染的研究 | 第14-15页 |
| 1.3 烟草中的生物碱 | 第15-16页 |
| 1.3.1 烟碱的生物合成 | 第15-16页 |
| 1.3.2 降烟碱的生物合成 | 第16页 |
| 1.4 烟草镉和降烟碱的遗传控制及培育 | 第16-17页 |
| 1.5 镉转运与降烟碱代谢相关基因的研究 | 第17-19页 |
| 1.5.1 镉转运相关基因 | 第17-18页 |
| 1.5.2 降烟碱代谢的相关基因 | 第18-19页 |
| 1.6 突变基因检测技术 | 第19-25页 |
| 1.7 论文的主要研究内容与目的 | 第25-26页 |
| 引言 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-35页 |
| 2.1 HRM体系的建立及优化 | 第27-28页 |
| 2.1.1 HRM突变检测的最小检测限优化 | 第27-28页 |
| 2.1.2 不同突变类型目标片段的检测 | 第28页 |
| 2.1.3 HRM检测片段的长度 | 第28页 |
| 2.2 利用HRM技术筛选镉转运和降烟碱代谢相关突变基因 | 第28-32页 |
| 2.2.1 试验材料 | 第28-29页 |
| 2.2.2 突变基因引物设计 | 第29页 |
| 2.2.3 引物退火温度的优化 | 第29-31页 |
| 2.2.4 PCR及HRM检测 | 第31页 |
| 2.2.5 PCR产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第31页 |
| 2.2.6 突变材料的PCR扩增,切胶回收与DNA测序 | 第31-32页 |
| 2.2.7 测序结果分析 | 第32页 |
| 2.3 突变材料镉的测定 | 第32-35页 |
| 2.3.1 供试材料 | 第32页 |
| 2.3.2 烟草幼苗培养与移栽 | 第32页 |
| 2.3.3 烟草幼苗水培与镉胁迫处理 | 第32-33页 |
| 2.3.4 样品处理和测定 | 第33-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-54页 |
| 3.1 HRM体系的建立及优化的影响 | 第35-39页 |
| 3.1.1 HRM应用于烟草突变的检测限 | 第35-36页 |
| 3.1.2 突变类型对HRM检测影响 | 第36-37页 |
| 3.1.3 检测的片段长度大小优化 | 第37-39页 |
| 3.2 利用HRM技术筛选镉转运和降烟碱代谢相关突变基因的结果 | 第39-51页 |
| 3.2.1 筛选材料的田间长势 | 第39-40页 |
| 3.2.2 突变基因设计引物的特异性 | 第40页 |
| 3.2.3 相关引物的退火温度的筛选 | 第40-41页 |
| 3.2.4 突变基因的HRM第一轮检测结果 | 第41-48页 |
| 3.2.5 烟草基因组突变频率的分析 | 第48-49页 |
| 3.2.6 基因纯合突变单株的获得 | 第49-51页 |
| 3.3 突变材料镉的测定结果 | 第51-54页 |
| 3.3.1 水培试验图 | 第51-53页 |
| 3.3.2 突变材料叶片Cd含量的分析 | 第53-54页 |
| 4.结论与讨论 | 第54-56页 |
| 4.1 影响HRM检测突变基因的因素 | 第54页 |
| 4.2 利用HRM筛选烟草基因突变 | 第54-55页 |
| 4.3 烟草低镉材料的选育及其应用前景 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |
