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基于质谱技术的阿尔兹海默症小鼠脑组织中标志物的定量技术研究

学位论文数据集第3-4页
摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
符号说明第15-16页
第一章 绪论第16-28页
    1.1 阿尔兹海默症及其标志物第16-18页
    1.2 免疫沉淀-MAIDI-TOF MS定量蛋白技术第18-21页
        1.2.1 Aβ蛋白的定量分析第18页
        1.2.2 免疫沉淀技术第18-19页
        1.2.3 基于MALDI-TOF MS定量蛋白技术第19-20页
            1.2.3.1 MALDI-TOF MS的基本原理第19-20页
            1.2.3.2 内标的选择第20页
        1.2.4 免疫沉淀-MALDI-TOF MS联用技术第20-21页
    1.3 ID-ICP-MS测量各脑区中的金属元素第21-24页
        1.3.1 阿尔兹海默症小鼠各脑区中金属元素的分布第21-22页
        1.3.2 ID-ICP-MS概述第22-24页
            1.3.2.1 同位素稀释法第22页
            1.3.2.2 ICP-MS技术第22-24页
    1.4 与阿尔兹海默症有关的蛋白与金属间的关系第24-26页
        1.4.1 Aβ蛋白第24-25页
        1.4.2 Tau蛋白第25页
        1.4.3 APP蛋白第25-26页
        1.4.4 MT-3蛋白第26页
    1.5 论文选题意义及目的第26-28页
第二章 免疫沉淀-MALDI-TOF MS方法定量脑组织中的Aβ蛋白第28-46页
    2.1 引言第28页
    2.2 实验部分第28-34页
        2.2.1 仪器与试剂第28-30页
            2.2.1.1 仪器与设备第28-29页
            2.2.1.2 试剂与材料第29-30页
        2.2.2 Aβ_(1-40)蛋白标准品纯度的确定第30-31页
        2.2.3 鼠脑总蛋白的测定第31页
        2.2.4 免疫沉淀富集Aβ_(1-40)蛋白第31-32页
        2.2.5 MALDI-TOF质谱分析条件第32-33页
        2.2.6 ELISA法测定Aβ_(1-40)蛋白第33-34页
    2.3 结果与讨论第34-44页
        2.3.1 不同浓度的Aβ_(1-40)与内标蛋白的线性关系第34-37页
        2.3.2 抗体的优化第37-41页
            2.3.2.1 KLVFF多肽第37-38页
            2.3.2.2 金斯瑞/Abcam两种Aβ_(1-40)抗体第38-39页
            2.3.2.3 Biolegend三种抗体第39-41页
        2.3.3 洗脱条件的优化第41-42页
        2.3.4 免疫沉淀-MALDI-TOF MS方法重复性第42页
        2.3.5 免疫沉淀-MALDI-TOF MS方法线性第42-43页
        2.3.6 免疫沉淀-MALDI-TOF MS方法定量鼠脑组织的Aβ_(1-40)蛋白第43-44页
    2.4 本章小结第44-46页
第三章 ID-ICP-MS法测定阿尔兹海默症小鼠各脑区(海马、皮层、丘脑等)中铁、铜、锌的含量第46-58页
    3.1 引言第46-48页
        3.1.1 同位素稀释质谱法概述第46页
        3.1.2 同位素稀释质谱法的原理、特点及操作流程第46-48页
    3.2 实验部分第48-52页
        3.2.1 仪器与试剂第48-49页
            3.2.1.1 仪器与设备第48页
            3.2.1.2 试剂与材料第48-49页
        3.2.2 QC样品及鼠脑样品的制备第49页
        3.2.3 同位素稀释剂加入量的计算第49-50页
        3.2.4 ID-ICP-MS样品预处理第50页
        3.2.5 ICP-MS测定条件第50-51页
        3.2.6 ID-ICP-MS测定鼠脑各脑区中的铁、铜、锌元素含量第51-52页
    3.3 结果与讨论第52-56页
        3.3.1 方法的定量限和检出限第52页
        3.3.2 精密度试验第52页
        3.3.3 重复性试验第52页
        3.3.4 方法准确度试验第52-53页
        3.3.5 样品的测定结果与讨论第53-55页
        3.3.6 QC样本的控制第55页
        3.3.7 流程空白的控制第55-56页
    3.4 本章小结第56-58页
第四章 与阿尔兹海默症有关的蛋白与金属间的关系第58-66页
    4.1 引言第58页
    4.2 实验部分第58-60页
        4.2.1 仪器与试剂第58-59页
            4.2.1.1 仪器与设备第58页
            4.2.1.2 试剂与材料第58-59页
        4.2.2 样品预处理第59页
        4.2.3 ELISA测定小鼠各脑区中的蛋白第59-60页
            4.2.3.1 ELISA测定小鼠各脑区中的Aβ_(1-40)蛋白第59页
            4.2.3.2 ELISA测定小鼠各脑区中的Aβ_(1-42)蛋白第59页
            4.2.3.3 ELISA测定小鼠各脑区中的APP蛋白第59-60页
            4.2.3.4 ELISA测定小鼠各脑区中的Tau蛋白第60页
            4.2.3.5 ELISA测定小鼠各脑区中的MT-3蛋白第60页
    4.3 结果与讨论第60-64页
        4.3.1 标准曲线的建立第60-61页
        4.3.2 样品测定结果及讨论第61-64页
    4.4 本章小结第64-66页
第五章 结论与展望第66-68页
参考文献第68-74页
致谢第74-76页
研究成果及发表论文第76-78页
作者和导师介绍第78-79页
附件第79-80页

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